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1.
目的 探索核仁小分子RNA宿主基因6(SNHG6)在结肠癌组织中的表达特点,以及其对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 采用荧光定量PCR检测25例患者结肠癌组织及对应癌旁组织中SNHG6 mRNA的表达水平.将LoVo细胞分成Blank组、NC组、siRNA-1组和siRNA-2组,其中Blank组不作任何处理,另外3组依次使用Lipofectamine 2000转染NC-siRNA、SNHG6-siRNA-1及SNHG6-siRNA-2;通过CCK-8实验测定细胞增殖能力,通过Transwell实验测定细胞迁移及侵袭能力;通过荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测上皮-间质转化(EMT)标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Snail的mRNA及蛋白表达水平.结果 患者结肠癌组织SNHG6 mRNA表达水平高于对应癌旁组织(U=138.0,P=0.000 7).siRNA-1组和siRNA-2组细胞增殖活性较Blank组明显下降(P<0.05);siRNA-1组和siRNA-2组细胞的迁移和侵袭数量较Blank组明显减少(P<0.05);siR-NA-1组、siRNA-2组与Blank组比较,E-Cadherin mRAN及蛋白表达上调,N-Cadherin、Vimentin及SnailmRNA及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SNHG6在结肠癌组织中高表达,敲低SNHG6表达能够抑制结肠癌细胞EMT进程,进而抑制细胞的增殖、迁移及侵袭能力. 相似文献
2.
目的:探讨结肠癌组织及细胞株中microRNA-155(miR-155)表达的临床病理意义.方法:采用RT-qPCR检测40例结肠癌组织及癌旁组织、结肠癌细胞株中miR-155的mRNA的表达,并对其临床病理指标进行分析,分析抑制miR-155表达对结肠癌细胞增殖、克隆形成及凋亡影响.结果:RT-qPCR检测结果表明40例结肠癌组织中miR-155相对表达量明显高于癌旁组织(P<0.01).不同分化结肠癌细胞miR-155相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),其中低分化结肠癌细胞中表达均高于中、高分化结肠癌细胞(P<0.05~P<0.01).miR-155的异常高表达与病人肿瘤较大、分化程度差、淋巴结发生转移情况及远处有转移均有关(P<0.05~P<0.01),而与年龄和性别无关(P>0.05).抑制miR-155可明显抑制结肠癌细胞增殖、克隆形成.结论:结肠癌组织中高表达miR-155可以作为预测恶性程度、淋巴转移的有效指标,miR-155在结肠癌病人的临床靶向治疗中具有一定的价值. 相似文献
3.
目的 检测丙酮酸脱氢酶激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)在结肠癌组织及癌旁黏膜组织中的表达情况,初步探讨其临床意义.方法 应用组织芯片技术结合免疫组织化学染色方法,检测本院收治的172例结肠癌患者术后组织标本及86例癌旁肠黏膜组织中PDK4蛋白的表达,对结果及临床病理学参数进行统计学分析.结果 PDK4在172例结肠癌组织中高表达率显著高于86例癌旁肠黏膜组织(57.0% vs 26.7%,P<0.01),PDK4蛋白表达高低与结肠癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移、预后等密切相关(P<0.05),且PDK4高表达组患者的生存时间显著低于低表达组患者(P<0.01).在临床分期低的结肠癌患者中,PDK高表达者预后较差(P<0.01);而在临床分期高的结肠癌患者中,PDK表达高低预后差异无统计学意义.结论 PDK4蛋白在结肠癌组织中表达高于癌旁肠黏膜组织,其可能参与结肠癌的发生、发展. 相似文献
4.
目的探讨MicroRNA-126(miR-126)在人结肠癌细胞中的表达以及对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法应用荧光PCR定量检测60例结肠癌患者的结肠癌组织以及癌旁组织中miR-126的表达,共60对,再测定5株结肠癌细胞(SW480、HT29、HCT116、LOVO、SW620)中的表达情况;CCK-8法、划痕实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并进一步通过体外实验研究miR-126对结肠癌细胞生物学行为的影响。结果与癌旁组织细胞比较,miR-126在结肠癌细胞中表达下降(95.0%vs.55.0%,P<0.05),发生转移者与未发生转移者比较,差异有统计学意义(25.0%vs.75.0%,P<0.05)。miR-126可以抑制SW480细胞的生长及其侵袭转移,有基质胶Tran—swell实验中,转染组及空白对照组细胞迁移数分别为(10.0±4.3)个和(258.0±30.6)个;无基质胶的Transwell实验中,分别为(84.0±13.2)个和(335.0±27.3)个,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-126高表达可以增强癌细胞对奥沙利铂的敏感性。结论miR-126可明显抑制结肠癌细胞的发生发展,影响多种结肠癌细胞株生物学行为。 相似文献
5.
目的 研究口腔癌过表达蛋白1 (oral cancer overexpressed protein 1,ORAOV1)在人结肠癌组织中的表达变化并探讨其对结肠癌细胞增殖能力、细胞周期及早期凋亡的影响.方法 收集人结肠癌及癌旁组织标本,分别以qRT-PCR及Western blot检测ORAOV1在mRNA及蛋白水平的表达变化情况;采用RNAi技术获得ORAOV1低表达的LoVo及SW480细胞株,并使用Western blot对干扰结果进行鉴定;采用CCK-8检测干扰ORAOV1表达后两种结肠癌细胞增殖能力的变化;并采用流式细胞术检测干扰ORAOV1表达对结肠癌细胞周期及早期凋亡的影响.结果 qRT-PCR及Western blot结果分别显示结肠癌组织中的ORAOV1 mRNA及蛋白水平高于癌旁组织(P<0.05);Western blot检测证实LoVo及SW480细胞中ORAOV1干扰成功;在这两种结肠癌细胞株中,CCK-8检测结果显示,干扰ORAOV1可抑制细胞增殖能力;流式细胞术结果显示,干扰ORAOV1可使处于S期比例增加(P<0.05)、早期凋亡比例增加(P<0.05).结论 结肠癌组织中的ORAOV1表达增加,干扰ORAOV1可降低结肠癌细胞的增殖能力,可能与S期阻滞及细胞早期凋亡增加有关. 相似文献
6.
目的 探讨沉默人附睾蛋白4(HE4)对结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡和JAK/STAT3信号通路的影响.方法 选取124例结肠癌患者和40例健康人.用Western blot和免疫组织化学染色法检测结肠癌组织和癌旁组织中HE4的表达水平.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠癌患者和健康人血清中HE4的表达水平.Western blot检测结肠癌细胞株Caco-2、SW480、HT-29、HCT-116和正常结肠上皮细胞株HCoePic 中 HE4的表达水平.用 HE4 si-RNA 或 si-control 分别转染HT-29细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,Annexin-V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况.Western blot检测JAK1、p-JAK1、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3的蛋白表达水平.结果 结肠癌组织HE4蛋白相对表达量高于癌旁组织(P<0.05).HE4在结肠癌组织中呈阳性表达,其中高表达78例(62.90%),而癌旁组织中高表达仅24例(19.35%),差异有统计学意义(P<0.05).结肠癌患者血清HE4浓度高于健康人(P<0.05).结肠癌 Caco-2、SW480、HT-29、HCT-116细胞的HE4蛋白相对表达量均高于正常结肠上皮HCoePic细胞(均P<0.05).HE4表达水平与性别、年龄、肿瘤大小无关,而与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05).沉默HE4后,HT-29细胞的增殖和侵袭能力下降,而凋亡率提高(均P<0.05).沉默HE4对JAK1、JAK2和STAT3总蛋白无明显影响,但是可以下调p-JAK1、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量(均P<0.05).结论 沉默HE4可以抑制结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡,并且下调JAK/STAT3信号通路相关蛋白的表达. 相似文献
7.
《医学综述》2019,(2)
目的探讨miR-346及L1细胞黏附因子(L1CAM)在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取2016年5月至2017年5月中国医科大学肿瘤医院病理标本库保存的手术切除结肠癌手术标本68例,包括结肠癌组织、癌旁组织及正常结肠组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应及免疫组织化学法检测组织中miR-346、L1CAM信使RNA(mRNA)的表达及L1CAM蛋白表达,观察miR-346及L1CAM mRNA与肿瘤部位、直径、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等临床病理参数的关系,分析miR-346与L1CAM的相关性。结果结肠癌组织miR-346表达高于癌旁组织及正常结肠组织(1. 272±0. 501比0. 621±0. 168、0. 201±0. 078)(P <0. 01),癌旁组织与正常结肠组织比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结肠癌组织L1CAM mRNA表达高于癌旁组织及正常结肠组织(1. 035±0. 592比0. 452±0. 122、0. 246±0. 085)(P <0. 01),癌旁组织与正常结肠组织比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。L1CAM蛋白表达于结肠癌细胞膜,在癌旁组织及正常结肠组织中无表达。结肠癌组织中miR-346与L1CAM mRNA表达量呈正相关(r=0. 864,P <0. 05)。结肠癌组织中miR-346及L1CAM蛋白在肿瘤浸润T_3~T_4、远处转移M_1、淋巴结转移阳性、血管浸润阳性、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及肿瘤分化程度低分化中表达更高(均P <0. 05)。结论 miR-346及L1CAM mRNA在结肠癌组织中高表达,可能共同调控结肠癌侵袭及转移。 相似文献
8.
目的观察尼美舒利对脱氧胆酸(DCA)诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的机制。方法200μmol/L DCA加到HT-29细胞培养液中,同时给予不同浓度尼美舒利(50、75、100μmol/L),采用MTT法测定细胞增殖;RT-PCR法检测环氧合酶-2(COX-2)mRNA,免疫组化染色法检测细胞COX-2表达,放免法检测前列腺素E2(PGE2)含量。结果DCA作用HT-29细胞6h,COX-2蛋白表达阳性率较对照组明显升高〔(64.2±6.2)%或(7.1±1.9)%〕,PGE2合成增加〔(23.9±1.3)ng/L或(10.5±0.9)ng/L〕,尼美舒利对DCA诱导的HT-29细胞作用6h可抑制细胞增殖,并可抑制DCA诱导的COX-2mRNA表达,抑制PGE2合成,上述作用均呈浓度-时间依赖性。结论尼美舒利可抑制DCA诱导的HT-29人结肠癌细胞增殖,抑制COX-2 mRNA表达和蛋白表达及PGE2合成,这可能是尼美舒利抑制HT-29细胞增殖的机制之一。 相似文献
9.
目的研究分析miR-93在结肠癌组织中的表达,探讨其在结肠癌细胞增殖、细胞周期及凋亡中的意义。方法采用TagMan MGB探针法定量分析101例结肠癌组织及癌旁组织miR-93的表达;利用反义技术降低结肠癌细胞SW480和LoVo的miR-93的表达;采用MTT比色法检测细胞增殖的改变;利用流式细胞技术检测结肠癌细胞周期和凋亡情况。结果在101例结肠癌组织中,53.47%(54/101)的结肠癌组织miR-93表达明显高于癌旁组织(P<0.05);反义miR-93转染结肠癌细胞SW480和LoVo后,miR-93的表达明显降低,细胞生长受到明显抑制,主要停滞在G0/G1期,早期凋亡明显增加。结论 miR-93在结肠癌组织中表达上调。降低其表达能明显抑制SW480和LoVo细胞的生长和诱导细胞早期凋亡。 相似文献
10.
目的 研究环氧合酶-2(COX-2)小分子干扰RNA(siRNA)对COX-2高表达的人结肠癌细胞的增殖和凋亡的影响.方法 筛选出最佳的靶向COX-2 siRNA转染人结肠癌HT-29细胞,采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)Western印迹分别从mRNA和蛋白水平检测抑制效果,四甲基偶氮唑蓝(MTT)和Hoechst染色检测COX-2表达被抑制后细胞增殖和凋亡的情况.结果 COX-2 siRNA能在mRNA和蛋白水平下调人结肠癌细胞株HT-29中COX-2基因的表达(P<0.05),以转染72 h时最显著.COX-2表达被抑制后,转染后72 h时HT-29细胞生长受到明显抑制(P<0.05),凋亡细胞显著增加.结论 COX-2与结肠癌细胞的生长和凋亡密切相关,抑制结肠癌细胞中COX-2表达可抑制结肠癌细胞生长,促进结肠癌细胞凋亡. 相似文献
11.
12.
研究Ki 67基因在人类正常和异常细胞的mRNA转录和翻译 ,了解其在肿瘤细胞增殖中的作用。方法 以PCR扩增Ki 67基因的exon 13、codon 2的cDNA片断 ( 4 35bp) ,地高辛标计转录合成mRNA探针 ,原位杂交结合MIB 1免疫组化分析Ki 67基因的第 13外显子 (exon 13)在Hela细胞、结肠癌细胞、扁桃体和胰腺癌石蜡切片中的转录及翻译。结果 应用地高辛标记的mRNA原位杂交技术可成功地在Hela细胞、结肠癌细胞、扁桃体和胰腺癌的石腊切片检测到Ki 67mRNA信号 ,结肠癌和胰腺癌细胞均存在Ki 67基因的exon 13mRNA的过度转录 ,并且exon 13的转录与MIB 1所测Ki 67蛋白相一致。结论 本研究首次在人类组织和细胞中 ,应用原位杂交和免疫组化研究Ki 67基因外旋子 13的转录和翻译 ,研究发现结肠癌和胰腺癌Ki 67基因的exon 13的过度转录 ,并与其蛋白水平高度相关 ,提示该此基因表达异常 ,尤其是exon 13,在恶性肿瘤的发生和发展可能起一定作用。 相似文献
13.
目的:研究多激酶抑制剂甲苯磺酸索拉非尼(SOR)是否具有增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法:体外培养HT-29细胞。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析亚二倍体(sub-G1)细胞百分率。比色法测定细胞Caspase-3活性。AO/EB双染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果:SOR(5μmol/L)和TRAIL(100ng/mL)以及两者合用作用48小时HT-29细胞的sub-G1百分率分别是4.65%±2.33%、5.29%±2.80%和42.6.50%±4.65%;HT-29细胞的Caspase-3的活性分别是培养基组的1.24、1.37和9.51倍。两者合用展示出细胞核染色质固缩和碎裂的典型凋亡细胞形态。结论:亚细胞毒性浓度的SOR具有增强TRAIL诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。 相似文献
14.
miR-126靶向调控IRS1,SLC7A5及TOM1基因抑制结肠癌的增殖及侵袭转移 总被引:1,自引:0,他引:1
目的: 通过研究miR-126在人结肠癌细胞中的表达及其对结肠癌细胞生物学行为的影响,了解miR-126在结肠癌发生发展中的作用。方法: 利用原位杂交在高密度人结肠癌组织芯片中研究miR-126的表达,通过慢病毒转染构建miR-126稳定过表达细胞系,并进一步通过体外实验研究miR-126对结肠癌细胞生物学行为的影响。结果: miR-126在人结肠癌组织中表达下调,在存在侵袭转移患者的结肠癌组织中下调尤为明显。miR-126的表达与患者是否发生转移及结肠癌临床分期、Duke's分期相关(P<0.05),且miR-126下调越明显,患者预后越差(P=0.025)。利用慢病毒转染构建的miR-126过表达SW480细胞系进行体外实验显示结肠癌细胞中恢复miR-126的表达可抑制结肠癌细胞增殖,使其出现G1期阻滞并促进结肠癌细胞凋亡、抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力。同时miR-126可明显增强结肠癌细胞对化疗药物奥沙利铂的敏感性。进一步生物信息学分析及qRT-PCR结合蛋白免疫印迹法验证IRS1,SLC7A5及TOM1可能为miR-126在结肠癌中的靶基因。结论: miR-126可明显抑制结肠癌的发生发展,且与结肠癌患者预后密切相关,其可能调控的靶基因为IRS1,SLC7A5及TOM1,miR-126有望成为结肠癌临床诊断及治疗的新靶点。 相似文献
15.
目的 探讨结肠癌干细胞中不同基因启动子的活性,寻找可能用于结肠癌干细胞靶向治疗的启动子.方法 应用流式细胞仪分选人结肠癌HCT116细胞系中CD133+ CD44+标记的肿瘤干细胞.采用PCR技术获取Nanog、Muc1和Survivin基因启动子并分别克隆入pGL3-basic质粒.将含有启动子的pGL3-basic质粒和pGL3-control质粒分别与pRL-sv40共转染结肠癌细胞(HCT116、SW620、HT29)、结肠癌干细胞(CD133+ CD44+ HCT116)及人正常肝细胞(QSG7701),通过检测双荧光素酶活性以测定启动子活性.结果 pGL3-basic-Nanog、pGL3-basic-Muc1、pGL3-basic-Survivin经测序鉴定正确.HCT116细胞系中CD133+ CD44+细胞比率约占42.2%.双荧光素酶活性检测显示:在HCT116、SW620、HT29和CD133+ CD44+ HCT116细胞中,Muc1与Survivin均表现出了较强的活性,而在正常细胞QSG7701中活性较低.结论 Muc1、Survivin启动子可能是用于靶向结肠癌干细胞治疗的有效候选启动子. 相似文献
16.
目的探讨尼美舒利对体外培养的结肠癌细胞生长及细胞周期分布的影响。方法以人结肠癌细胞株HT-29、HCT-116为对象,用体外药物敏感实验(MTT)法检测尼美舒利对肿瘤细胞的增殖抑制效应,流式细胞术检测肿瘤细胞周期分布变化情况。结果(1)尼美舒利对人结肠癌细胞株生长的抑制作用呈时间、剂量依赖性效应,且对HT-29细胞作用强于HCT-116细胞;(2)尼美舒利可改变结肠癌细胞株细胞周期的分布,明显降低增殖指数。结论尼美舒利可通过抑制COX2酶活性而抑制肿瘤细胞的分裂和增殖,诱导其凋亡,干预结肠癌的发展。 相似文献
17.
目的 探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。 方法根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,siRNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。 结果 所设计的5个siRNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好。以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性。MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4siRNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.05)。 结论 PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用,以PLK1 siRNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。 相似文献
18.
Cancer Research Laboratory Hunan Medical College Changsha Ho JJL Kim YSDepartment of Internal Medicine University of Californi Sanfitancisco. 《中华医学杂志(英文版)》1986,99(1):63-74
Three monoclonal antibodies (Hb3, Ab5, and
Ad5) were produced with spleen cells from mice im
munized against the human colon cancer cell line
HT-29. Hb3 reacted with 86%, while Ab3 and Ad5
with 40-60%, of the colon cancer tissues tested. Re-
activity was also seen with the cancerous stomach,
pancreas, lung, nasopharynx, breast and prostate,
although in Hb3 the intensity of immunofluorescent
staining of these tissues was not as great as of colon
cancer tissues. None of the monoclonal antibodies
reacted with normal colon samples so they were able
to distinguish the normal from the cancerous colon
tissues. Yet monoclonal antibodies did react with
the normal duodenum, stomach, pancreas, lung, and
kidney. The three antibodies can be differentiated
from each other on the basis of their cell and tissue
specificities and from the colon cancer reactive mo-
noclonal antibody 19-9. Neuraminidase digestion of
the tissue or cells had no effect on their reactivities.
- 63 - 相似文献
19.
博来霉素A6对裸鼠移植的人体大肠癌的抑制作用 总被引:11,自引:1,他引:10
在裸鼠移植人结肠癌HT-29和人盲肠癌Hce-8693细胞,使用裸鼠可耐受的博来霉素A_6剂量,结果博来霉素A_6对肿瘤生长有明显的抑制作用,抑制率达90%左右。与等毒性剂量的5-氟脲嘧啶和丝裂霉素C比较,博来霉素A_6不仅对裸鼠移植的人结肠癌HT-29生长的抑制作用明显较强,且残存的非坏死肿瘤组织也较少。提示博来霉素A_6是一种对大肠癌有较强抗肿瘤活性的药物。 相似文献