Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎发病过程中氨基脲敏感性胺氧化酶的活性变化

目的 探讨氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性在类风湿性关节炎发病过程中的变化.方法 取25只Wistar大鼠,尾根部多点注射Ⅱ型胶原制作类风湿性关节炎大鼠模型,以造模当天为0 d,在造模第3、7、14和21天,分别处死5只大鼠,取血浆和踝关节组织,分别检测SSAO活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平.另取5只大鼠作为空白对照组.结果 造模后第12天大鼠开始发病;关节组织SSAO活性于造模第3天开始升高,第7天升高到最高,之后开始降低;血浆SSAO活性变化不明显.血浆和组织中TNF-α及ICAM-1水平均随关节炎发病过程出现显著变化.结论 Ⅱ型胶原大鼠关节炎发病过程中伴随有SSAO活性的变化.     

痹肿消汤对实验性关节炎大鼠血浆TNF-α及IL-1β的影响

目的观察痹肿消汤(BZXD)对实验性关节炎大鼠血浆TNF-α和IL-1 β的影响,探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制.方法75只SD大鼠随机分为4组,皮下注射Ⅱ型胶原诱导实验性关节炎模型,采用放免法检测各组大鼠不同时间血浆TNF-α和IL-1 β水平.结果造模大鼠88%出现关节炎症状;造模25 d后,模型组、痹肿消汤组及甲氨喋呤组TNF-α和IL-1β水平明显高于正常组(P＜0.05);且模型组的TNF-α和IL-1β水平明显高于痹肿消汤组及甲氨喋呤组(P＜0.01);随着时间的延长,模型组TNF-α和IL-1 β水平逐渐升高,痹肿消汤组及甲氨喋呤组则逐渐降低;而痹肿消汤组TNF-α和IL-1 β水平低于甲氨喋呤组(P＜0.05).结论TNF-α和IL-1 β在RA滑膜组织炎症形成和发展中发挥着重要作用;痹肿消汤能下调血浆TNF-α和IL-1 β的水平,其作用优于甲氨喋呤组.     

类风湿性关节炎病证结合大鼠模型的建立及血清免疫球蛋白G、乳酸脱氢酶水平变化的研究

目的观察Ⅱ型胶原诱导及风寒湿、风湿热环境刺激对大鼠类风湿性关节炎(RA)模型的建立及血清免疫球蛋白G(IgG)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化。方法将40只SD大鼠随机分为空白组、Ⅱ型胶原组、Ⅱ型胶原+风寒湿组、Ⅱ型胶原+风湿热组,每组10只,雌雄各半。除空白组外,各组大鼠于实验当天在背部、尾根部皮内注射Ⅱ型胶原乳剂,第12天强化免疫。病证结合模型从造模第2天开始分别给予风寒湿或风湿热环境刺激,每次30min,连续刺激28d。其中,每3d测定大鼠体质量变化,每2d测定大鼠足趾肿胀度变化。至第28天处死,测定大鼠血清IgG含量和LDH活性。结果造模后各模型组足趾肿胀度明显升高,至第16天达高峰,差异具有高度统计意义(P0.01)。与空白组比较,各模型组大鼠血清IgG含量均有所升高,其中Ⅱ型胶原+风寒湿组升高较显著,差异有统计意义(P0.05)。与空白组比较,LDH活性呈现2种趋势:Ⅱ型胶原组、Ⅱ型胶原+风寒湿组的LDH活性升高,差异有统计意义(P0.05);Ⅱ型胶原+风湿热组的LDH活性降低,差异有统计意义(P0.05),且Ⅱ型胶原+风寒湿组与Ⅱ型胶原+风湿热组的LDH活性差异有统计意义(P0.05)。结论Ⅱ型胶原加风寒湿、风湿热环境因素刺激,可以复制病证结合RA大鼠模型,这种模型在一定程度上可以模拟中医寒湿痹证和湿热痹证。     

刺山柑果实精制提取物抗类风湿关节炎的实验研究

目的评价刺山柑果实精制提取物对弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的治疗效果。方法采用弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原为造模剂分别建立大鼠类风湿性关节炎模型,测定刺山柑精制提取物对关节炎大鼠足趾肿胀抑制率和相关炎症因子表达的影响。结果刺山柑精制提取物对大鼠佐剂性关节炎继发性病变具有一定的治疗作用,治疗效果均持续至实验结束,其中刺山柑高剂量的抑制率基本稳定在20%以上,对大鼠关节周围组织滑膜内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)有一定下调作用。刺山柑提取物对Ⅱ型胶原诱导的大鼠类风湿关节炎足趾肿胀也具有显著抑制作用,100 mg/kg剂量组在给药后3 d,开始出现一定程度的抑制足关节的肿胀,给药后14 d抑制率达到40.3%(P0.05)。结论刺山柑精制提取物具有抑制弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的作用,能有效缓解其关节附件的肿胀,其作用机制可能是通过下调TNF-α、IL-1、IFN-α等相关炎症因子的表达。     

TNF-α、IL-1在佐剂性关节炎大鼠血清中的变化

目的：观察佐剂性关节炎大鼠肿瘤坏死因子α（ TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、一氧化氮（ NO）、IL-18的变化,以探讨类风湿性关节炎（ RA）的发病机制。方法将Wistar大鼠分成2组：正常组和模型组;模型组足部皮下注射弗氏完全佐剂,制造大鼠佐剂性关节炎模型（ AA模型）,对照组足部皮下注射生理盐水作对照;通过关节炎评分、X线评分、病理评分等评价炎性程度;免疫后第42天处死大鼠,取血后用ELISA法测TNF-α、IL-1β、NO、IL-18水平;取大鼠踝关节做苏木精-伊红染色。结果与正常组相比模型组血清TNF-α、IL-1β、NO水平明显升高（P ＜0．05）2,组IL -18水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论佐剂性关节炎大鼠造模成功;模型组血清中TNF-α、IL-1β、NO含量较正常组明显升高,提示TNF-α、IL-1、NO可能参与了RA的发病及发展。     

桂皮醛对关节炎大鼠炎症因子及骨桥蛋白的作用

目的 探讨桂皮醛（Cin）对Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠的作用及对骨桥蛋白（OPN）水平的影响。方法 选取20只SPF级SD健康雄性大鼠,随机选取5只大鼠为对照组,其余大鼠建立Ⅱ型CIA大鼠模型。取造模成功的大鼠随机分为模型组、低剂量Cin组、高剂量桂Cin组,每组5只。造模成功后连续给药3周,1次/天,低、高剂量Cin组分别给予剂量为100、200 mg/kg的Cin灌胃处理,正常组和模型组使用等量生理盐水灌胃处理。观察Cin对CIA大鼠关节炎评分影响,检测各组大鼠血清中OPN、白介素-6（IL-6）、IL-17和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,免疫组织化学法（IHC）检测滑膜组织中OPN表达,Western blot法检测滑膜组织中OPN的蛋白表达,RT-QPCR方法检测软骨中OPN mRNA水平,HE染色观察各组大鼠关节组织病理改变。结果 与对照组比较,模型组大鼠关节炎评分显著升高,血清中OPN、IL-6、IL-17和TNF-α的水平显著升高,OPN在滑膜、软骨表达水平升高,关节组织出现明显的炎症细胞浸润和滑膜增生;与模型组比较,低、高剂量Cin组能够降低大鼠关节炎评分,显著降低血清中OPN、IL-6、IL-17和TNF-α的水平,OPN在滑膜、软骨表达水平降低,并减轻关节组织的病理损伤,高剂量Cin组作用更显著。上述指标差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论 桂皮醛能够有效缓解CIA大鼠的关节炎症和关节损伤,其作用可能与降低OPN表达及血清中IL-6、IL-17和TNF-α水平有关     

痹痛灵颗粒对胶原诱导性关节炎大鼠的影响

目的 观察痹痛灵颗粒对胶原蛋白诱导性关节炎大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 以牛Ⅱ型胶原蛋白和完全弗氏佐剂造成胶原蛋白诱导性关节炎大鼠模型,称取各组大鼠造模当天及给药结束当天的体质量;测定各组大鼠血清中及组织匀浆中TNF-α含量.结果 痹痛灵高剂量组能明显抑制关节炎大鼠血清及组织中的TNF-α的含量,且与甲...     

痹肿消汤对大鼠胶原诱导性关节炎滑膜肿瘤坏死因子-α基因的影响

目的观察痹肿消汤对大鼠胶原诱导性关节炎肿瘤坏死因子-(αTNF-α)mRNA的影响,从基因水平探讨类风湿关节炎的发病机制及痹肿消汤对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎作用。方法将34只大鼠随机分为3组,皮下注射II型胶原蛋白配合完全弗氏佐剂诱导关节炎模型,采用半定量RT-PCR法测定胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞TNF-αmRNA的表达。结果TNF-αmRNA在正常组有少量表达;25、45 d模型组TNF-αmRNA表达明显高于正常组(P<0.05),45 d模型组表达高于25 d模型组(P<0.05);给药后,痹肿消汤组的TNF-αmRNA表达明显低于模型组(P<0.05),在痹肿消汤组中,前后比较,45 d TNF-αmRNA的表达低于25 d(P<0.05)。结论在胶原诱导性关节炎大鼠中痹肿消汤能减少TNF-αmRNA的表达,提示痹肿消汤在治疗类风湿性关节炎中有抗炎作用,从而达到治疗作用。     

小鼠胶原诱导性关节炎模型的建立及其免疫学变化研究

目的 胶原诱导性关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA)是研究类风湿性关节炎发病机制和治疗药物筛选的理想模型,也是目前国际上公认的关节炎模型.但是,目前鲜见Ⅱ型胶原诱导CIA模型的系统免疫学变化的报道.因此,本研究采用DBA/1小鼠诱导了CIA模型,并对其免疫学改变进行了系统研究.方法 将牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂混和并充分乳化,于DBA/1小鼠尾根部皮内注射进行初次免疫,20 d后同样方法进行再次免疫.应用千分尺测量CIA模型小鼠的左右两侧足掌厚度,并进行关节炎评分.酶联免疫吸附试验测定小鼠血清Ⅱ型胶原特异性抗体,Luminex技术和αLISA技术测定血清及培养上清中的细胞因子水平.结果CIA小鼠于造模后23 d开始,陆续出现前肢、后肢的红肿、功能障碍,发病率高达100％,且随着时间的延长其关节肿胀程度呈进行性加重,关节炎评分增高.CIA小鼠脾脏指数较正常组明显升高,且Ⅱ型胶原刺激的特异性T细胞增殖明显增强.细胞因子检测结果表明,脾细胞培养上清中IFN-γ和1L-4含量及IFN-γ/IL-4比值明显升高,TNF-α和IL-1β水平亦显著升高.此外,CIA小鼠血清中存在高水平的Ⅱ型胶原特异性抗体.结论 Ⅱ型胶原诱导CIA模型发病率高,免疫学改变以Th1细胞因子升高为主,兼有细胞免疫功能及体液免疫功能损伤.     

穴位埋线对CIA大鼠IL-1β、TGF-α及MVD表达的影响

目的通过观察穴位埋线对大鼠胶元诱导型关节炎(CIA)模型血清IL-1β、TNF-α表达及其滑膜新生血管的影响,探讨其对类风湿关节炎(RA)的作用机理。方法建立Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、来氟米特组、穴位埋线治疗组、来氟米特+穴位埋线治疗组。ELISA法血清中IL-1β、TNF-α表达含量变化和SP免疫组织化学染色法滑膜组织MVD计数。结果与模型组比较,各治疗组血清中IL-1β、TNF-α及滑膜组织MVD均明显下降(P0.01),且各治疗组之间比较无统计学差异(P0.05)。结论穴位埋线可能通过降低大鼠血清IL-1β、TNF-α表达而发挥抑制关节滑膜血管新生作用,这可能是姜黄素治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

HIF-1α、VEGF在CIA大鼠模型中的表达与意义

目的制备牛Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎(collagen Ⅱ-induced arthritis,CIA)模型,探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在类风湿关节炎发病中的作用。方法50只SD大鼠,随机分为对照组与模型组。建立CIA模型,动态观察各项关节炎活动指标,于造模第21、28、35、42天取踝关节行HE染色及HIF-1α、VEGF免疫组化染色,分析两者在CIA中的相关性及与关节炎活动指标、滑膜病理学评分之间的关系。结果CIA大鼠关节滑膜层和滑膜下层均表达HIF-1α、VEGF二者呈明显正相关,r为0.75(P<0.01),第21天阳性表达量最高,随病程进展,表达逐渐下降,与滑膜病理学评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关,r分别为0.4、0.48、0.50(P<0.05),与炎症浸润评分无明显相关r为0.30(P<0.05)。结论HIF-1α可能通过调控一系列下游靶基因,如VEGF等,促进滑膜增生及血管生成,影响类风湿性关节炎(rheumatoi...     

气候因素对Ⅱ型胶原蛋白所致类风湿关节炎模型大鼠关节炎症、免疫脏器指数及组织形态的影响

目的观察气候因素对Ⅱ型胶原蛋白所致类风湿关节炎(RA)模型大鼠关节炎症、免疫脏器指数及组织形态的影响。方法将40只SD大鼠随机分为空白组、Ⅱ型胶原组、Ⅱ型胶原+人工风寒湿组(简称风寒湿组)、Ⅱ型胶原+人工风湿热组(简称风湿热组)4组,每组10只,雌雄各半。空白组给予等量生理盐水,Ⅱ型胶原组皮下注射Ⅱ型胶原佐剂混合液,其余2组采用Ⅱ型胶原佐剂混合液诱导,外加人工气候因素制备RA大鼠模型。造模28 d后,比较各组大鼠的关节炎评分、胸腺指数、脾脏指数,并观察各组大鼠左后肢踝关节的组织形态改变。结果与空白组比较,各模型组大鼠均出现了不同程度的足趾关节肿胀,关节炎评分均显著升高,差异有高度统计意义(P0.01);各模型组脾脏指数均有所升高,其中风寒湿组与空白组比较差异有统计意义(P0.05);组织形态观察,造模后,Ⅱ型胶原组、风寒湿组和风湿热组大鼠踝关节出现不同程度的滑膜增生、淋巴细胞浸润。结论气候因素对Ⅱ型胶原蛋白所致RA模型大鼠关节炎症、组织形态具有一定的影响,能加重RA大鼠关节的病理损伤。     

HIF-1α在类风湿性关节炎组织中的表达及其相关性研究

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在类风湿性关节炎(RA)组织中的表达及其相关性作用。方法 通过组织形态学和免疫学等手段检测,观察Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型的关节组织中HIF-1α蛋白的表达情况。结果 Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的关节滑膜层和滑膜下层均表达HIF-1α,第21天阳性表达量最高,随病程进展,表达逐渐下降,与滑膜病理学评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关。结论H1F-1α在RA组织中的表达,与炎症严重程度呈正相关,提示HIF-1α对RA的发生发展密切相关,为RA的临床治疗提供了新的思路。     

原花青素对CIA大鼠足爪组织中NF-κB/p65蛋白和血清中某些促炎性细胞因子表达的影响

目的研究原花青素对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(CIA)大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB/p65蛋白表达的抑制作用和血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α等水平的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型,免疫组化法检测足爪组织中NF-κB/p65蛋白的表达,ELISA法检测CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果原花青素能剂量依赖性地下调NF-κB/p65蛋白的表达,降低CIA大鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。结论原花青素对CIA大鼠炎症的抑制作用可能与其下调NF-κB/p65蛋白表达、降低促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平有关。     

红霉素对佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6表达的影响

目的：研究红霉素对佐荆性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6表达的影响,以探讨红霉素对佐刑性关节炎的治疗作用。方法：通过给大鼠右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂（CFA）建立类风湿性关节炎的动物模型（AA）。在致炎后第14d,大鼠继发性关节炎出现。开始在治疗组AA大鼠腹腔注射红霉素注射液50mg／kg,连续7d,直至第28d处死全部大鼠,断头取血后用放免法测大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6的表达水平。结果：治疗组大鼠血清中的TNF-α、IL-1、IL-6水平均低于模型组,红霉素对佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6表达均成抑制作用。结论：红霉素可降低佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,对类风湿性关节炎的治疗具有一定的作用。     

龙须藤提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠的影响

目的研究龙须藤乙酸乙酯提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨其作用机理。方法建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,观察大鼠足趾肿胀度的变化,用免疫组化法检测大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果龙须藤乙酸乙酯提取物能抑制大鼠足趾肿胀及滑膜组织中TNF-α、IL-6及IL-8的表达。结论龙须藤乙酸乙酯提取物对类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理是降低滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平。     

原花青素对CLA大鼠足爪组织中NF-κB／p6S蛋白和血清中某些促炎性细胞因子表达的影响

目的研究原花青素对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎（CIA）大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB／p65蛋白表达的抑制作用和血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α等水平的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型，免疫组化法检测足爪组织中NF-κB／p65蛋白的表达，ELISA法检测CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果原花青素能剂量依赖性地下调NF-κB／p65蛋白的表达，降低CIA大鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。结论原花青素对CIA大鼠炎症的抑制作用可能与其下调NF—KB／p65蛋白表达、降低促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平有关。     

Ⅱ型胶原蛋白酶诱导 SD 大鼠膝骨关节炎模型的建立

目的：建立Ⅱ型胶原蛋白酶诱导的SD大鼠膝骨关节炎模型。方法将SD大鼠20只随机分为A组和B组,每组10只。分别于第1、4天给予A组大鼠膝关节腔内注射Ⅱ型胶原蛋白酶,予B组大鼠膝关节腔内注射生理盐水进行造模。观察两组大鼠第1、3和7天体重的变化,以及第1、4、7天膝关节直径的变化,测定第7天大鼠处死后脾脏、胸腺重量和脏器系数,HE染色观察光镜下膝关节组织的一般形态。结果造模后,A组的体重呈下降、减少趋势,B组的体重呈上升、增长趋势。造模后第3、7天,A、B组间体重比较差异有统计学意义。 A组造模后的膝关节直径明显大于造模前,前后比较差异有统计学意义（ P＜0.01）。 B组造模后的膝关节直径与造模前差异无统计学意义（P＞0.05）。 A组造模后的膝关节直径大于B组,差异有统计学意义（P＜0.01）。关节组织HE染色光镜下观察显示,A组的关节呈早期骨关节炎的表现,而B组的关节组织无骨关节炎的表现。结论Ⅱ型胶原蛋白酶可成功建立SD大鼠早期膝骨关节炎模型。体重、膝关节直径、脾脏和胸腺重量、脏器系数及膝关节组织病理这几个指标有助于此模型生理病理特点的观察。     

关节炎丸对类风湿性关节炎骨侵蚀作用的实验研究

目的 观察关节炎丸对类风湿性关节炎模型大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量与病理组织形态学的影响.方法 选取50只Wistar大鼠,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、雷公藤对照组、关节炎丸大剂量组、关节炎丸小剂量组5组.除空白组外,其余各组大鼠在右后足趾部注射弗氏完全佐剂造模.造模成...     

沙利度胺对关节炎伴贫血大鼠血红蛋白的影响

目的探讨沙利度胺对关节炎伴贫血大鼠血红蛋白的影响。方法以胶原诱导性关节炎大鼠作为类风湿性关节炎(rheumatiod arthritis,RA)动物模型,并多次多点皮内注射Ⅱ型胶原及弗氏完全佐剂(CompleteFrund's Adjuvent,CFA)成功诱导出关节炎伴贫血的动物模型。将健康雄性Wistar大鼠76只分为正常对照组、造模组、沙利度胺治疗组,比较3组血红蛋白、大鼠足爪厚度及血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平及三者之间的关系,探讨RA继发贫血的可能机制及沙利度胺对实验性关节炎伴贫血大鼠的治疗效果。结果大鼠足爪厚度、血清TNF-α水平及血红蛋白浓度间存在密切关系,大鼠足爪越厚关节炎的肿胀程度越高,TNF-α浓度越高;TNF-α浓度越高,贫血也越严重,血清TNF-α浓度与血红蛋白之间呈显著负相关。沙利度胺能够降低关节炎大鼠血清TNF-α浓度,改善关节炎大鼠的贫血情况。结论沙利度胺既能改善关节炎症状又能避免传统抗风湿药物带来的骨髓抑制等不良反应,有望作为新一类的免疫调节剂。