乳腺癌生物学行为变化中钙黏蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白和增殖细胞核抗原的作用

目的：探讨细胞黏附分子钙黏蛋白(E-cad)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达与乳腺癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学技术对80例乳腺癌标本E-cad，LN，ColⅣ和PCNA的表达进行检测。结果：非侵袭性癌、分化Ⅰ级及临床早期的乳腺癌中，E-cad低表达率分别为5％，11％及27％；LN和ColⅣ的低表达率分别为11％和21％，11％和21％，52％和48％；PCNA的高表达率分别为37％，37％及41％。侵袭性癌、分化Ⅲ级及临床晚期的乳腺癌中，E-cad低表达率分别为62％，88％及75％；LN和ColⅣ的低表达率分别为77％和82％，75％和88％，86％和92％；PCNA的高表达率分别为69％，81％及86％。无转移和有转移者中，E-cad低表达率分别为14％及69％；LN和ColⅣ的低表达率分别为28％和38％，80％和84％；PCNA的高表达率分别为24％及82％。生存期≥5年和生存期&;lt;5年者中，E-cad低表达率分别为28％及83％；LN和ColⅣ的低表达率分别为44％和50％，90％和97％；PCNA的高表达率分别为44％及90％。结论：E-cad，LN，ColⅣ和PCNA的表达可作为判断乳腺癌浸润转移及预后的重要指标。     

P16，P21，P27基因在甲状腺乳头状腺癌中的表达

目的为了解P16，P21，P27基因在甲状腺乳头状癌中的表达状况及与淋巴结转移的关系。方法用多重PCR技术，免疫组化技术(SP)法对36例甲状腺乳头状腺癌细胞中的P16，P21，P27基因及其蛋白表达进行探测。结果36例甲状腺乳头状腺癌的P16基因纯合子缺失率33.3％(12／36)，未检出P21基因纯合子缺失，P16蛋白表达阴性占34.3％P21蛋白表达阴性占20．0％，P27蛋白表达阴性占51．2％．提示P16基因缺失与该瘤的病理分型，分级，淋巴结转移相关；P16，P27蛋白表达阴性与病理分级，淋巴结转移相关；P21蛋白阴性无特别相关，可能是其在不同肿瘤中的表达特点不同。结论P16，P21，P27基因在肿瘤发生，发展中有重要地位．     

p53与CK双重免疫组化染色法

双重染色法是指在一张切片上做两种不同染色的方法，如免疫组化和免疫组化、免疫组化和原位杂交、免疫组化和特殊染色及DNA染色和免疫组化等。其中双重免疫组化染色是在同一张切片上显示两种不同的抗原，这种方法可以了解不同细胞、组织之间与相关抗原的相互关系，甚至可以了解同一种细胞内抗原之间的相互关系，以及有关抗原在细胞的合成、转运及代谢途径，将形态观察与功能分析结合起来。     

提高病理实验教学质量的几点做法

为提高病理实验教学质量,针对其教学的特点,结合我院实际,就增加感性认识、组织芯片示教、多种媒体综合、开放实验教室、自主创新实验等做法和体会进行探讨.     

组织芯片检测舌鳞状细胞癌组织中KLF6、p21及c-Jun的表达

目的 探讨舌癌和正常舌组织中核转录因子KLF6、p21及c-Jum蛋白的表达、其相关性及临床意义.方法 应用高通量组织芯片技术结合免疫组织化学法,检测包含人类舌鳞状细胞癌组织、舌良性肿瘤组织、因良性病变而活检的正常舌组织的组织芯片中KLF6、p21及c-Jum的表达情况,结合临床病理资料进行统计分析.结果 舌癌组织的KLF6表达明显低于正常舌组织和舌良性肿瘤组织,KLF6在低分化舌癌中的阳性表达率100.00%(4/4)明显高于高分化的66.67%(8/12)和中分化的50.00%(2/4);舌癌组织的p21表达明显低于正常舌组织和舌良性肿瘤组织,p21在淋巴结未转移组和临床Ⅰ、Ⅱ期组舌癌组织的表达(9/10)明显高于淋巴结转移组和临床Ⅲ、Ⅳ期组(5/10);舌癌组织的c-Jum蛋白表达显著高于正常舌组织和舌良性肿瘤组织(p<0.05),c-ltill在淋巴结未转移组和临床Ⅰ、Ⅱ期组舌癌组织的表达(8/10)明显低于淋巴结转移组和临床Ⅲ、Ⅳ组(10/10).KLF6与c-Jum表达存在正相关(P<0.05);c-Jum与p21的表达也存在正相关(P<0.05);11例癌组织的KLF6与p21同为阳性表达,3例癌组织二者同为阴性表达,但KLF6与p21蛋白的表达相关不显著(P>0.05).结论 KLF6、p21和c-Jun三者与舌癌的发生发展有关,联合检测3个指标,在病理学诊断上有重要的参考价值,可辅助舌癌的临床早期诊断、鉴别诊断及预后判断.     

门静脉高压大鼠腹膜血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨门静脉高压大鼠腹膜血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法雄性SD大鼠随机分为3组:门静脉结扎(PVL)组32只,假手术(SO)组16只,门静脉结扎联合沙利度安治疗(PVL-T)组8只。为诱导腹水形成,于手术后第1,3,5,7天分批给予每只大鼠腹腔注射33.33%葡萄糖溶液1mL,30min后收集腹水标本并测总量,同时采用ELISA测定腹水中VEGF含量;留取腹膜组织做VEGF免疫组化染色和实时RT-PCR。结果术后第1、3天PVL组大鼠腹水总量和VEGF含量显著大于SO组(P<0.05),术后第5、7天大鼠腹水总量和VEGF含量在PVL组和SO组之间无显著性差异(P>0.05),术后第3天PVL-T组腹水总量显著低于PVL组(3.4±0.27mLvs4.92±1.53mL,P<0.05)。免疫组化结果显示PVL组VEGF呈强阳性表达,而SO组VEGF则呈弱阳性表达,且表达部位多在腹膜间皮细胞、巨噬细胞胞浆;实时RT-PCR结果表明PVL组腹膜VEGFmRNA表达显著高于SO组(P<0.05)。结论门静脉高压可增加由于渗透性改变所致大鼠腹水形成,腹膜VEGF高表达可能与大鼠腹水形成有关,抑制VEGF活性可能是治疗门静脉高压所致腹水的一种新的治疗策略。     

多重PCR对头颈部肿瘤中MTS1基因外显子2的检测分析

目的 为了解ＭＴＳ１基因变异在头颈部肿瘤发生发展中的作用。方法 采用多重ＰＣＲ技术扩增ＭＴＳ１基因外显子２。结果 本组ＭＴＳ１基因外显子２纯合子缺失的频率为３７．３％（１７／４５）,分化较好鳞癌ＭＴＳ１基因缺失频率３１．５％（６／１９）明显低于分化较差的鳞癌的５７．１％（８／１４）,但差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。结论 本研究提示ＭＴＳ１基因变异与头颈部恶性肿瘤的发生发展有关。     

双重免疫组化染色法在鼻咽部鳞状细胞癌中的应用

双重染色法是在一张切片上做两种不同染色的方法，如免疫组化和免疫组化、免疫组化和原位杂交、免疫组化和特殊染色等。其中双重免疫组化染色是在同一张切片上显示两种不同抗原．这种方法可以了解不同细胞、组织之间的相互关系，甚至可以了解同一种细胞内抗原之间的相互关系。本实验成功地用双重免疫组化染色法在一张切片上同时显示鼻咽部低分化鳞癌组织P53与细胞角蛋白(cytokeratin，CK)的关系，用以观察CK阳性的癌细胞是否同时表达P53．现介绍如下。     

PCNA和GFAP在脑星形胶质细胞瘤中表达的双重染色研究

目的研究人脑星形胶质细胞瘤中增殖细胞核抗原（PCNA）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达及其与肿瘤分级的关系。方法采用免疫组化双重染色法对41例人脑星形胶质细胞瘤进行PCNA和GFAP两重标记检测。结果脑星形胶质细胞瘤中PCNA与GFAP表达率均为100％，PCNA表达水平与肿瘤分级呈正相关（r=-0．627，P〈0．01），GFAP表达水平与肿瘤分级呈负相关（r=-0．568，P〈0．01）；Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤间PCNA和GFAP表达均有显著性差异（P〈0．05）；GFAP表达和PCNA表达水平呈负相关（r=-0．332，P〈0．05）。结论PCNA与GFAP的表达有一定的相关性。PCNA与GFAP的双重表达与脑星形胶质细胞瘤的增殖活性和恶性程度有关。     

免疫组化SP法操作程序的规范和改良

目的总结免疫组化SP法的操作经验.方法用改良后的SP法对1 200例病理组织切片进行免疫组化染色.结果免疫组化标记定位准确,背景清晰者1 120例,占总数93.3%.结论采用改良SP法并注意操作要点,有助于提高免疫组化染色质量.