幽门螺杆菌的空泡毒素与细胞毒素相关蛋白

幽门螺杆菌 (ＨＰ)是慢性胃病重要病因之一。为什么感染ＨＰ后可致不同的疾病 ?研究提示可能与感染的菌株不同或宿主对感染的敏感性不同有关。其中ＨＰ毒素在致病性中的作用很重要。1988年发现ＨＰ能产生一种使真核细胞产生空泡变性的毒素 ,称为空泡毒素Ａ (ＶａｃＡ) ,它是一种分子量为 87ＫＤ的蛋白质。后来在ＶａｃＡ阳性的ＨＰ菌株培养液上清中发现另一种 12 8ＫＤ的蛋白 ,而在无ＶａｃＡ活性的ＨＰ菌株培养液上清中无此种蛋白质 ,由此结果认为ＶａｃＡ活性与 12 8ＫＤ蛋白质密切相关 ,把 12 8ＫＤ蛋白质称之为细胞毒素相关蛋白 ,用Ｃａ…     

芋螺毒素的研究进展

芋螺毒素(conotoxin,CTx)是一类具有神经药理活性的多肽.由于芋螺毒素的多样性而成为新的进化选择性物质的组合库.芋螺毒素富含二硫键,具有作用于神经系统内的分子,尤其是一些配体和电压门控离子通道,因而在药学方面具有极其重要的价值.据称它们可与植物类的生物碱媲美,也可与微生物发酵产品匹敌.本文按CTx作用的受体靶分别进行综述.     

幽门螺杆菌空泡毒素活性检测方法的比较

目的　分别采用细胞计数法及中性红摄入法 (NRU)检测幽门螺杆菌 (Hp)空泡毒素活性 ,探讨NRU检测空泡毒素活性的应用价值。方法　采用Hp液体培养上清浓缩液作为粗制VacA毒素 ,经倍比稀释(1∶16 0～ 1∶2 )后与胃癌SGC 790 1细胞共同孵育 2 4h。用细胞计数法及NRU同时评价VacA的空泡毒素活性 ,比较两种方法检测VacA空泡毒素活性的差异。结果　经中性红染色后 ,胃癌细胞吸收大量染料 ,空泡更加明显。NRU对空泡毒素活性的判断结果与细胞计数法基本符合 ,细胞计数法显示 1∶2 0～ 1∶2滴度样本均呈阳性结果 ,NRU于 1∶2 0～ 1∶5滴度亦得到阳性结果 ,1∶2滴度组因细胞大量死亡得到“假阴性”结果 (A550 =0 .0 6±0 .0 4 )。 1∶4 0滴度组细胞计数法判断为阴性 ,但NRU检测阳性 (A550 =0 .12± 0 .0 4 ,P <0 .0 5 )。结论　NRU检测空泡毒素活性具有简便、快速的特点 ,有助于对空泡毒素活性的定量评价 ,敏感性高于细胞计数法 ,可广泛用于空泡毒素活性的体外检测     

炭疽毒素受体CMG2胞外区的截短表达、纯化及鉴定分析

【目的】分析CMG2胞外区的分子结构与功能,探讨ATR与PA结合的活性位点及特征,为阐明炭疽毒素的致病机理提供依据。【方法】用pQE30表达质粒在大肠杆菌内表达长短不同的3个CMG2胞外区截短片段,经纯化后,用Western blotting和细胞保护性实验对3个重组蛋白进行分析。【结果】发现3个重组蛋白均可与485单抗结合,但均没有细胞保护活性。【结论】3个截短蛋白失去了与PA结合的能力,说明CMG2的187—217之间氨基酸残基对PA结合很重要,不可或缺。     

蜂毒素抗肿瘤作用的研究进展

蜂毒素是蜂毒的主要组成部分和药理活性成分,具有抗炎镇痛、抑制血小板聚集和抗肿瘤等药理作用。近年来蜂毒素在抗肿瘤作用方面受到人们的关注,它抗肿瘤的作用是多靶点作用于肿瘤细胞。随着蜂毒素基因工程研究的深入,在未来其可能成为一种理想的分子靶向治疗药物。现将蜂毒素通过直接杀伤、免疫调节和诱导细胞凋亡产生抗肿瘤的作用以及在基因工程的研究进展进行综述。     

A型肉毒毒素与神经病理性疼痛

A型肉毒毒素广泛用于肌肉过度活动性疾病及美容外科领域。近年来,此种毒素在疼痛方面的治疗作用引起了人们的注意,如肌筋膜疼痛综合征、偏头痛及其它各种头痛。目前,A型肉毒毒素用于神经病理性疼痛的研究和治疗也日益得到关注。研究发现,A型肉毒毒素可能在治疗神经病理性疼痛方面极具前景。     

蜘蛛毒素的细胞毒作用研究进展

蜘蛛以其分泌功能、生理特性、捕食行为及潜在的应用价值,在生物和人类医学研究中占有重要地位。与蛇毒相比,它含有较多的小分子多肽。蜘蛛毒素的研究已成为继蛇毒、蝎毒后的又一个研究热点。蜘蛛毒素对离子通道、神经递质、受体等已证明有着明显作用,但与其他毒素相对而言,蜘蛛毒素采集困难,量极少,因而对它的研究很难深入进行。近几年来,不少学者应用蜘蛛毒素对体外和体内肿瘤细胞进行研究,取得了一些成果。本文就蜘蛛毒素的细胞毒作用进行简要的综述。1蜘蛛毒素的成分与分类蜘蛛属节肢动物门,蛛形纲,蜘蛛目,是昆虫的自然天敌,形态上除原…     

运动性气单胞菌胞外溶血毒素和蛋白酶产生的研究

从患败血症的鲫鱼体中分离的几株病原菌被证明为运动性气单胞菌。在需氧培养条件下，产生大量的溶血毒素和蛋白酶。在LB培养基中32℃培养时，6h后开始产生毒素，12h后达到高峰。培养基的起始pH为5．0时，培养基上清的溶血毒素和蛋白酶活性分别为对照组(pH8．0)的20％和50％。D-阿拉伯糖可抑制溶血毒素和蛋白酶的活性，使其分别为对照组(LB培养基)的10％和50％。而L-山梨糖仅抑制溶血毒素的活性，效果为对照组的10％。SDS—PAGE显示起始pH5．0时，细菌胞外蛋白中至少有两条带被抑制。结果表明，酸性起始条件可抑制CRI4菌株的溶血毒素和蛋白酶的表达，不同的糖对溶血毒素和蛋白酶的产生有不同的作用。而且，铁离子对蛋白酶的产生也很重要。总之，溶血毒素和蛋白酶的调节系统各不相同。     

蜂毒素的抗肿瘤生物活性及其稳定性研究

目的：通过中压液相色谱提取、纯化蜂毒素，研究其抗肿瘤生物学活性，及其稳定性。方法：通过中压液相色谱提取蜂毒素，经HPLC检测纯度，采用MTT法，体外观察蜂毒素对4种肝癌细胞系增殖的抑制作用，同时与蜂毒素标准品进行抗肿瘤生物活性的比较，并比较不同批次提纯蜂毒素的抗肿瘤作用。结果：蜂毒素在16～128μg/ml对肝癌细胞增殖有抑制作用，并呈剂量依赖性，对人正常肝脏来源细胞株L-02细胞抑制作用不明显。在60μg/ml浓度，各批次提取的蜂毒素与蜂毒素标准品间抗肿瘤活性无显著性差异。结论：采用中压液相色谱提取、纯化的蜂毒素具有抗肿瘤生物活性，并且稳定性良好。     

幽门螺杆菌空泡毒素活性的体外观察

目的研究幽门螺杆菌(Hp)液体浓缩上清液对胃上皮细胞的空泡毒性作用,为进一步开展空泡变性细胞毒素(VacA)的纯化及探讨VacA的致病机制奠定基础。方法将Hp菌株液体培养上清液制成粗制VacA蛋白,粗制VacA经倍比稀释(1∶160～1∶2)后与胃癌SGC7901细胞共同孵育后观察胃癌细胞形态变化,同时观察1∶2及1∶5滴度组于0、2、4、8、16和24h时的空泡活性。采用中性红摄入法(NRU)评价空泡活性。结果1∶2及1∶5滴度组胃癌细胞于24h时空泡形成细胞达100%,空泡细胞比例随毒素滴度递减。孵育24h时粗制VacA产生空泡活性的最小剂量约为6μg,超过120μg可导致细胞死亡。当毒素滴度为1∶2时,孵育4h即产生明显空泡[550nm光吸收值(A550)=0.43±0.06],至16h达最高吸收值(A550=0.71±0.03),至24h时因细胞大量死亡,A550反而下降至0.06±0.04,与空白对照组的差异无显著性(P>0.05)。1∶5毒素滴度的时间曲线较1∶2滴度更恰当反映出空泡活性随孵育时间变化的特性。结论Hp液体培养上清浓缩液对胃癌细胞具有明显的空泡毒性作用,VacA导致的空泡毒性具有明显的浓度及时间依赖性,且易受多种因素的影响,适当的浓度及孵育时间是VacA致病机制研究过程中的关键因素。     

Beta-银环蛇毒的基因工程研究进展

本文综述了β-银环蛇毒素的分子结构，氨基酸及基因序列，以及毒素的克隆及表达研究近况。β-银环蛇毒素是目前研究的最为深入的第一个具有药理特征的一种突触前蛇的神经毒素，是当今分子生物学研究的一个热点之一。由于银环蛇毒素分子量小，活性强，采用生物工程的方法规模生产也是当前及今后的研究方向。     

八厘麻毒素片剂、注射剂的制备及药用规格

我们从杜鹃花科羊踯躅(RhododendronMolle G.Don)的干燥成熟果实(湖北称八厘麻)中得到人厘麻毒素纯品,(熔点265—8℃)。此成分具有八厘麻原药材所固有的强烈药理活性。为了提供内科心血管疾病研究组作药理和临床研究,实验和制订了八厘麻毒素片剂和注射剂的制备方法及相应的药用规格。 一、八厘麻毒素片的制备和药用规格: 1.制法:取淀粉97.5克,在50～60℃干燥,加入八厘麻毒素0.25克,于球磨机或研     

细菌杀虫剂及其应用

第八节　苏芸金杆菌的热稳定性 ,毒素对粘虫的影响(摘译自 Wittig G 1 967. Effect of heat- stal-ice Bacillus thuringiensis toxin on anmywaim. JInvertelr. Pathal,9( 1 ) :1～ 2 )Maconnel&Richaidr( 1 95 9)首先报导了苏芸金杆菌所产生的一种热稳定性毒素 ,当把此种毒素饲以腊蛾幼虫时 ,对昆虫没有效应 ,但当注射入幼虫体内时 ,则可引起幼虫的死亡。以后有人分别以其他类似的热稳定性毒素作了昆虫口服实验 (见Cantwell etc 1 964,Burgerjon,1 95 5 )。但据我们所知 ,以后没有关于把该毒素注射以昆虫的效果的进一步报导。按 Nc …     

槲寄生毒素研究进展

槲寄生毒素是药用植物槲寄生中非常重要的抗肿瘤成分之一,是一类相对分子质量在5 000左右的含有46个氨基酸残基的碱性毒性多肽,富含半胱氨酸。这类多肽对多种肿瘤细胞系具有细胞毒活性,并具有免疫调节功效,还有显著的降压、抗心律失常等作用。着重对槲寄生毒素的结构、功能、构效关系等方面的研究结果与进展进行综述。     

精制抗蝮蛇和抗五步蛇毒血清对烙铁头蛇毒毒性成份的中和效应

本文通过交叉免疫反应与毒素中和实验，利用抗原抗体中和反应原理，进一步证明精制抗蝮蛇和抗五步蛇毒血清对烙铁头蛇毒具有交叉免疫活性，能够中和烙铁头蛇毒中的出血毒素、坏死毒素和抗凝组份，而对诱导血小板聚集的活性没有影响。     

真菌毒素限量标准及其在中药中的研究进展

对人类健康影响较大的黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等7种真菌毒素及其药理毒性进行介绍,并综述了近年来一些主要国际组织和我国等地区现行的真菌毒素限量标准情况。这些限量标准主要针对食品中的真菌毒素和中药材中的黄曲霉毒素,而研究表明药用植物及其产品也有被其他真菌毒素污染的情况。为此,讨论了在我国建立中药材中真菌毒素限量标准的紧迫性和重要性,以期为我国建立中药材中真菌毒素限量标准提供参考。     

幽门螺杆菌液体培养的研究

目的 :建立一种适用于幽门螺杆菌 (Hp)大量扩增并提取致空泡变性细胞毒素 (Vac A)的液体培养方法。 方法 :采用TSB及 MHB培养液 ,加入小牛血清 (FBS)或环糊精 (CD)作为支持剂 ,比较其对 Hp的扩增效果及上清中空泡毒素活性的差异。结果 :TSB+CD组 Hp平均扩增速度及菌体湿重与 TSB+FBS组相比无显著差异 ,二者均显著高于 MHB培养液组 (P<0 .0 1)。 TSB+CD组上清蛋白浓度为 (2 .4 4± 0 .39) m g/ m l,显著高于 MHB+CD组。 TSB培养液组浓缩上清具有明显的空泡毒性 ,且蛋白电泳可见相对分子质量为 95 0 0 0的 Vac A,而 MHB培养液组无空泡毒性。 结论 :以 TSB为培养液 ,加入适量的CD作为支持剂 ,在不损失 Vac A活性的前提下 ,可明显增加浓缩上清液中的蛋白纯度 ,是大量提取和制备 Hp Vac A蛋白理想的液体培养方法。     

毒素清对肺炎双球菌肺炎老龄大鼠自由基和前列腺素代谢的影响

研究毒素清对老年肺炎的作用机制。将32只SD老年大鼠肺炎双球菌肺炎模型,分为B、C、D、E四组,另取8只相同未造模的大鼠作为正常对照组。C、D、E组分别给予毒素清高、低剂量、头孢氨卡灌胃,A、B组以等量生理盐水灌胃。观察肺脏组织病理改变,外周血前列腺素代谢产物,肺泡灌洗液中性粒细胞计数、SOD活性、NO和MDA含量。结果：肺炎老龄大鼠的肺组织损伤明显。与A组比较,B组肺泡灌洗液中性粒细胞和血浆TXB2含量增高,血浆－Keto-PGF1a含量降低,血清和肺泡灌洗液SOD活性下降和NO、MDA含量增高。高剂量毒素清治疗后,外周血SOD活性和6－Keto-PGF1a 含量升高,血清和肺泡灌洗液MDA含量降低,肺泡灌洗液NO含量血浆TXB2含量下降。提示毒素清对老龄大鼠肺炎的作用明显,其机制与其降低中性粒细胞数量和拮抗自由基损伤及调节前列腺素代谢平衡有关。     

富马毒素污染情况及其污染原因分析

富马毒素广泛存在于与人、动物相关的食品、粮食中。对人、动物存在极大危害。作者综述了富马毒素在国内外食品、饲料中的污染状况。分析了造成污染的原因以及提出了去除富马毒素的方法。     

藻毒素的检测与生物学效应评价的研究进展

对藻毒素的化学结构和化学特性、藻毒素的检测及藻毒素的生物学效应评价等方面研究进展进行综述：(1)藻毒素的种类、结构及特性等尚未完全清楚，需做进一步研究；(2)藻毒素的检测方法主要有生物法、化学法和免疫法等三大类；(3)现有生物学效应评价多为单因素单方法评价，主要分为观察法和实验法两大类。