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1.
目的本研究采用明胶为空肠弯曲菌菌苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌苗的免疫原性.方法采用明胶为佐剂的全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠.加明胶为佐剂全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠为实验组,全菌疫苗肌注和全菌疫苗灌胃免疫为实验对照组,PBS灌胃免疫为正常对照组,未作任何处理的Balb/c小鼠为阴性对照组;接种3次,间隔7d,末次接种1wk后收集小鼠血清和小肠粘液.采用ELISA间接法检测血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平.结果各组血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平,加佐剂组明显高于未加佐剂组,有统计学差异(P<0.05),肌注组与加佐剂组间没有统计学差异(P>0.05).结论本研究显示佐剂疫苗口服有良好的免疫原性,明胶可作为口服疫苗的候选佐剂.  相似文献   

2.
目的探讨空肠弯曲菌PEB1重组蛋白的免疫原性及对机体的保护作用。方法以不同剂量的含弗氏佐剂的纯化PEB1重组蛋白为疫苗,分别经皮下注射和肌肉注射的方法免疫Balb/C小鼠,ELISA法测定血清中特异性抗体的含量,MTT法测定细胞增殖效应。CJ菌液攻击实验,观察攻击后小鼠的精神状态、病死情况,并做血液、肠道分泌液细菌培养。结果用PEB1重组蛋白免疫Balb/C小鼠,可诱导出高滴度的特异性抗体,能有效地刺激淋巴细胞增殖,加入刺激原的各实验组SI值均较对照组显著增高。结论PEB1重组蛋白免疫接种后可诱导出高滴度特异性抗体和致敏淋巴细胞,能有效保护小鼠免受大剂量空肠弯曲菌的攻击,是一种比较理想的基因工程亚单位疫苗候选抗原。细菌攻击实验结果表明,PEB1基因工程亚单位疫苗能使实验动物产生有效的免疫保护力,明显降低动物的患病率和病死率,并能有效地降低血液和肠道分泌液的细菌含量。  相似文献   

3.
空肠弯曲菌外膜蛋白福氏佐剂疫苗免疫小鼠后的抗体应答   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨空肠弯曲菌甘氨酸提取物28~31 kd外膜蛋白福氏佐剂疫苗免疫小鼠后的抗体应答效果.方法 将30只BALB/c小鼠随机分为5组,每组6只,采用空肠弯曲菌甘氨酸提取物28~31 kd外膜蛋白以不同剂量疫苗组,分别在第0、7、14、21、28天,通过背部及腹部皮下多点注射免疫小鼠;空白组、对照组分别采用0.4 mL生理盐水(NS)、0.4 mL福氏完全佐剂.在末次免疫10 d(即第38天),分别应用双向免疫琼脂扩散试验法、试管凝集法检测血清特异性抗体效价, ELISA检测血清和肠液中的特异性IgG、IgA、.结果 末次免疫10 d后,各疫苗组中,双向免疫琼脂扩散试验法、试管凝集法检测血清特异性抗体效价分别达到1:4~1:16和1:320~1:1 280,ELISA法检测血清、肠液中IgG、IgA、的水平与空白组、对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);空白组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 空肠弯曲菌甘氨酸提取物28~31 kd外膜蛋白佐剂疫苗能够诱导BALB/c小鼠较好的体液免疫应答和高水平的肠液抗体,将为空肠弯曲菌亚单位疫苗的深入研究奠定重要的实验依据.  相似文献   

4.
目的 探讨不同培养基来源的空肠弯曲菌28~31 kD外膜蛋白免疫小鼠后的体液免疫应答效果.方法 将66只BALB/c小鼠分别随机分为11组,每组6只,采用布氏血培养基、改良卵黄培养基培养来源的空肠弯曲菌甘氨酸提取28~31 kD外膜蛋白以不同剂量疫苗组(50、100、200μg/只,加入0.2mL福氏完全佐剂).分别在0、7、14、21和28d,通过背部皮下+腹部皮下多点注射免疫小鼠;空白组、对照组分别采用0.4mLNS、0.4mL福氏完全佐剂.在末次免疫后10d(即第38天),分别应用双向免疫琼脂扩散试验法、试管凝集法检测血清特异性抗体效价,采用ELISA技术分别检测小鼠血清和肠液中的特异性抗体IgG、IgA、分泌型IgA(slgA)的水平.结果 末次免疫后10d后,两种培养基来源的各免疫组中,双向免疫琼脂扩散试验法、试管凝集法检测血清特异性抗体效价分别达到1:4~1:16和1:320~1:1 280,间接ELISA法检测两种培养基来源血清、肠液中IgG、IgA、sIgA的水平与空白组、对照组差异均有显著性(P<0.05);两种培养基来源的同剂量纽的疫苗之间IgG、IgA、sIgA的水平差异没有显著性(P>0.05);空白组与对照组差异无显著性(P>0.05).结论 改良卵黄培养基来源的空肠弯曲菌甘氨酸提取物28~31 kD外膜蛋白能够诱导BALB/c小鼠较好的体液免疫应答和高水平的肠液sIgA抗体,与改良布氏血培养基相同,该培养基的选择和使用将为CJ亚单位疫苗、CJ检验、CJ食品卫生捡疫的深入研究奠定重要的实验依据.  相似文献   

5.
目的探讨重组空肠弯曲菌rLTB-PEB1蛋白疫苗的免疫机制。方法经口服免疫 BALB/c 小鼠后,ELISA 法检测特异性抗体IgG 、IgA 水平;ELISPOT 法检测派伊尔结特异性抗体分泌细胞;实时荧光定量PCR 检测IFN-γ、IL-4 mRNA 表达的差异。计算疫苗保护率。结果免疫组小鼠派伊尔结特异性抗体、IFN-γ、IL-4 mRNA 水平明显增高( P <0.05)。免疫组的疫苗保护率为89.3%~93.7%,可维持30周。结论重组空肠弯曲菌rLTB-PEB1蛋白疫苗口服免疫小鼠可有效预防空肠弯曲菌的感染,其免疫机制可能为诱导了TH1/TH2型免疫应答。  相似文献   

6.
目的 通过对不同浓度空肠弯曲菌CJ-S_(131)诱发自身免疫动物模型的研究,进而探求一稳定可靠的自身免疫动物模型。方法 40只健康雌性ICR小鼠被随机分为4组,每组10只,分别用CJ-S_(131)低、中、高三种浓度加弗氏完全佐剂免疫小鼠,通过抗ds-DNA抗体、T、B淋巴细胞活性、病理切片检测观察组间区别。结果 中浓度CJ-S_(131)加弗氏完全佐剂免疫小鼠所得模型抗ds-DNA抗体、T、B淋巴细胞活性明显高于正常组和低、高浓度CJ-S_(131)组,肝组织产生炎性病理损伤最明显。结论 中浓度CJ-S_(131)加弗氏完全佐剂免疫小鼠所得模型最佳。  相似文献   

7.
复制缺陷型重组腺病毒rvAdG1VP7免疫学效果的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的对1株可表达A组轮状病毒主要结构抗原VP7的重组腺病毒rvAdG1VP7的体内免疫学效果进行研究.方法通过灌胃和滴鼻2种途径对BALB/c小鼠进行免疫,并对免疫后小鼠体液和黏膜免疫进行分析.结果初次免疫后,2组小鼠均有应答,但血清IgG抗体滴度及阳转率不同.再次免疫后,显示出明显的加强效果.除了血清IgG外,小鼠还产生了较强的针对轮状病毒的血清IgA.滴鼻组在肺灌洗液和肠匀浆液中均可检测到SIgA,灌胃组仅在肠道检测到SIgA.滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组.对滴鼻组小鼠肺灌洗液IgG/SIgA的阳转率进行了比较,发现IgG的应答水平明显高于SIgA.免疫后小鼠血清中IgG的动态观察表明,抗体可长期持续至少半年以上.结论重组腺病毒载体rvAdG1VP7所取得的良好免疫学效果,为我国具有自主知识产权的新型轮状病毒基因工程疫苗的进一步研制奠定了基础.  相似文献   

8.
目的研究分析儿童水痘减毒活疫苗和甲肝减毒活疫苗联合接种免疫原性及安全性。方法选取600例甲肝易感者和健康水痘年龄为18到24月的儿童为本次研究过程中的研究对象,随机分为三组,每组各为200例,A组接种甲肝疫苗,B组接种水痘疫苗,C组联合接种甲肝减毒活疫苗和水痘减毒活疫苗,比较安全性和免疫原性相关指标。结果 B组和C组的水痘抗体转阳率均为100%,C组的抗体几何平均滴度显著高于B组,具有统计学差异(P0.05)。A组和B组以及C组发生不良时间的概率无显著差异,不具有统计学意义(P0.0%)。结论儿童水痘减毒活疫苗和甲肝减毒活疫苗联合接种与单独接种相比,安全性和免疫原性较好,具有临床进一步推广和应用的概率。  相似文献   

9.
目的用表达变异链球菌表面蛋白PAcP和霍乱毒素B亚单位融合蛋白的转基因番茄免疫SD大鼠,检测其免疫原性,探索研制安全、有效的可食用防龋疫苗的可能性。方法选择雌性 SD 大鼠18只,建立龋齿模型,随机分成3组(n=6),分别为转基因番茄组(实验组)、变异链球菌灭活全菌免疫组(阳性对照组)、非转基因番茄组(阴性对照组),免疫方式为灌胃免疫,每周免疫1次,连续免疫4周。分别于首次免疫前1 d 和每次免疫1周后采集血液、唾液样品,用酶联免疫吸附实验法检测血清中免疫球蛋白 G(IgG)、唾液中分泌型免疫球蛋白 A(SIgA)抗体水平;鼠龄70 d 时处死动物,并取上下颌骨进行龋齿计分。结果免疫后,实验组和阳性对照组大鼠血清中 IgG、唾液中 SIgA 抗体水平与阴性对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);实验组和阴性对照组在 Dx 级外的各级差异有统计学意义(P <0.05)。结论转基因番茄防龋疫苗具有免疫原性,能够诱导实验动物产生有效的免疫应答,降低龋齿的发生。  相似文献   

10.
目的探讨补益类复方中药作为佐剂增强流感病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗免疫原性的可行性。方法将42只BALB/C小鼠随机分为7组,每组6只,分别为VLPs组、VLPs+益气方组、VLPs+养血方组、VLPs+滋阴方组、VLPs+壮阳方组、VLPs+霍乱毒素组和PBS阴性对照组,分别于0和第14天通过鼻腔使用VLPs进行免疫,加用中药复方佐剂组在第1天至第13天连续灌服中药。VLPs疫苗按10μg/次接种,中药佐剂按200 mg/kg剂量接种,霍乱毒素按1μg/次鼻腔接种。在免疫前及免疫后第13天、第28天采集外周血,在第28天同时采集肺腔灌洗液,测定小鼠外周血清中Ig G水平和肺泡灌洗液中Ig A水平,并进一步对外周血清中和抗体效价进行测定。结果(1)补益类中药具有良好的增强外周血Ig G体液免疫应答的功能,其中益气方、滋阴方可以早期快速提高Ig G水平(P0.01),而益气方则可以进一步持续性提升Ig G水平(P0.01);(2)益气方、补血方和滋阴方均可以显著提高VLPs诱导肺腔Ig A水平(P0.01),其中以益气方组升高最为明显;(3)无论是在免疫应答早期还是后期,益气方、滋阴方均显著提高流感VLPs诱导小鼠外周血中和抗体效价(P0.01)。结论益气方、滋阴方可以显著增强流感VLPs诱导的外周体液免疫应答和肺脏局部黏膜免疫应答水平,益气联合滋阴方有望成为新型中药佐剂进而增加流感VLPs疫苗免疫原性。  相似文献   

11.
Objective To evaluate the effect of intranasal immunization with CTA1-DD as mucosal adjuvant combined with H3N2 split vaccine. Methods Mice were immunized intranasally with PBS(negative control), or H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) alone, or CTA1-DD(5 μg/mouse) alone, or H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) plus CTA1-DD(5 μg/mouse). Positive control mice were immunized intramuscularly with H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) and alum adjuvant. All the mice were immunized twice, two weeks apart. Then sera and mucosal lavages were collected. The specific HI titers, IgM, IgG, IgA, and IgG subtypes were examined by ELISA. IFN-γ and IL-4 were test by ELISpot. In addition, two weeks after the last immunization, surivival after H3N2 virus lethal challenge was measured. Results H3N2 split vaccine formulated with CTA1-DD could elicit higher Ig M, Ig G and hemagglutination inhibition titers in sera. Furthermore, using CTA1-DD as adjuvant significantly improved mucosal secretory Ig A titers in bronchoalveolar lavages and vaginal lavages. Meanwhile this mucosal adjuvant could enhance Th-1-type responses and induce protective hemagglutination inhibition titers. Notably, the addition of CTA1-DD to split vaccine provided 100% protection against lethal infection by the H3N2 virus. Conclusion CTA1-DD could promote mucosal, humoral and cell-mediated immune responses, which supports the further development of CTA1-DD as a mucosal adjuvant for mucosal vaccines.  相似文献   

12.
麻疹疫苗及加佐剂经滴鼻免疫小鼠的抗体应答   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:观察麻疹减毒活疫苗和灭活疫苗经滴鼻免疫小鼠后的抗体应答。方法:用活的或灭活麻疹疫苗及分别加明胶、植物血凝素(PHA)的疫苗滴鼻免疫小鼠,于末次免疫后10d取血清、唾液、呼吸道分泌物,用间接ELISA法检测特异性IgG,IgA抗体水平,并与皮下注射组及对照组进行比较。结果:各滴鼻组小鼠血清及呼吸道分泌物中均产生一定水平的特异性IgG及In抗体,皮下注射组小鼠呼吸道分泌物中未产生特异性IgA抗体;加明胶后的免疫效果优于加PHA的。结论:麻疹疫苗滴鼻免疫小鼠后可诱导全身及局部抗体应答,明胶可增强其免疫效果,而麻疹疫苗皮下注射免疫小鼠未能诱导局部抗体应答。  相似文献   

13.
INTRODUCTION CpG oligodeoxynucleotide is a newly emerging powerful adjuvant inducing a broad array of immune responses to a wide variety of antigens. Previous studies showed that CpG motifs activate B cells and dendritic cells (DC), trigger immune cascade…  相似文献   

14.
目的:探讨沙眼衣原体主要外膜蛋白多表位(Ct MOMP168)重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168免疫小鼠的有效免疫剂量,为体内免疫学效应的研究提供实验依据.方法:在重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168构建成功的基础上,抽提纯化质粒,分3个免疫剂量组,即50、100和150μg剂量组,同时设PBS对照组.肌肉注射免疫BALB/c小鼠3次,间隔2周,于免疫的0、2、4、6、8周分别尾静脉取血,分离血清,间接ELISA法检测小鼠血清中Ct MOMP多表位特异性抗体IgG的生成量,并于0、1、3、5、7周取小鼠阴道冲洗物,检测Ct MOMP多表位特异性SIgA的生成量,分别进行统计学分析.结果:3个不同免疫剂量组,血清特异性抗体IgG生成量于免疫第4周后均开始随免疫时间延长而逐步增加,150μg剂量组抗体IgG的生成水平高于其他剂量组(P<0.05).免疫小鼠阴道分泌物中特异性抗体SIgA生成较快,免疫开始后1周,150 μg剂量组SIgA的产生水平高于其他组,7周后SIgA开始下降,但150 μg剂量组抗体水平仍高于其他剂量组(P<0.05).结论:重组质粒DNA免疫小鼠的特异性抗体生成显示了剂量依赖关系,高剂量(150μg)免疫组小鼠血清特异性抗体IgG和阴道分泌性特异性抗体SIgA生成水平优势显著.  相似文献   

15.
以0.5%甲醛化空肠弯曲菌(简称空弯菌)菌苗经口免疫昆明小鼠,共两次。于第二次免疫后不同时间段分别处死各组小鼠,取空肠、回肠和结肠中段行冰冻切片,以间接免疫荧光技术检测肠固有膜内的特异性抗体形成细胞,用直接法检测三类(IgA、IgM、IgG)抗体形成细胞。结果提示:甲醛化空弯菌菌苗确能引起较强的肠粘膜免疫应答,固有膜内可产生大量的特异性抗体形成细胞,尤以第12天~15天为甚,且以IgA类抗体形成细胞的升高为主,IgG及IgM类抗体形成细胞亦有相应的增加。  相似文献   

16.
目的 探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响.方法 按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免疫后的4周、8周、12周、16周和20周尾静脉采血,用ELISA法检测树鼩血清中的特异性IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,实验组均在末次免疫的第四周检测到抗甲型肝炎病毒(HAV)及抗乙型肝炎病毒(HBV)抗体,抗体水平随着免疫时间延长而逐渐升高并于12周达到峰值,此后逐渐下降.同时,联合HS佐剂组的体液免疫效果均优于单纯疫苗免疫组.并且不同抗原以及联合佐剂采用不同的免疫途径免疫树鼩其免疫效果存在显著性差异.结论 通过对树鼩进行疫苗免疫原性和增强免疫效果检测,证实以树鼩作为动物模型进行疫苗评价的可行性.  相似文献   

17.
Objective To prepare the live recombinant vaccine of attenuated Salmonella typhimurium SL3261 expressing Helicobacterpylori (H. pylori) B subunit (UreB) and to determine whether it could be used as an oral vaccine against H. pylori infection. Methods Using genomic DNA of H. pylori Sydney strain (SS1) as template, the H. pylori UreB gene fragment was amplified by PCR and subcloned into the expression vector pTC01. The recombinant plasmid pTC01-UreB was then transferred into LBS000 to obtain modified forms, and further conversed into the attenuated Salmonella typhimurium SL3261 to obtain recombinant SL3261/pCT01-UreB as an oral immunization reagent, which was then used to orally immunize Balb/c mice twice at a three-week interval. Twelve weeks later, anti-UreB IgA antibodies in intestinal fluid and IgG antibodies in sera were determined by ELISA. The relating data in control groups (including body weight, gastric inflammation, etc.) were also collected. Results The sequencing analysis showed that the UreB gene fragment amplified by PCR was consistent with the sequence of the H. pylori UreB gene. The restriction enzyme digestion revealed that the correct pTC01-UreB was obtained. SDS-PAGE and Western blot showed that a 61KD protein was expressed in SL3261/pTC01-UreB, which could be recognized by anti-H, pylori UreB antiserum and was absent in the control containing only Salmonella typhimurium SL3261 strain. The multiple oral immunization with SL3261/pTC01-UreB could significantly induce H. pylori specific mucosal IgA response as well as serum IgG responses. IFN-T and IL-10 levels were significantly increased in SL3261/pTC01-UreB group, and no obvious side effect and change in gastric inflammation were observed. Conclusion The attenuated vaccine of Salmonella typhimurium expressing H. pylori UreB can be used as an oral vaccine against H. pylori infection.  相似文献   

18.
目的 探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂联合对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其复合佐剂效应.方法 分别将三种不同剂量的INCB024360类似物(150 μg,100 μg,50 μg)与Al(OH)3(300 μg)复合后与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为复合佐剂1组,2组,3组,同时设空白对照组、单纯疫苗组、铝佐剂对照组和单一INCB024360类似物(100 μg)组,共免疫一次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAV IgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于12周达到峰值.复合佐剂2组[HepA-118 EU+Al(OH)3 300 μg+INCB024360类似物100 μg]产生的抗体水平最高且持续时间较长,在8周和12周时,其对HepA-1的免疫增强效应显著高于单一佐剂组以及铝佐剂对照组(P<0.05,t值分别为3.169、2.439).4周、8周、12周、16周,单一佐剂组与单纯疫苗组差异均不具有统计学意义(P>0.05).结论 IDO抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂复合后具有较强的复合佐剂效应,免疫增强效应优于铝佐剂对照组;但是单一的INCB024360类似物不具有显著佐剂效应.  相似文献   

19.
流感疫苗脂质体干粉黏膜免疫研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的考察H3N2单价流感疫苗脂质体诱发呼吸道黏膜免疫的效果,并比较呼吸道不同部位产生抗体水平的差异。方法将实验小鼠分为非脂质体疫苗原液组、脂质体疫苗冻干粉组、阳性对照和阴性对照组(n=5)。非脂质体疫苗原液组和脂质体疫苗冻干粉组各以每只4μg和6μg血凝素含量(H3N2亚型)滴鼻免疫,同时以非脂质体疫苗原液腹腔给药和脂质体疫苗冻干粉腹腔给药作为阳性对照,以未免疫小鼠(磷酸盐缓冲液给药)作为阴性对照。免疫28 d后,采用间接ELISA法检测血清IgG和呼吸道黏膜sIgA分泌水平。结果脂质体滴鼻给药诱导的黏膜sIgA水平高于腹腔给药免疫组(P〈0.05),上呼吸道(鼻咽部)黏膜sIgA水平明显高于下呼吸道(肺部)(P〈0.01);与非脂质体组滴鼻免疫相比,上呼吸道脂质体组诱发的sIgA水平较低(P〈0.01),而下呼吸道脂质体组诱发的sIgA水平较高(P〈0.05)。结论流感疫苗脂质体滴鼻给药能有效诱发体液免疫和呼吸道黏膜免疫,上呼吸道黏膜免疫水平高于下呼吸道,但与非脂质体相比,脂质体在下呼吸道(肺部)能表现出更好的免疫佐剂效应。  相似文献   

20.
目的 探讨精神分裂症(SP)患者抗精神病药物氯氮平治疗前后免疫球蛋白及补体水平的变化。方法 采用免疫透射比浊法对83例首次发病的SP患者(观察组)和92例体检健康者(对照组)血清免疫球蛋白Ig G、Ig A、Ig M及补体C3、C4 水平进行检测。结果 观察组治疗前Ig G、Ig M、C3水平显著高于对照组(P<0 .0 5 ,P<0 .0 1,P<0 .0 1) ,经氯氮平治疗3d后血清Ig G、Ig M、C3均有不同程度下降;Ig G水平于7d时已恢复到正常,而于15 d时显著低于治疗前(P<0 .0 5 ) ;1个月后C3也恢复到正常水平,与治疗前比较明显降低(P<0 .0 5 ) ;Ig M虽有下降趋势,但仍高于正常对照组(P<0 .0 5 ) ,且治疗前后比较无显著性差异(P>0 .0 5 ) ;而Ig A、C4治疗前后比较及治疗前后与对照组比较均无显著性差异(P>0 .0 5 )。结论 抗精神病药物氯氮平能改善SP患者的免疫功能。  相似文献   

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