牙周炎基因疫苗佐剂IL⁃15对SD大鼠肠系膜淋巴结B细胞增殖的影响

目的：观察牙周炎疫苗佐剂白细胞介素?15（interleukin?15,IL?15）对SD大鼠肠系膜淋巴结B淋巴细胞增殖的影响,初步探讨用IL?15提高基因疫苗免疫效应的可能性。方法：将牙周炎基因疫苗pVAX1?HA2?FimA/IL?15（A组）、pVAX1?HA2?FimA（B组）和生理盐水（C组）鼻滴免疫SD大鼠,采用磁珠分选法分离纯化肠系膜淋巴结B细胞,CCK?8法检测B细胞的数量,RT?qPCR法检测CKs2基因相对表达量变化,ELISA法检测培养液中特异性IgA的表达水平。结果：A组B细胞增殖水平高于B组和C组（P < 0.05）;A组B淋巴细胞CKs2 mRNA相对表达量稍高于B组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。A组B淋巴细胞分泌的特异性IgA水平均高于B、C组（P＜0.05）。结论：IL?15是一种有效的基因疫苗佐剂,使用本课题组构建的牙周炎基因疫苗能够促进B细胞增殖,进而提高特异性IgA抗体的表达水平。     

燃煤型氟中毒对仔鼠氟斑牙和氧化应激的影响

摘要:目的 探讨燃煤型氟中毒对仔鼠氟斑牙发生和氧化应激的影响。方法 模拟病区燃煤方式,复制高氟空气环境,疫区煤烘玉米制作含氟饲料。48只SD大鼠按雌雄比例2:1随机分为4组,即高氟空气饲养室内分别给予饲料氟含量40mg/kg(高氟组)、25mg/kg(中氟组)、10mg/kg(低氟组)和阴性对照组。饲养8周后合笼交配。仔鼠出生后21天(哺乳期)观察下切牙氟斑牙发生情况,并检测血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)活性。结果 出生后21天,高氟组、中氟组仔鼠下切牙釉质出现棕白相间横纹等典型氟斑牙症状。与对照组相比,各实验组仔鼠血清中MDA含量升高(F=796.229,P<0.001),SOD、CAT活性降低(F=119.315、 P<0.001;F=133.670,P<0.001),且随着亲代染氟剂量的增加呈加重趋势;GSH-Px活性变化无统计学意义(F=1.666,P=0.188)。结论 亲代大鼠摄入燃煤来源过量氟可以导致仔鼠氟斑牙的发生和血清氧化-抗氧化系统失衡,氧化应激在氟斑牙发生过程中可能起重要作用。     

提高医学硕士研究生综合实验技术课教学效果的探讨

医学综合实验技术是医学类硕士研究生学习阶段的一个重要组成部分,作者所在院校通过加强师资队伍建设、优化教学内容、调整教学方法、改革考试方式等实验教学改革,让研究生在有限的实验课程时间内不但能掌握实验技术,还能激发其创新意识和创新精神,显著地提高了医学研究生综合实验技术课的教学质量和效果。     

新型青蒿素-苯丁酸氮芥酯的合成及抗肿瘤活性研究

根据药效团拼合原理,设计并合成了结构新颖的青蒿素-苯丁酸氮芥酯,其结构由1H NMR、13C NMR和HRMS-ESI表征确定。体外抗增殖测试显示,青蒿素-苯丁酸氮芥酯对人白血病细胞K562和人白血病耐阿霉素细胞K562/ADR均具有较强的抑制活性,IC50值分别为3.065±0.568和15.173±1.297μmol/L。流式细胞术结果表明,青蒿素-苯丁酸氮芥酯能够阻滞K562和K562/ADR的细胞周期,并诱导细胞凋亡。     

SD大鼠经鼻黏膜免疫牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA-(IL-15)后Tfh细胞的变化

目的:观察SD大鼠经鼻黏膜免疫牙周炎基因疫苗后Tfh细胞的变化,探讨Tfh细胞在黏膜免疫应答产生特异性sIgA抗体中的作用。方法:采用鼻滴方式免疫SD大鼠,A组为生理盐水组,B组为空载体(pVAX1)组,C组为牙周炎疫苗pVAX1-HA2-FimA-(IL-15)组,ELISA法检测大鼠唾液中特异性sIgA抗体的水平;流式细胞技术检测鼻黏膜Tfh细胞及CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞的表达。结果:第3~7周C组大鼠唾液中特异性sIgA抗体表达水平高于A组和B组(P<0.05);C组FITC(CD4)和Aleax flour 594(CXCR5)融合后呈黄色荧光,A组和B组的免疫荧光双染结果中未见双阳性荧光信号;C组大鼠鼻黏膜细胞中CD4+CXCR5+Tfh及CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞的表达均高于A组和B组(P<0.05);且发现大鼠唾液中特异性sIgA与大鼠鼻黏膜CD4+CXCR5+Tfh及CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞均呈正相关关系。结论:牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA-(IL-15)经鼻黏膜免疫大鼠后可激活Tfh细胞在鼻黏膜的表达,表达水平与特异性sIgA抗体水平呈正相关关系,说明Tfh细胞可能在促进机体产生特异性sIgA抗体的过程中起到重要作用。     

腹腔镜联合胆道镜行胆总管切开术的应用

目的探讨腹腔镜联合胆道镜在胆囊切除＋胆总管切开手术中的应用方法和价值。方法对15例腹腔镜联合胆道镜施行胆囊切除＋胆总管切开手术病例分析总结。结果本组15例均在腹腔镜下行胆囊切除＋胆总管前壁切开置入胆道镜探查/见结石取石后＂T＂型管引流术14例取石成功,1例因胆总管粘连,而中转开腹。有效率93.3%;全组病例随访6-12月,均无不良反应。结论双镜联合施行胆囊切除、胆总管切开手术,具有创伤小、探查准确,术后并发症少,恢复快等优点,值得有条件医院临床推广。     

燃煤来源型过量氟对大鼠氧化应激的影响

目的探讨氧化应激在燃煤来源型氟斑牙发生中的作用。方法以高氟煤拌粘土为燃料,每天生火10 h构建高氟空气模型,取病区煤烘玉米,配制不同比例饲料喂养大鼠。复制燃煤来源型氟斑牙大鼠模型。30只SD大鼠,体重均等、雌雄各半随机分为五组:高氟空气加饲料氟含量40 mg/kg组(H组)、高氟空气加饲料氟含量25 mg/kg组(M组)、高氟空气加饲料氟含量10 mg/kg组(L组)、高氟空气加普食组(A组)及阴性对照组(C组)。饲养16周后处死大鼠,测肝、肾组织及血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)活性。结果成功复制出大鼠氟斑牙(H、M组全部,L组1只);随染氟剂量的增大,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。H、M、L组大鼠肝、血清MDA含量逐渐升高,肝、肾及血清SOD、CAT活性呈下降趋势,A组肝、肾组织仅SOD活性降低,与C组相比,GSH-Px活性变化无统计学意义。结论高氟空气可能会导致大鼠体内氧化系统与抗氧化系统的异常,在燃煤来源型氟斑牙发生过程中,空气过量氟引起的肝、肾组织氧化应激损伤可能早于其对牙体硬组织的损害,氧化应激可能是氟中毒致机体损伤和氟斑牙发生的重要机制之一。     

转基因番茄可食防龋疫苗免疫大鼠的实验研究?

目的用表达变异链球菌表面蛋白PAcP和霍乱毒素B亚单位融合蛋白的转基因番茄免疫SD大鼠,检测其免疫原性,探索研制安全、有效的可食用防龋疫苗的可能性。方法选择雌性 SD 大鼠18只,建立龋齿模型,随机分成3组(n=6),分别为转基因番茄组(实验组)、变异链球菌灭活全菌免疫组(阳性对照组)、非转基因番茄组(阴性对照组),免疫方式为灌胃免疫,每周免疫1次,连续免疫4周。分别于首次免疫前1 d 和每次免疫1周后采集血液、唾液样品,用酶联免疫吸附实验法检测血清中免疫球蛋白 G(IgG)、唾液中分泌型免疫球蛋白 A(SIgA)抗体水平;鼠龄70 d 时处死动物,并取上下颌骨进行龋齿计分。结果免疫后,实验组和阳性对照组大鼠血清中 IgG、唾液中 SIgA 抗体水平与阴性对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);实验组和阴性对照组在 Dx 级外的各级差异有统计学意义(P <0.05)。结论转基因番茄防龋疫苗具有免疫原性,能够诱导实验动物产生有效的免疫应答,降低龋齿的发生。