冬虫夏草对梗阻性肾病大鼠肾间质表皮生长因子及转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨冬虫夏草对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用及可能机制。方法将大鼠分成3组:假手术组(SOR组)、单侧输尿管梗阻手术组(UUO组)和冬虫夏草治疗组(CST组)。无菌条件下UUO组及CST组均进行左侧输尿管结扎手术,而SOR组仅分离左侧输尿管但不结扎及剪断输尿管。于手术当天开始CST组予冬虫夏草菌粉,SOR组及UUO组予蒸馏水,均每天一次性灌胃。于术后第7、14、21、28天分别检测血尿素氮、血肌酐;梗阻肾组织行HE染色,ELISA测定表皮生长因子-β1(EGF)及Western blot检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果 3组大鼠的血尿素氮、血肌酐值于各时间点的差异无统计学意义(P>0.05);CST组HE染色见肾间质纤维化程度较UUO组减轻;CST组肾组织TGF-β1的表达明显低于UUO组(P<0.05),EGF的表达明显高于UUO组(P<0.05)。结论冬虫夏草可能通过调节TGF-β1及EGF的表达而减轻输尿管梗阻引起的肾间质纤维化。     

EGCG对梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞转分化的干预作用及机制

目的 探讨表没食子儿荼素没食子酸酯(EGCG)对大鼠肾问质纤维化和肾小管上皮细胞转分化的作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠56只随机分为正常对照组(n=8)、单侧输尿管梗阻(UUO)模型组(n=24,以单侧输尿管结扎制作肾间质纤维化模型)和EGCG治疗组(n=24,单侧输尿管结扎术后每日给予腹腔注射EGCG 5 ...     

人参皂甙Rg1对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化的作用研究

目的观察人参皂甙Rg1对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将雄性SD大鼠80只随机分为4组:UUO组、人参皂甙Rg1组(Rg1)、氯沙坦组(ARB)和假手术组(SOR)。从术后24 h开始,Rg1组予人参皂甙Rg1溶液腹腔注射50 mg/(kg.d),其余3组予以同等体积生理盐水腹腔注射;ARB组予氯沙坦溶液20 mg/(kg.d)灌胃,其余3组予以同等体积生理盐水灌胃,连续14 d。术后第3 d、7 d、14 d处死各组大鼠,行HE、Masson和PAS染色,动态观察肾间质病理学改变。采用荧光定量PCR、Western蛋白印迹、免疫组织化学方法从mRNA和蛋白质水平观察各组肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况。结果UUO组呈进行性肾间质纤维化改变,包括小管的萎缩、扩张、炎细胞浸润、肾间质胶原的沉积。Rg1组和ARB组上述肾脏病理损害明显减轻。UUO组肾脏组织TGF-β1的表达量较SOR组升高(P<0.05),尤以7~14 d明显。Rg1组和ARB组TGF-β1的表达量与UUO组比较有明显的下降(P<0.05)。结论人参皂甙Rg1对UUO所致的大鼠肾间质纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用机制可能与降低TGF-β1的表达有关。     

氧化苦参碱对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质纤维化的影响

目的 探讨氧化苦参碱对大鼠肾间质纤维化的影响.方法 将48只SD雄性大鼠随机分为假手术(SOR)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦组(LOS组)和氧化苦参碱组(OM组).大鼠肾组织行苏木精-伊红和Masson染色,计算肾间质纤维化的相对面积.免疫组化技术检测ColⅠ和FN在肾组织中的表达.结果 OM治疗组和LOS治疗组能有效改善UUO大鼠的肾脏问质纤维化,ON组和LOS组中各时间点ColⅠ和FN蛋白的表达均分别低于UUO组(P<0.05),但高于SOR组(P<0.05),两组治疗间差异无统计学意义(P>0.05).结论 氧化苦参碱在一定程度上可减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度,延缓肾脏间质纤维化.     

大豆异黄酮对 UUO大鼠TGF-β1的抑制作用

目的　探讨大豆异黄酮对单侧输尿管梗阻 (unilateralureteralobstruction ,UUO)大鼠梗阻肾脏肾间质纤维化的防治作用及机制。方法　观察大鼠结扎侧肾脏的病理改变 ,应用HE和PAS染色观测肾间质容量 ,应用RT PCR法检测肾组织内TGF β1mRNA的表达。结果　异黄酮组梗阻肾肾间质容量明显低于对照组 ;异黄酮组TGF β1mRNA表达明显低于对照组 ,统计学分析差异显著 (P <0 0 5 ) ,异黄酮组肾间质纤维化程度轻于对照组。结论　大豆异黄酮对UUO大鼠梗阻肾肾间质纤维化有一定的抑制作用 ,其机制与大豆异黄酮可抑制TGF β1mRNA的表达有关。     

肾炎康复片对大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的:研究肾炎康复片对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用。方法:21只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、肾间质纤维化组(UUO组)及肾炎康复片组(SKT组),观察大鼠UUO术后14d梗阻侧肾脏的组织学变化、纤维连接蛋白(FN)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-l)的表达情况。结果:与Sham组相比,UUO组大鼠肾间质纤维化面积显著增加(P<0.01),FN及TIMP-1表达均有显著增高(P<0.01);与UUO组相比,SKT组大鼠肾间质纤维组织面积减少,FN及TIMP-1表达减弱(P<0.01);UUO组和SKT组大鼠FN及TIMP-1与肾间质纤维化面积成正相关(P<0.01)。结果:肾炎康复片可下调FN和TIMP-1在UUO大鼠肾间质中的表达,从而延缓肾间质纤维化的进展。     

没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠肾间质纤维化的影响及机制探讨

目的探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用。方法将30只健康、雄性SD大鼠随机分为UUO组、假手术组(SOR)和EGCG组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,EGCG组分别灌胃EGCG20mg/(kg.d),连续3天。术后第8天分别处死各组大鼠,用免疫组织化学方法测定转化生长因子β(TGF-β)的表达情况。行HE和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果EGCG组TGF-β的表达量(1.94±0.31)与模型组(3.11±0.39)比较明显降低(p<0.01)。EGCG能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论没食子儿茶素没食子酸酯对单侧输尿管梗阻所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β的表达有关。     

羟苯磺酸钙对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:评价羟苯磺酸钙对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化影响,并探讨其作用机制。方法:21只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、肾间质纤维化组(UUO组)及羟苯磺酸钙组(CDT组),分别采用病理及免疫组织化学方法观察UUO术后14 d大鼠梗阻侧肾脏的组织学变化和MMP-9、TIMP-l表达情况。结果:与Sham组相比,UUO组大鼠肾间质纤维组织面积显著增加(P<0.01),MMP-9、TIMP-1表达均有显著增高(P<0.01)。与UUO组相比,CDT组大鼠肾间质纤维组织面积减少,MMP-9表达增强、TIMP-1表达减弱(P<0.01),UUO组和CDT组大鼠左肾MMP-9/TIMP-1与肾间质纤维化面积成负相关,且有统计学意义(P<0.01)。结论:羟苯磺酸钙可缓解输尿管梗阻导致的肾间质纤维化,其机制可能与其调节MMP-9/TIMP-1紊乱、改善基质代谢有关。     

小鼠肾间质纤维化动物模型的实验探索与研究

目的：观察单侧输尿管结扎（UUO）小鼠模型中肾脏的各项病理改变,肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的变化,探讨单侧输尿管结扎建立小鼠肾间质纤维化模型的可行性。方法：小鼠随机分为假手术组（SOR）和UUO组。随机选取各组中的7只小鼠分别于单侧输尿管结扎术后5d、8d、11d、13d、15d、18d和21d处死,收集双侧肾组织进行相应检测分析。结果：U-UO组术后第5天,肾脏组织出现早期纤维化的病理改变。随着梗阻时间延长,小管间质纤维化程度逐渐加重。术后第18天,病变最典型。结论：单侧输尿管结扎能建立理想的小鼠肾间质纤维化动物模型。     

血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1在梗阻性肾病肾间质中的表达和血竭素高氯酸盐对其的干预作用

目的 探讨在单侧输尿管梗阻(UUO)性肾病肾间质中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(serum and glucocorticoid induced kinase 1,SGK1)的表达及血竭素高氯酸盐(Dracohodin Perchlorate,DP)对其的干预作用.方法 用单侧输尿管梗阻的方法致大鼠肾间质纤维化,60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量和高剂量DP治疗组,分别在造模第3、7、14天后处死各组大鼠,采集静脉血检测肾功能(BUN、SCr)变化,肾组织标本用碘酸-席夫(PAS)染色确证发生纤维化病变,免疫组化技术检测肾组织SGK1蛋白的表达及DP干预后的变化.结果 与假手术组比较,模型组大鼠第7、14天血清BUN、SCr水平显著升高(P＜0.05),肾间质纤维化形成;与模型组比较,仅有DP高剂量治疗组大鼠血清肾功能指标好转(P＜0.05),肾间质纤维化好转.模型组大鼠肾间质SGK1蛋白的表达明显高于假手术组(P＜0.05),且随着梗阻时间延长其表达呈增强趋势;仅DP高剂量治疗组大鼠的肾间质SGK1蛋白显著低于模型组(P＜0.05).结论 在梗阻性肾病肾间质纤维化进程中,SGK1蛋白表达明显上调,而DP对SGK1蛋白的表达有显著的抑制作用,可能对肾间质纤维化病变起到一定延缓作用.     

血必净对梗阻肾间质炎性损害的干预实验

目的动态观察单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）模型肾间质炎性损害病理改变及核因子-κB（NF～κB）、转化生长因子一β1（TGF-β1）在肾间质的表达,探讨血必净对肾间质炎性损害的干预机制。方法Sprague—Dawley（简称SD）清洁级健康大鼠雌雄各半共60只,随机分为三组：假手术组（SOR组）、模型组（MOD组）、血必净治疗组（XBJ组）。每组20只;建立UUO模型,分别于手术后第7d、第14d各组随机选取10只大鼠,取梗阻侧肾组织,行HE、MASSON染色及免疫组化染色。观察肾脏间质病理变化以及NF—κBp65和TGF一β1在肾间质的表达。结果血必净能减轻UUO大鼠肾间质炎性损害（第7d、第14d肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积P〈0．05）;血必净能下调肾组织间质NF—κBp65及TGF-β1的的表达（P〈0．05）有统计学意义。结论血必净减轻肾间质炎性损害,其机制可能通过抑制肾组织间质NF-κBp65及TGF-β1的的表达,并对早期肾间质纤维化有抑制作用。     

脐带间充质干细胞外泌体对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的: 探讨人脐带间充质干细胞来源的外泌体（human umbilical cord mesenchymal stem cell derived exosomes,hucMSC-Ex）对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction, UUO）所致大鼠肾小管间质纤维化的修复作用。方法: 分离培养hucMSC并从培养上清液中提取hucMSC-Ex。采用单侧输尿管结扎法构建肾间质纤维化模型,将大鼠随机分为假手术组、UUO组和hucMSC-Ex组,每组6只,hucMSC-Ex组大鼠在术后24 h 尾静脉注射250 μg hucMSC-Ex。7 d后收集肾脏组织,观察各组肾脏大体观。蛋白质印迹检测肾组织纤维化相关蛋白TGF-β1、E-钙黏蛋白和波形蛋白,并对肾脏组织切片进行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色,观察大鼠梗阻侧肾脏病理结构变化、炎症细胞浸润情况及肾纤维化程度,综合评价hucMSC-Ex对大鼠肾脏纤维化的抑制效果。结果： 与假手术组相比,UUO组大鼠肾脏炎性细胞浸润显著增加,组织结构严重破坏,广泛胶原沉积;hucMSC-Ex干预后组织形态结构部分恢复,胶原沉积减少,炎性细胞浸润减少。同时,UUO组大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、TGF-β1和波形蛋白表达升高,E-钙黏蛋白表达降低;但hucMSC-Ex输注后能够抑制α-SMA和TGF-β1的表达,逆转上皮间质转化。结论： hucMSC-Ex可以减轻大鼠肾组织病理损伤,延缓大鼠肾间质纤维化的进程。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质MCP-1的表达及其意义

目的：探讨肾间质纤维化中单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的表达及其与肾间质巨噬细胞浸润的关系。方法：60只SD雌性大鼠随机分成假手术（SOR）组、单侧输尿管梗阻（UUO）组，于术后第1，4，7，10，14 d分别处死各组大鼠。用HE和MASSON染色法观察UUO大鼠术后不同时间点肾脏病理改变，用免疫组化法检测肾小管间质MCP-1表达和巨噬细胞浸润。结果：UUO组肾小管-间质MCP-1，单核巨噬细胞抗原ED-1表达较SOR组明显增多（P<0.05），MCP-1表达与巨噬细胞浸润呈正相关（r =0.865,0.928,0.858,0.893,0.873，均P<0.05）；MCP-1表达和巨噬细胞浸润分别与肾间质胶原相对面积呈正相关（分别为r =0.856,0.896,0.686,0.820,0.867和r =0.942,0.898,0.920,0.914,0.829，均P<0.05）。 结论：随UUO大鼠病程进展，肾小管间质MCP-1表达增多，可能在肾间质纤维化中起重要作用。MCP-1可能通过介导巨噬细胞浸润参与肾间质纤维化，MCP-1可成为治疗肾间质纤维化的新靶点。     

CD47在单侧输尿管梗阻大鼠模型中调控血管生成的作用研究

目的 探讨整合素相关蛋白CD47在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型中对血管调控的作用.方法 将SD大鼠随机分为2组：UUO组50只和假手术组（SOR） 25只.UUO组随机选取10只分别于术后3、7、14、21和28天处死,;SOR组随机选取5只于按相同时间点处死.行HE染色观察肾间质病理学改变;免疫组化技术观察CD34、VEGF、TSP-1、CD47的表达.结果 UUO组呈进行性肾间质纤维化改变,包括小管的萎缩、扩张、炎细胞浸润以及CD34、VEGF表达下降（P＜0.05）;肾小管损伤评分、TSP-1、CD47的表达水平升高（P＜0.05）.相关分析显示CD47的表达与CD34的表达呈负相关（r=-0.925,P＜0.01）,与VEGF表达也呈负相关（r=-0.946,P＜0.01）.结论 CD47与其配体TSP-1结合,可能通过调控内皮细胞VEGF信号的传导,参与UUO大鼠模型RIF过程中血管病变的发生发展.     

骨调素和单核细胞趋化蛋白在大鼠梗阻性肾病中的表达及可能作用

目的:探讨骨调素(OPN)和单核细胞趋化蛋白(MCP1)在大鼠梗阻性模型中的表达及其在肾脏纤维化发病机制中的作用。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)制造梗阻性肾病模型,分别于造模后第7天、14天取肾组织,用HE和Masson染色法观察UUO大鼠术后不同时间点肾脏病理改变,免疫组化方法检测肾组织中OPN和MCP1蛋白的表达。结果:OPN、MCP1表达主要位于肾小管上皮细胞,随着梗阻时间的延长,肾组织中OPN、MCP1蛋白表达明显增加。表达分别与肾间质胶原相对面积呈正相关。结论:OPN、MCP1蛋白在梗阻性肾病大鼠肾组织表达明显增加介导炎症过程,参与肾间质纤维化。     

p27在大鼠肾间质纤维化中的表达及依那普利对其干预后的影响

目的：研究单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）大鼠肾小管上皮细胞p27的表达与肾间质纤维化的关系，并探讨血管紧张素转化酶抑制剂依那普利干预后p27表达的变化，以进一步阐述其抗纤维化机制。方法：90只SD大鼠随机分成假手术组（sham—operated rates，SOR）、UUO模型组、依那普利治疗组（UUO＋Enalaparil treated group，T—UUO）。于术后第7，14，21天分别处死各组大鼠10只。用HE染色动态观察肾脏病理变化，免疫组织化学法测定p27的表达及动态变化．RT—PCR法测定p27 mRNA的水平。结果：SOR组肾小管上皮细胞p27蛋白及肾皮质P27 mRNA的表达均强，UUO组随着间质纤维化程度的加重，p27 mRNA的表达逐渐减弱，而依那普利在UUO术后第14，21天能增强p27的表达。结论：（1）p27参与了UUO大鼠肾间质纤维化的发病过程；（2）UUO大鼠肾间质纤维化模型中依那普利抗间质纤维化机制部分是通过增强p27的表达。     

人参皂甙Rb1对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的抗氧化保护作用

目的观察人参皂甙Rb1对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠氧化应激和肾间质纤维化的影响。方法将雄性SD大鼠60只随机分为UUO组、Rb1治疗组、假手术（SOR）组,科素亚（ARB）组。每组15只,术后3、7、14d每组随机选择5只大鼠处死。比色法检测肾脏组织匀浆OH·、MDA、SOD,行HE和Masson染色动态观察肾脏病理学改变。结果与SOR组相比,UUO组大鼠术后3、7、14d,OH·、MDA高于SOR组,SOD低于SOR组。Rb1治疗组大鼠OH·、MDA水平均不同程度低于UUO组,SOD水平均不同程度高于UU0组;其疗效与ARB组相似。与UUO组相比,Rb1能显著减少UUO大鼠胶原在肾间质的沉积,改善肾脏病理损害。相关分析显示,OH·、MDA的表达与间质相对面积呈正相关,SOD的表达与间质相对面积呈负相关。结论人参皂甙Rb1能抗肾间质纤维化;其机制与其抗氧化应激有关。     

维拉帕米阻抑UUO大鼠肾间质纤维化

目的探讨维拉帕米对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响。方法将24只大鼠随机分为对照组（即假手术组）、UUO模型组、维拉帕米治疗组,采用单侧输尿管梗阻模型,术后8天观察梗阻肾组织病理改变,比色法测定肾组织羟脯氨酸（HYP）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量,并应用放射免疫法检测血浆和肾组织内皮素-1（ET-1）的含量。结果与对照组比较,模型组肾组织HYP和MDA含量明显升高,血浆和肾组织内皮素-1含量明显升高,肾组织SOD含量显著下降（P〈0．01）,维拉帕米治疗组与模型组相比,肾组织HYP和MDA含量明显下降,血浆和肾组织内皮素-1下降,肾组织SOD含量显著升高,差异均有显著性（P〈0．05）。结论维拉帕米能减少单侧输尿管梗阻大鼠脂质过氧化物的产生,降低血浆和肾组织内皮素-1的含量,增加抗氧化酶的含量,从而阻抑UUO大鼠肾间质纤维化。     

血府逐瘀胶囊对单侧输尿管梗阻大鼠SnoN和Ski表达的影响

目的：探讨血府逐瘀胶囊对单侧输尿管梗阻所致大鼠肾间质纤维化的作用及其机制。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、血府逐瘀胶囊治疗组，采用单侧输尿管结扎术（UUO）建立大鼠肾间质纤维化模型。术后21d取各组大鼠肾组织HE染色及六胺银染色（PASM），观察肾组织病理变化；检测大鼠血肌酐和尿素氮含量，观察肾功能变化；放射免疫法检测肾组织中Ⅲ型前胶原含量，观察肾纤维化程度；Western blot检测肾组织中核转录共抑制因子SnoN与Ski蛋白表达水平，观察TGF—β1／Smad信号转导通路中逆向调控信号分子表达水平的变化。结摹：与假手术组比较，模型组大鼠肾小管基底膜明显增厚，部分肾小管上皮细胞变性，肾小管萎缩，管腔显著扩张，。肾间质明显增宽；血肌酐与尿素氮含量以及肾组织中Ⅲ型前胶原含量显著增加：SnoN、Ski蛋白表达显著减少。血府逐瘀胶囊治疗组大鼠梗阻侧肾组织的病理变化明显改善，血肌酐与尿素氮水平以及肾组织中Ⅲ型前胶原含量明显降低，SnoN蛋白表达水平显著增加，而Ski蛋白表达没有改变。结论：血府逐瘀胶囊可通过恢复SnoN蛋白表达水平，抑制TGF—β1，靶基因的活化，从而改善UUO大鼠的。肾功能和肾间质纤维化程度。