大肠癌中S期激酶相关蛋白2的表达及与临床病理的关系

S期激酶相关蛋白2（Skp2）是F-box蛋白家族中的一员,参与泛素介导的蛋白酶水解.Skp2能特异性地识别磷酸化的细胞周期负性调控因子p27,使之泛素化并进入26S蛋白酶体实现泛素化降解,其在肿瘤发生发展中的作用日益受到关注.本实验采用免疫组化S-P法检测Skp2在大肠癌中的表达,并探讨其与临床病理特征的关系.     

细胞穿透肽PEP-1介导增强型绿色荧光蛋白在小鼠体内跨膜转导

目的 研究细胞穿透肽PEP-1介导的大分子物质在小鼠体内的跨膜转导能力.方法 用基因工程的方法制备并纯化增强型绿色荧光蛋白EGFP和PEP-1-EGFP融合蛋白,分别将500 μg的EGFP蛋白和PEP-1-EGFP融合蛋白通过尾静脉注射入昆明小鼠体内,2 h后麻醉小鼠,PBS充分灌流并取心、脑、肝、脾、肾快速冷冻切片后立即置荧光显微镜下观察.结果 2 h后PEP-1-EGFP融合蛋白处理的小鼠大脑、心肌、肝、脾和肾组织里出现均一的明亮绿色荧光,而EGFP蛋白处理的小鼠各脏器内均未见到绿色荧光.结论 细胞穿透肽PEP-1能携带增强型绿色荧光蛋白穿透小鼠细胞膜并分布于心、脑、肝、脾、肾组织内,为将来用PEP-1介导各种大分子药物跨膜转导进行各种疾病的蛋白治疗提供实验依据.     

微血管密度与胃癌侵袭和转移的关系

目的 :探讨胃癌组织中微血管密度 (MVD)与胃癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学S -P法和抗人因子Ⅷ相关抗原 (FⅧ -RAg)的抗体 ,标记 6 8例胃癌组织中的微血管 ,检测MVD。分析其与胃癌组织学类型、分化水平、浸润深度及淋巴结转移的关系。结果 :6 8例胃癌组织中FⅧ -RAg阳性表达 5 2例 ,占 76 .4 7%。FⅧ -RAg和MVD与分化水平、浸润深度 (P <0 .0 1)及淋巴结转移 (P <0 .0 0 1)密切相关。不同组织学类型中FⅧ-RAg的表达具有显著相关性 (P <0 .0 1) ,而MVD则与胃癌组织学类型无显著差异 (P >0 .0 5 )。 结论 :血管生成对胃癌的发展具有一定作用 ,FⅧ -RAg的检测和MVD可作为判断胃癌恶性程度和预后的生物学指标。     

细胞穿透肽PEP-1介导增强型绿色荧光蛋白穿透在体小鼠皮肤

目的:研究细胞穿透肽PEP-1介导的增强型绿色荧光蛋白穿透小鼠皮肤的能力。方法:用基因工程的方法制备并纯化EGFP蛋白和PEP-1-EGFP融合蛋白,分别将1mg的蛋白涂抹在昆明小鼠背部皮肤上,4 h后处死小鼠取背部皮肤冰冻切片后立即在倒置荧光显微镜下观察。结果:EGFP处理的小鼠皮肤仅在角质层表面有少量荧光,PEP-1-EGFP融合蛋白处理的小鼠皮肤可见绿色荧光穿透角质层并分布于表皮和真皮内。结论:PEP-1-EGFP融合蛋白能穿透小鼠皮肤角质层并分布于表皮和真皮内,这为将来用细胞穿透肽PEP-1经皮转导大分子药物治疗各种皮肤病以及全身系统性疾病奠定了基础。     

HIF-1α和VEGF在大肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:免疫组化法检测61例大肠癌组织中H IF-1α及VEGF蛋白表达,并与15例正常大肠组织比较。结果:大肠癌组织中H IF-1α和VEGF的阳性表达率分别为54.10%(33/61)和62.30%(38/61),均明显高于正常对照组(P<0.05);两者呈正相关(r=0.505,P<0.05);Dukes分期中的表达存在显著差异(P<0.05);组织学分级中的表达则无差异性(P>0.05)。结论:H IF-1α及VEGF在肿瘤血管生成和转移中起重要作用,联合检测H IF-1α和VEGF可作为判断大肠癌转移潜能和预后的重要指标。     

藤梨根提取物对人食管癌细胞生长抑制作用的研究

观察藤梨根正丁醇提取物对培养的人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,探讨藤梨根对人食管癌细胞的作用机制。方法:MTT比色法检测藤莉根正丁醇提取物在不同浓度(1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml)及不同时间(24 h、48 h、72 h)对Eca-109细胞生长抑制作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达到87.2%。同时,提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应,而在对照组,未见有明显凋亡现象。结论:藤梨根正丁醇提取物能有效抑制人食管癌Eca-109细胞生长。     

多囊卵巢动物模型的实验研究

目的对孕激素联合HCG PCO动物模型进行评估。方法给24日龄雌性SD大鼠皮下埋植孕酮硅胶棒,2 d后再连续9 d皮下注射低剂量HCG,观察卵巢形态、血清激素含量及卵巢颗粒细胞凋亡、卵泡闭锁情况。结果模型组大鼠卵巢重量、体积增加,卵巢呈多囊性改变,卵泡颗粒细胞减少而膜细胞层增加,颗粒细胞凋亡及卵泡闭锁增加,血清中孕酮、睾酮明显增高,而雌二醇变化不明显。结论此动物模型卵巢病理改变及血内分泌改变与PCOS病人相似,可以作为多囊卵巢研究的动物模型。     

层黏连蛋白及其受体在胃癌中的表达及其与侵袭和转移的关系

目的 :探讨层黏连蛋白 (LN)和LN受体 (LN R)的表达与胃癌侵袭和转移的关系。方法 :应用免疫组织化学S P法检测 68例胃癌组织中LN和LN R的表达。结果 :LN在有淋巴结转移组中阳性表达率明显低于无转移组 ,P <0 0 1;LN在其他各组中的表达差异无统计学意义 ,P >0 0 5 ;LN R的阳性表达率有随肿瘤分化水平的降低、浸润深度的增加而增高 ,P <0 0 1;淋巴结转移组中的LN R表达明显高于无淋巴结转移组 ,P <0 0 0 1。结论 :LN的低表达与肿瘤的转移有关 ,LN R的高表达与肿瘤分化、侵袭和转移的关系十分密切。LN和LN R可作为胃癌进展的重要生物学指标之一。     

2279例宫颈液基细胞学检测结果的回顾性研究

目的应用宫颈液基细胞学技术检测宫颈病变,寻找提高子宫颈癌前病变及宫颈癌的检出率的最有效途径。方法随机抽取2279例就诊病人进行TCT检查分析。细胞学诊断采用TBS分级系统。细胞学诊断阳性者,全部在阴道镜下取活组织检查,所有检查均在双盲下进行。结果除12例不满意标本外,TCT异常者检出率为8.43%(191/2267);其中ASCUS占5.03%(114/2267),鳞状上皮内病变(SIL)及鳞状细胞癌(SCC)占3.40%(77/2267);低度鳞状上皮内病变(LSIL)占1.72%(39/2267),高度鳞状上皮内病变(HSIL)占1.59%(36/2267);宫颈鳞状细胞癌(SCC)占0.09%(2/2267)。结论细胞学筛查是诊断宫颈病变的重要方法,配合阴道镜下活检,能提高子宫颈癌前病变和宫颈早期浸润癌检出率,具有重要的临床意义。     

Hap1基因氧化还原功能区I64V变异体在大肠癌中意义的探讨

目的:探讨Hap1基因氧化还原功能区I64V变异体的功能意义。方法:免疫组化方法检测具有和不具有I64V变异体的大肠癌细胞增殖指数;TUNEL法测定肿瘤细胞凋亡指数。结果:具有I64V变异体病例与不具该变异体病例的细胞增殖数分别为39.89±16.10和36.60±16.03;凋亡指数分别为2.53±0.91和2.78±1.28,均无统计学差异(p>0.05)。结论:Hap1基因氧化还原功能区I64V变异体不影响细胞的增殖与凋亡活性。