冠心宁片对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的观察冠心宁片(GXNT)对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心肌梗死和心脏自主神经功能的影响。方法 SD大鼠70只,随机分为7组,即伪手术组、MI/RI组、GXNT 75 mg/kg,150 mg/kg,300 mg/kg,600mg/kg剂量组和300 mg/kg复方丹参片(DST)组,每组10只。所有大鼠均预防性经口灌胃给药7 d后,采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法,建立MI/RI大鼠模型。期间记录大鼠心电图并分析心电图J点和心率变异性(HRV)指标,并用伊文思蓝(EB)和2,3,5-氯化三苯基四氮唑蓝(TTC)双重染色心肌并分析心肌梗死面积以及行HE染色观察心肌病理学改变,测定血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平。结果与MI/RI组比,冠心宁片组和复方丹参片组能明显减轻心肌梗死面积和抑制LDH和CK活性的升高(P0.05,P0.01),并能降低再灌注期大鼠"-J值和J点平均值(P0.05,P0.01),显著提高HRV和血浆NO水平以及降低血浆MDA含量(P0.05,P0.01),并能改善心肌组织病理。结论冠心宁片能减轻MI/RI大鼠心肌梗死,并能改善心脏自主神经功能。     

蝮蛇毒PCA抗血栓形成的实验研究

目的：探讨皖南产蝮蛇毒（AHV）蛋白质C激活物（Protein C Activator,PCA）组分抗血栓效应。方法：家兔40只,随机分为4组,每组10只,颈总动脉取l ml注入血栓形成仪4个（硅化）聚乙烯管中,各管中分别含50、30、10μl（0.6216 mg/ml）蝮蛇毒PCA组分及50μl生理盐水,37℃条件下以16 r/min在恒流泵上旋转制备血栓;SD大鼠60只,随机分为假手术（SH）组、心肌梗死模型（MI）组（月桂酸钠左心室注入造模）、PCA干预组（MI＋PCA组分为0.5 mg/kg、2 mg/kg、8 mg/kg 3个剂量组）、阳性对照组（阿司匹林5mg/kg）,每组10只,各实验组动物均于术后3 h颈总动脉取血,按同样方法制备血栓;血液离心,分离血浆检测凝血功能。结果：蝮蛇毒PCA组分大、中、小3剂量组与对照组相比较,血栓的干、湿重量及长度均比对照组减轻（P〈0.05）;MI＋PCA组（2 mg/kg、8 mg/kg）与MI组比较,血栓的干、湿重量长度均有明显差异（P〈0.05）,与阳性对照组无差异（P〉0.05）;MI＋PCA组（2 mg/kg、8 mg/kg）与MI组比较,PT、APTT均明显增高（P〈0.05）,FIB显著降低（P〈0.05）,TT差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：AHV粗毒中分离纯化的PCA组分可明显干预血栓的形成,其可能通过PCA激活蛋白质C（Protein C）改变凝血功能。     

肾上腺髓质素、内皮素-1对大鼠肢体缺血再灌注致心肌损伤的影响

目的 观察大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肾上腺髓质素(ADM)与内皮素-1(ET-1)的变化,探讨ADM/ET-1的平衡在LIR致心肌损伤中的作用.方法 在大鼠LIR损伤模型上,应用受体阻断剂进行干预,将Wistar大鼠随机分成对照组(Control组)、肢体缺血再灌注组(LIR组)、CGRP8-37+LIR组(CGRP8-37组)和BQ123+LIR组(BQ123组).采用放射免疫方法测定血浆和心肌组织ADM、ET-1含量的变化;比色法测定血浆活性氧(ROS),心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量的变化;心肌酶学检测.结果 大鼠LIR后,血浆和心肌组织ADM、ET-1含量较对照组均明显升高,ADM/ET-1降低(P＜0.05),血浆ROS、心肌组织MDA、XOD含量明显升高,SOD、GSH-PX含量降低(P＜0.05);心肌酶升高.CGRP8-37组,血浆和心肌组织ADM/ET-1较LIR组进一步降低,心肌损伤加重.BQ123组,血浆和心肌组织ADM/ET-1较LIR组升高,心肌损伤减轻.结论 ADM、ET-1增高可能是大鼠LIR后代偿性自身保护机制之一,ADM/ET-1的失衡参与了LIR后心肌损伤的病理生理过程.     

辛伐他汀对心肌梗死大鼠心功能、心肌肌球蛋白重链与肌动蛋白的影响

目的:探讨3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂辛伐他汀对心肌梗死后心肌细胞内α-肌球蛋白重链(α-MHC),β-肌球蛋白重链(β-MHC)及骨骼肌α肌动蛋白(Sk α-actin)表达的影响.方法:结扎Wistar大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分为心肌梗死组(MI组)、辛伐他汀(Sim)20 mg组和40 mg组,另设假手术组(SH组).Sim组分别予20 mg/kg·d和40 mg/kg·d灌胃,MI组和Sham组以等量等浓度溶剂灌胃.8 wk后检测各组血流动力学指标,RT-PCR检测大鼠非梗死区心肌α-MHC和β-MHC mRNA表达,免疫组化法测定Sk α-actin表达.结果:MI组左室舒张末压高于SH组,左室收缩压低于SH组;两个Sim组左室舒张末压低于MI组,左室收缩压高于MI组.MI组α-MHC mRNA表达低于SH组,β-MHC mRNA表达高于SH组(均P＜0.01);两个Sim组α-MHC mRNA表达均高于MI组,β-MHC mRNA表达低于MI组(P＜0.01).Sk α-actin在SH组表达少,MI组表达明显增多,在两个Sim组中表达少于MI组.两个Sim组间无统计学差异.结论:辛伐他汀能减少心肌梗死后非梗死区心肌细胞内α-MHC基因mRNA表达,增加β-MHC基因mRNA表达,减少Sk α-actin表达,抑制心肌肥大,改进心脏功能.     

茯苓酸调节PI3K/Akt信号通路对心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的 观察茯苓酸(PA)调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶B(Akt)信号通路对心力衰竭(HF)大鼠心肌纤维化(MF)的影响。方法 将108只大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、茯苓酸低剂量组(1 mg/kg)、茯苓酸中剂量组(5mg/kg)、茯苓酸高剂量组(10 mg/kg)、激活剂组(10 mg/kg PA+0.02 mg/kg PI3K激活剂740Y-P),每组18只。采用左冠状动脉前降支结扎法诱导心肌梗死(MI)后HF大鼠造模成功后用超声影像系统检测大鼠心功能;HE染色观察大鼠心肌组织形态;Masson染色观察大鼠心肌胶原蛋白的分布并计算胶原容积分数(CVF);羟脯氨酸(HYP)试剂盒测定大鼠心肌组织HYP含量;TUNEL染色检测大鼠心肌细胞的凋亡情况;检测大鼠心肌组织活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;ELISA法检测各组大鼠心肌组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western Blot检测心肌组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)...     

大鼠冠状动脉微血栓模型

目的　建立大鼠冠状动脉微血栓模型。　方法　大鼠分为对照组和冠脉微血栓组 (模型组 ) ,每组各12只。钳夹升主动脉后自主动脉根部注入生理盐水或月桂酸钠 1.0 mg/ kg,1h后取标本。苏木精 -伊红染色观察冠脉微循环改变 ,Nagar- Olsen染色观察早期心肌低氧程度。　结果　 (1)模型组出现微动脉血管内皮损伤及微动脉血栓形成 ,对照组无此情况 (P <0 .0 1) ;模型组微动脉内皮损伤率为 10 .17%± 2 .33% ,血栓形成率 9.4 2 %±2 .0 2 %。 (2 ) Nagar- Olsen染色模型组心肌缺血区域占所观察心肌横截面面积的 7.2 0 %± 2 .4 3% ,对照组无心肌缺血 (P<0 .0 1)。　结论　月桂酸钠可稳定地诱发冠脉微血栓形成 ,该模型可用于冠脉微血栓及微栓塞研究的平台     

冠心宁片减轻心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌梗死和改善心脏自主神经功能的作用研究

目的 观察冠心宁片（GXNT）对心肌缺血再灌注损伤（MI/RI）大鼠心肌梗死和心脏自主神经功能的影响。方法 SD大鼠70只,随机分为7组,即伪手术组、MI/RI组、GXNT 75mg/kg,150mg/kg,300mg/kg,600mg/kg剂量组和300mg/kg 复方丹参片（DST）组,每组10只。所有大鼠均预防性经口灌胃给药7天后,采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法,建立MI/RI大鼠模型。期间记录大鼠心电图并分析心电图J点和心率变异性（HRV）指标,并用伊文思蓝（EB）和2,3,5-氯化三苯基四氮唑蓝（TTC）双重染色心肌并分析心肌梗死面积,测定血浆乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）水平。结果 与MI/RI组比,冠心宁片组和复方丹参片组能明显减轻心肌梗死面积和抑制LDH和CK活性的升高（P<0.05, P<0.01）,并能降低再灌注期大鼠?-J值和J点平均值（P<0.05,P<0.01）,显著提高HRV和血浆NO水平以及降低血浆MDA含量（P<0.05,P<0.01）。结论 冠心宁片能减轻MI/RI大鼠心肌梗死,并能改善心脏自主神经功能。     

当归对大鼠心肌梗死后早期左室重构的实验研究

目的:观察巨噬细胞、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)在大鼠心梗后早期左室重构过程中的变化及当归的治疗作用,探讨干预机制。方法:结扎SD大鼠冠脉前降支制备心梗模型,随机分为假手术组(sham组),心梗组(MI组)和心梗当归组(MI+Angelica组)。术后24h开始给药,MI+Angelica组腹腔注射当归2mL/(100g.d),sham组和MI组腹腔注射等量生理盐水。于术后1W、2W、4W记录左室血流动力学变化,测定血浆中MDA和SOD浓度改变,并检测非梗死区心肌胶原及巨噬细胞的变化(免疫组化法)。结果:①与sham组相比,MI组和MI+Angelica组非梗死区心肌巨噬细胞阳性表达率显著升高(P<0.01),以1W的阳性表达率为最高,但MI+Angelica组低于MI组(P<0.01);②与sham组相比,MI组和MI+Angelica组术后各时间点血浆中MDA浓度升高,SOD浓度降低(P<0.01),但MI+Angelica组MDA低于MI组,SOD高于MI组,4W时有统计学意义(P<0.05);③术后各时间点MI组心功能受损,于术后4W心肌胶原容积分数(CVF)及血管周围胶原面积(PVCA)明显升高(P<0.01);与MI组比较,术后4W MI+Angelica组心功能改善,CVF及PVCA降低(P<0.05)。结论:当归可能通过清除体内自由基、增强机体的抗氧化能力、抑制巨噬细胞在非梗死区的浸润和聚积,阻断促左室肥厚和反应性纤维化发生等环节,防治和逆转左室重构。     

红花黄色素调节NF-κB/NLRP3信号通路对心肌梗死大鼠心肌细胞焦亡和炎性损伤的影响

目的:探究红花黄色素(CY)调节核因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对心肌梗死(MI)大鼠心肌细胞焦亡和炎性损伤的影响。方法:通过冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠MI模型。并将72只SPF级雄性大鼠分为：对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、低剂量CY组(CY-L组,20mg/kg)、高剂量CY组(CY-H组,40mg/kg)和高剂量CY+NF-κB激活剂组(CY-H+LPS组,CY 40mg/kg+LPS 10mg/kg),每组12只。造模后腹腔注射给药,1次/d,共28d。给药结束后对各组大鼠进行超声心电图检查,检测心功能变化情况。2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)-伊文斯蓝(EB)法和免疫荧光法检测各组大鼠心肌梗死面积和心肌细胞焦亡比例。苏木素伊红(HE)和马松(Masson)染色观察心肌组织病理学变化。试剂盒检测大鼠心肌中白细胞介素(IL)-1β、IL-18和乳酸脱氢酶(LDH)水平。Western Blot检测心肌组织中NF-κB、NLRP3、cleaved-caspase1、胃泌素D-N(GSDMD-N...     

银杏叶提取物与阿司匹林抗血栓栓塞作用的比较研究

目的 探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extracts,GBE)对血栓栓塞的作用及机制,与小剂量阿司匹林对比研究.方法 通过在体电刺激颈动脉制备大鼠血栓栓塞模型,动态观察颈动脉栓塞形成程度同时观察血管栓塞显微照片,研究评价在相当人临床用量的GBE和小剂量阿司匹林对血栓栓塞的抑制作用;采用放免法测定血栓形成大鼠血浆前列环素和血栓素的含量,研究探讨GBE抑制血栓形成的机制.采取冷应激法制备大鼠血液流变学病理模型,测定全血粘度、血浆粘度、血沉和细胞压积指标,研究和评价GBE和小剂量阿司匹林对血液流变学的影响.结果 6.7 mg/kg GBE、20 mg/kg GBE和9 mg/kg阿司匹林均使大鼠颈动脉栓塞程度明显减轻,明显对抗电刺激引发的血栓素升高和前列环素水平下降;20 mg/kg GBE和9 mg/kg阿司匹林均明显减轻应激状态全血粘度、血浆粘度和细胞压积指标的增高,6.7 mg/kg GBE仅能抑制细胞压积的增高.通过对比分析,9 mg/kg阿司匹林抑制血栓栓塞和血液流变学异常增高作用,强于6.7 mg/kg GBE组,与20 mg/kg GBE组基本相当.结论 相当人临床用量的GBE对大鼠血栓栓塞有抑制作用,明显弱于小剂量阿司匹林,可对抗血浆前列环素和血栓素的异常变化,对多种血液流变学指标异常增高的影响不明显;剂量提高3倍的GBE,对抗大鼠血栓栓塞和血液流变学异常增高作用,与小剂量阿司匹林基本相当.     

蝮蛇毒蛋白C激活物对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的干预作用

目的:在大鼠在体心肌缺血再灌注模型上进一步证实蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)对缺血再灌损伤心肌的保护作用。方法:麻醉大鼠,结扎左冠状动脉30 min后再灌注90min。结扎前10 min静脉注射PCA。观察PCA对大鼠心肌酶学、心肌梗死面积和脂质过氧化的影响。结果:PCA能有效缩小大鼠心肌梗死范围,降低血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;能显著提高大鼠心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低心肌和血清脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量。结论:蝮蛇毒蛋白C激活物对大鼠缺血再灌注损伤心肌有保护作用。     

蝮蛇蛇毒PCA对实验性心肌梗死大鼠血凝状态的影响

目的:探讨蝮蛇蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对心肌梗死发生后血液凝固性的影响及其机制。方法:SD大鼠24只,随机分为对照组、心肌梗死模型组和PCA实验组。动物麻醉后,从心尖部向左心室注射月桂酸钠(1.0mg/kg)复制心肌梗死(AMI)模型。实验组大鼠于造模前由舌下静脉注射PCA(1.0mg/kg)预处理,由Medlab生物信号采集系统监测心电变化。于造模后30min从颈总动脉取血样2ml,以TEG5000型血栓弹力仪测量各样本血液的凝血时间、血凝块形成时间、Alpha角度、凝血最大幅度和凝血指数等参数。结果:模型组大鼠血样的R值较对照组明显缩短(P<0.01),CI值>+3.0,而Alpha角度变化不大;LY30%值明显增大,但小于7.5%。PCA实验组大鼠血样的R值较模型组明显延长,MA值减小(P<0.05),LY30%、A值、CI值明显减少(P<0.01)。结论:心肌梗死大鼠血液表现显著高凝状态,蛇毒PCA组分的预处理可以减轻这一过程。     

蝮蛇毒蛋白C激活物对败血症大鼠心脏血流动力学的作用研究

目的:研究蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)组分对败血症大鼠心脏血流动力学的影响。方法:取SD雄性大鼠24只随机分成对照组、PCA组、LPS组和LPS+PCA组四组,对照组尾静脉注射生理盐水,PCA组尾静脉注射蝮蛇毒蛋白C激活物,LPS组腹腔注射LPS(10 mg/kg,4 h)的方法建立败血症休克的实验动物模型,在建立败血症的实验动物模型的基础上,尾静脉注射PCA(0.4 mg/kg)为LPS+PCA组,每只大鼠均于药后30 min时运用Medlab生物信号采集处理系统记录平均动脉压(MAP)和左心室功能指标,并测定心肌中乳酸脱氢酶(LDH)活性、诱导性一氧化氮合酶(i NOS)活性及心肌病理切片。结果:PCA能明显减轻LPS诱导的心功能受损,并抑制心肌LDH的释放和i NOS活性的升高(P<0.05)。结论:PCA对败血症大鼠心脏血流动力学有明显的改善作用,其机制可能与通过保护血管内皮功能,改善微循环,稳定心肌酶活性和膜相结构等途径有关。     

皖南蝮蛇毒PCA活化血浆蛋白C的特性研究

目的:研究皖南蝮蛇毒蛋白C激活物(protein C activator,PCA)活化血浆蛋白C(protein C,PC)的特性。方法:家兔待检血浆分别与不同浓度的PCA混合后,行PT及APTT测定;随后利用PC活性检测试剂盒,检测不同浓度PCA对PC活性的影响;最后将最适浓度PCA分为PCA组、PCA血浆组、PCA血浆加PC抗体组,并应用发色底物法配合酶标仪对各组活化PC的能力进行鉴定。结果:与正常血浆相比,低剂量PCA即可显著延长APTT(P<0.01),随着PCA浓度的增加PT也显著延长(P<0.01);经检测0.3 mg/ml浓度的PCA具有最适PC活化特性,与阳性对照Protac量效相当(P>0.05))。结论:皖南蝮蛇毒PCA具有与Protac效应相当的活化PC特性,提示蛇毒PCA具有一定的临床应用前景。     

蝮蛇毒蛋白C激活物对全脑缺血再灌注损伤大鼠血液粘度变化的影响

目的:探讨全脑缺血再灌注损伤后外周血液粘度的变化及蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)对其的影响。方法:SD大鼠30只随机分为对照组、全脑缺血再灌注损伤模型组和PCA预处理组。采用三动脉夹闭法复制大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,PCA预处理组按0.3mg/100g体重于造模前尾静脉注射PCA,模型组给予等量生理盐水。以锥板式粘度计检测分析各组大鼠全血高切粘度、中切粘度、低切粘度和血浆粘度;用温氏法检测分析各组大鼠红细胞比积(HCT);用干湿重法测脑组织含水量,并比较其差异。结果:全脑缺血再灌组大鼠的全血粘度、血浆粘度、HCT和脑组织含水量均明显高于对照组(P<0.01),PCA预处理组与模型组相比,血液粘度、HCT明显降低(P<0.01),脑组织含水量也有显著下降。结论:蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)降低全脑缺血再灌注损伤引起的血液粘度增加,改善血液流变学特性,减轻脑水肿,具有一定的抗脑缺血再灌注损伤作用。     

五步蛇和蝮蛇的抗蛇毒血清对烙铁头蛇毒的中和作用

针对我国院目前尚无烙铁头蛇毒血清，本研究旨在利用国内现有的精制抗五步蛇毒血清和精制抗蝮蛇毒血清，通过动物实验，证明这两种抗血清在体外和体内都能中和烙铁头蛇毒，对被烙铁头蛇毒中毒的小鼠有明显保护作用，且两种血清的保护率无显著差异。     

蝮蛇毒蛋白C激活物的纯化与抗血小板活性

目的　研究蝮蛇毒蛋白C激活物 (PCA)组分对兔血小板聚集性的影响。方法　借助DEAE Cellulose、SP SephadexC 5 0及SP SephadexG 75柱层析 ,以离子交换和凝胶过滤法从江浙蝮蛇 (AHV)粗毒中分离纯化PCA抗凝组分 ;SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)检测其纯度和分子量。比浊法测定血小板聚集率。结果　从AHV分离纯化的PCA抗凝组分经SDS PAGE电泳测定为单一区带 ,相对分子质量为 14 0 0 0左右 ,等电点 pH 4 .7;该PCA在体外对由诱聚剂ADP诱导的血小板聚集呈剂量依赖性的抑制作用 ,其IC50 为 12 5 μg/ml。PCA(1.0mg/kg) 体内给药可逆性抑制血小板聚集反应。结论　从蝮蛇毒中纯化的这种PCA抗凝组分可通过抑制血小板聚集而影响血凝过程。