D-半乳糖致衰老模型大鼠肝肾功能和自由基代谢与中药的干预作用

目的观察D-半乳糖致衰老模型大鼠血糖血脂、肝肾功能和自由基代谢的变化,探讨中药的干预作用及其抗衰老的机制。方法大鼠每日皮下注射D-半乳糖,连续造模7周,建立大鼠衰老模型,造模同时,用抗衰老片和首乌延寿片进行干预,测定试验大鼠的血糖血脂、肝肾功能和SOD、MDA、Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++-ATPase等自由基代谢指标。结果造模7周后,模型对照组衰老大鼠TG、BUN明显升高(P0.05,P0.01),AST、ALP、CREA呈上升趋势(P0.05),肝、肾组织SOD活性明显降低(P0.05),肾组织MDA含量明显升高(P0.05),肝组织Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++-ATPase活性均显著降低(P0.05,P0.01);给予抗衰老片和首乌延寿片后,衰老大鼠TG、AST、BUN、CREA和UA均显著降低(P0.05,P0.01),肝、肾组织MDA含量显著降低(P0.05),SOD活性显著升高(P0.05,P0.01),肝组织Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++-ATPase活性均显著升高(P0.01)。结论D-半乳糖致衰老大鼠模型的血脂上升、肝肾功能异常和抗脂质过氧化的能力下降;给予抗衰老片和首乌延寿片后,可有效改善衰老大鼠的糖脂代谢和肝肾功能,提高肝肾组织的抗脂质过氧化的能力,提示中药的抗衰老作用可能与其抗氧化作用有关。     

TGF-β/Smad与Wnt/β-catenin在博莱霉素致大鼠肺纤维化中的表达及相互作用

目的观察TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达,探讨两条通路对肺纤维化的影响及其相互作用。方法取Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,每组18只。采用气管内注入博来霉素(BLM)建立Wistar大鼠肺纤维化模型,每组分别于第14、21和28天处死大鼠各6只;取肺组织称重,测定肺组织中HYP、IL-1β水平,观察肺组织Col-I、IL-1β、TGF-β1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-catenin、LEF-1 mRNA的表达,并进行HE染色和Masson胶原染色。结果 (1)与正常对照组比,造模后14~28 d大鼠肺指数均明显升高(P0.01);肺组织HE染色呈现明显的肺纤维化病理改变,Masson染色结果可见造模后14~28 d肺间质蓝色胶原呈渐进性增加。(2)造模后第14天,肺组织IL-1β含量、IL-1βmRNA相对含量均显著升高(P0.01),随后逐渐降低,至造模后第28天IL-1β表达量接近正常水平(P0.05)。(3)造模后14~28d大鼠肺组织HYP含量、Col-I mRNA相对表达量均明显升高(P0.01)。(4)与正常组相比,模型组中TGFβ1、Smad3、α-SMA、Wnt1、β-Catenin、LEF-1 mRNA表达显著增加(P0.01),且TGFβ1、Smad3 mRNA分别与Wnt1、LEF-1、β-catenin mRNA的表达呈显著正相关。结论 TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路相关基因在博来霉素致大鼠肺纤维化中表达上调,两条通路对肺纤维化可能有促进作用且它们间可能存在一定联系。     

丹酚酸A对实验性肺纤维化大鼠的保护作用研究

目的观察丹酚酸A对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的保护作用及可能机制。方法气管单次给予博来霉素注射液复制大鼠肺纤维化模型,第2天开始给予丹酚酸A,连续28天,记录体重与一般体征变化;处死大鼠,测定血清自由基、肺功能及观察组织透射电镜等情况。结果造模后给予丹酚酸A可改善肺纤维化大鼠一般体征状况;提高血清SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量;改善肺功能;减轻肺泡炎症,缩小肺泡间隔宽度;电镜观察发现给予肺纤维化大鼠丹酚酸A后,胶原纤维生成减少,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生减弱。结论丹酚酸A对博来霉素诱导的实验性肺纤维化有一定的保护作用,其机制可能与丹酚酸A抗氧化作用有关。     

不同因素致亚健康大鼠血液生化、血气电解质指标的影响

目的观察不同因素致亚健康模型大鼠血液生化和血气电解质指标的变化。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即多因素(MF)组、热水游泳(WS)组、睡眠不足(SD)组、单纯束缚(PC)组和正常对照(C)组,每组12只。采用热水游泳、睡眠剥夺和单纯束缚等单因素或多因素联合建立亚健康大鼠模型,各组造模5d后,处死6只,剩余动物进行恢复性饲养3 d后处死。分别测定造模结束后和恢复3 d时大鼠的血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和血气电解质等指标。结果 (1)与正常对照(C)组比,造模5d后MF组的大鼠BUN和TG水平显著降低(P<0.05,P<0.01),同时CREA、AST、CK、CK/AST和LDH水平显著升高(P<0.01),WS组的大鼠TC、CK、CK/AST和LDH水平亦升高显著(P<0.01),且各模型组的大鼠GLU浓度明显增加(P<0.01);恢复3 d后,MF组的大鼠TC、AST、ALT、ALB、BUN、CK、CK/AST和LDH水平均明显高于C组(P<0.05,P<0.01);WS组的大鼠血清AST、CK、CK/AST比值和LDH水平亦显著高于C组(P<0.01),SD组的大鼠CK显著高于C组(P<0.05);(2)与C组比,造模5d后MF组、SD组和PC组的大鼠PCO2、Hct和Hb均明显升高(P<0.05,P<0.01),WS组Hct和Hb升高显著且Na+显著降低(P<0.01),MF组的大鼠PO2和SO2%均显著降低且K+明显升高(P<0.05),且各造模组的大鼠HCO3-♂的浓度均显著升高(P<0.05,P<0.01);恢复3 d后,除各造模大鼠的血液pH值和PO2均明显下降(P<0.05,P<0.01)外,MF组、SD组和PC组的大鼠PCO2升高并伴有SO2%的降低(P<0.05,P<0.01),MF组和WS组Na+仍明显低于C组(P<0.05,P<0.01),SD组的大鼠K+和Mg2+则明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。结论不同因素诱导的亚健康状态大鼠的血液生化、血气电解质指标均出现了不同程度上的改变,故血液生化和血气电解质指标能有效评估亚健康状态机体血液微环境的改变。     

亚健康状态大鼠的神经-免疫-内分泌机制的研究

目的探讨亚健康状态大鼠的神经-免疫-内分泌的机制。方法取雄性SPF级Wistar大鼠36只,按体重随机分成6组,即多因素组(MF)、多因素干预组(MFT)、热水游泳组(WS)、睡眠不足组(SD)、单纯束缚组(PC)和正常对照组(C),每组6只。分别采用热水游泳、饮食限制、睡眠剥夺、束缚等方式建立亚健康大鼠模型,多因素干预组每日经口给予300 mg/kg的抗衰老片,在造模5 d后处理动物,并取大鼠血,分别测定血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、甲状腺激素T3和T4、睾酮(T)、皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、白介素IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8和IFN-γ含量以及T淋巴细胞亚群的变化,并取脾脏测定T、B淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性变化。结果 (1)与正常对照组比,①造模结束后多因素组大鼠血清5-HT明显降低(P<0.05),而热水游泳组和单纯束缚组5-HT含量却升高显著(P<0.01),且睡眠不足组和单纯束缚组血清DA含量降低显著(P<0.05);同时各亚健康模型大鼠的血清T3、T4、CORT和ACTH含量均显著升高(P<0.01),T/C比值降低显著(P<0.01),且睡眠不足组血清T降低明显(P<0.05);②造模结束后多因素组的大鼠IL-8含量降低显著(P<0.01),而热水游泳组和单纯束缚组IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8和IFN-γ含量以及睡眠不足组IL-1β、IL-2、IL-6含量均显著升高(P<0.05,P<0.01),同时显著降低各亚健康模型大鼠淋巴细胞增殖转化能力和T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值和NK细胞活性(P<0.05,P<0.01)。(2)与多因素组比,抗衰老片干预后多因素干预组大鼠血清DA含量明显升高(P<0.05),并能显著提高机体T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+数目和CD4+/CD8+比值(P<0.01),降低血清CORT含量。结论亚健康状态能引起大鼠HPA轴反应性失衡,皮质醇释放过度,引起内分泌的紊乱,并能引起淋巴细胞功能降低,出现明显机体免疫抑制现象;而抗衰老片具有抗应激,提高T细胞免疫功能,改善情绪和内分泌紊乱的作用,从而达到改善亚健康体质的目的。     

抗衰老片对肾虚小鼠空间学习记忆和脑自由基代谢的影响

目的观察抗衰老片对肾虚小鼠空间学习记忆和脑自由基代谢的影响。方法选雄性KM小鼠54只,随机分为6组：正常对照组、肾虚组（劳倦过度＋房事不节组）、抗衰老片高、中、低剂量组和补肾方（金匮肾气丸）对照组。采用强迫小鼠游泳方法造成劳倦过度,以Colldege效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾虚小鼠模型,观察小鼠体重、水迷宫空间行为记忆能力和脑组织SOD活性和MDA含量变化。结果肾虚组小鼠体重、脑组织SOD活性较正常对照组明显下降俨〈0．05,P〈0．01）,小鼠水迷宫潜伏期和脑组织MDA含量明显升高（P〈0．01）;抗衰老片高、中、低剂量组及金匮肾气丸组小鼠体重和脑组织SOD活性较肾虚组明显升高伊〈0．05,P〈0．01）,小鼠水迷宫潜伏期和脑组织MDA含量较肾虚组明显降低（P〈0．05,P〈0．01）。结论抗衰老片可延缓脑组织的脂质过氧化,从而改善小鼠的记忆能力。     

丹酚酸A改善ZDF大鼠视网膜病变及其作用机制

目的观察丹酚酸A(SAA)对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠视网膜病变的干预作用,探讨SAA可能的作用机制。方法取7~8周龄雄性ZDF大鼠32只,Purina#5008饲料饲喂4周后,按血糖平均分为模型对照组,SAA高、低剂量组与二甲双胍(Met)组,每组8只。另取同龄雄性ZL大鼠8只作为正常对照。SAA低、高剂量组每日尾静脉注射SAA 0.5 mg/kg、1 mg/kg,Met组每日经口灌胃Met 200 mg/kg,连续给药12周,观察ZDF大鼠白内障发生率和视网膜病理学改变,并检测血糖血脂、糖化血红蛋白(Hb A1c)和血清白介素1(IL-1)、IL-6、氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)、丙二醛(MDA)含量和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的活性,以及尿液中转铁蛋白(TRF)、视黄醇结合蛋白(RBP)的含量。结果模型对照组大鼠血糖、血脂及Hb A1c均上升,糖尿病性白内障发病率68.75%,视网膜基底增厚和微血管病变,血清IL-1、IL-6、ox-LDL和MDA含量和Lp-PLA2活性显著升高,尿液中TRF和RBP含量亦显著升高。给予SAA后,ZDF大鼠白内障发病率降低,视网膜病理学形态有不同程度的改善,血清IL-1、IL-6、ox-LDL、MDA含量和Lp-PLA2活性下降,尿液中TRF、RBP含量亦下降。结论 SAA能改善ZDF大鼠糖尿病视网膜病变,降低白内障发生率,其作用途径可能与抑制慢性炎症、防止脂质过氧化和降低Lp-PLA2活性有关。     

五指山小型猪高脂血症模型的心脏自主神经功能变化

目的观察五指山小型猪高脂血症模型的心脏自主神经功能的动态变化,探讨血脂异常对自主神经功能的影响和与昼夜的关系。方法利用高脂饮食诱发五指山小型猪高脂血症,造模后,每2周一次测定小型猪TG、TC、HDL-C和LDL-C和监测动态心电图,并进行24 h和昼夜心率变异性(HRV)分析,以评估小型猪的心脏自主神经功能。结果高脂饮食2周后五指山小型猪血清TC、HDL-C、LDL-C水平均显著升高(P<0.01),TG水平亦在高脂饮食后6周显著升高(P<0.05),其中,TC、LDL-C在高脂饮食0~4周时呈快速上升,在4~6周达到高峰,8~10周基本稳定并维持在一定水平；HDL-C在高脂饮食0~2周迅速上升并达到高峰,2~10周基本稳定。HRV参数分析结果,时域指标(RRI、SDNN、RMSDD、SDANN、PNN50、SDANN index、STV、LTV)和频域指标(VLF、LF、HF和TP)均渐进性显著降低(P<0.05,P<0.01),LF/HF升高(P<0.05),夜间HRV参数变化程度均高于白天；相关分析显示HRV各参数与TC、LDL-C、TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C具有显著的相关性(P<0.05,P<0.01),经多元线性逐步回归分析发现,SDNN与TC、LDL-C、TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C比值的相关性依次为0.673、0.672、0.665、0.681。结论高脂饮食诱发五指山小型猪高脂血症的血脂异常可引起自主神经功能的下降和紊乱,自主神经功能的紊乱程度与高血脂状态的持续时间有关；血脂异常所致心血管疾病的危险程度夜间高于白天；HRV降低与TC、LDL-C、TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C比值升高呈一定的依赖性,SDNN降低可作为预测高脂血症引发心血管病风险的独立相关指标。     

心理应激致亚健康状态大鼠的血气、电解质代谢及中药的干预效应

[目的]观察心理应激致亚健康状态大鼠模型的血气状况、电解质代谢和酸碱平衡的变化,探讨中药的干预作用及其机制。[方法]取雄性SD随机分成4组,即正常对照组、模型对照组,抗衰老片组、补肾方（六味地黄丸）组,每组10只,采用限制活动模拟人类心理应激因素,建立大鼠亚健康状态模型,在造模同时,用抗衰老片、六味地黄丸等中药进行干预,测定亚健康状态大鼠的血气、电解质和血液酸碱度及肝、肾功能。[结果]亚健康状态大鼠血液pH值、PO_2、SO_2、PO_2/FI、血Ca~（＋＋）均明显降低和PCO_2、血K~＋明显升高,而血Na~＋、Mg~（＋＋）和肝肾功能指标无明显变化,给予抗衰老片和六味地黄丸后,均能显著升高pH值、PO_2、SO_2和降低PCO_2、PO_2/FI比值,血钾（K~＋）浓度有下降,而血钙（Ca~（＋＋））浓度升高。[结论]心理应激致亚健康状态大鼠的血气状况下降、电解质代谢和酸碱平衡发生紊乱,而抗衰老片、六味地黄丸等中药可有效改善亚健康状态大鼠的血气状况,纠正电解质代谢和酸碱平衡的紊乱。     

丹酚酸浸膏粉对气虚血瘀大鼠血管内皮的保护作用

[目的]观察丹酚酸浸膏粉对气虚血瘀大鼠自由基代谢、血管内皮细胞分泌功能及相关生化指标的影响。[方法]用高脂饮食和游泳劳损及游泳后不予保温措施和擦拭水迹等方法致大鼠气虚血瘀模型,同时连续4W给予200mg·kg^-1、100mg·kg^-1、50mg·kg^-1剂量的丹酚酸浸膏粉,观察对气虚血瘀大鼠自由基代谢、血管内皮细胞分泌功能、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）、cAMP/cGMP等有关生化指标的影响。[结果]高、中、低剂量的丹酚酸浸膏粉可显著改善气虚血瘀大鼠出现的精神萎靡、四肢蜷缩、活动性差、毛发无光泽、粪便稀溏、舌质绛紫暗淡、眼球暗红、尾部皮下瘀紫等症状。连续给药4W后,气虚血瘀大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性明显提高（P〈0.05,P〈0.01）,丙二醛（MDA）含量显著下降（P〈0.05,P〈0.01）,血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）水平明显提高（P〈0.05）,血浆内皮素（ET）的含量显著下降（P〈0.05,P〈0.01）,NO/ET比值明显升高（P〈0.05,P〈0.01）,与阳性对照组1（丹参片）和阳性对照组2（地奥心血康胶囊）比,高、中剂量丹酚酸浸膏粉组的作用强于或相当于阳性对照1和阳性对照2,但差异均不显著（P〉0.05）;血糖（GLU）和甘油三脂（TG）显著降低（P〈0.05）;血浆环磷酸腺苷（cAMP）含量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,血浆环磷酸鸟苷（cGMP）含量显著降低（P〈0.05）,cAMP/cGMP的比值明显提高（P〈0.05,P〈0.01）,与阳性对照组比较,高、中剂量丹酚酸浸膏粉组的作用强于或相当于阳性对照1和阳性对照2,但差异均不显著（P〉0.05）。[结论]丹酚酸浸膏粉能明显改善气虚血瘀大鼠的症状体征,提高气虚血瘀大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和一氧化氮合酶（NOS）水平,降低丙二醛（MDA）和血浆内皮素（ET）的含量,对血管内皮有保护作用,从而改善患者预