康艾注射液对晚期肝癌患者外周血CD4、CD4/CD8、 CD19、CD16/56表达的影响

原发性肝癌(primary carcinoma of liver)是我国最常见的恶性肿瘤之一,其起病隐匿,恶性程度高,患者发病时大多已属中晚期,失去手术及介入治疗机会,同时肝癌对化疗和放疗不敏感,且它们在抑制肿瘤细胞同时亦对患者的免疫功能有很大的影响。因此,姑息治疗是目前晚期肝癌主要治疗方案。研     

慢性乙型肝炎患者CD4/CCR5、CD4/CD30细胞亚群失衡研究

目的研究辅助性T细胞亚群（rIh）在慢性乙型肝炎（CHB）发病机制中的作用，寻找治疗CHB的新方法。方法用流式细胞仪对20例正常人（NC组）及20例CHB患者外周血单核细胞（PBMC）经植物血凝素（PHA）培养前后的Th1、Th2水平进行了检测，Th1、Th2细胞表面特异性标志分别为CD4／CCR5、CD4／CD30。结果培养前Th1在NC组与CHB组无明显差别（P〉0．05），CHB组Th2明显高于NC组，同时CHB组及NC组Th1均明显高于Th2（P〈0．05）；培养后，NC组的Th1较培养前明显减少（P〈0．05），而NC组的Th2、CHB组的Th1及Th2较培养前均明显增加（P〈0.05），而以CHB组的Th2增加更明显；培养后，CHB组Th1、Th2均高于NC组（P〈0．05），而CHB组及NC组的Th1与Th2之间则无明显差别（P〉0．05）；培养前CHB组明显低于NC组（P〈0．05），而培养后CHB组高于NC组（P〈0．05），2组培养后Th1／Th2均明显低于培养前（P〈0．05）。结论CHB患者体内Th细胞亚群的应答模式与正常人群存在一定的差异；Th1向Th2细胞的漂移与乙型肝炎的慢性化及反复肝损伤有一定的关系。     

韶关市老年HIV/AIDS人群首次CD4/CD8淋巴细胞计数分析

目的了解韶关市老年HIV/AIDS人群首次检测CD4/CD8淋巴细胞数量情况,获得其分布特征,为制定老年艾滋病防治策略提供科学依据。方法采集韶关市2008—2015年新发现的老年HIV/AIDS人群全血样本,用流式细胞仪进行CD4/CD8淋巴细胞检测,同时对感染人群的流行病学资料进行统计分析。结果本次纳入研究的共有HIV/AIDS 147例,其中男性患者95例,女性患者52例,年龄51~83岁,平均(68.51±17.58)岁,文化程度以初中及以下为主,占51.02%;本地户籍134例,占91.16%;感染途径以异性传播为主,占67.35%;其次为同性传播24例,占16.33%;CD4~+T淋巴细胞绝对值为3~1 254个/μL,平均(282.57±124.56)个/μL;不同性别、文化程度、地区范围、感染途径、性病史的CD4~+T淋巴细胞绝对值及CD4/CD8淋巴细胞比值差异无统计学意义(P0.05);不同年龄组之间的CD4~+T淋巴细胞绝对值及CD4/CD8淋巴细胞比值差异有统计学意义(t=6.354,P0.05)。结论韶关市老年人首次CD4~+T淋巴细胞检测结果普遍偏低,老年人艾滋病防治应加强早期监测和早期预防。     

CD10/CD19/TDT/CD45抗体组合检测急性B淋巴细胞白血病微小残留病的实验和临床研究

目的明确CD10/CD19/TDT/CD45抗体组合检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病的意义。方法建立急性白血病微小残留病(MRD)的细胞模型,随访急性B淋巴细胞白血病患者,评价该表现型在监测急性B淋巴细胞白血病微小残留病中的意义。结果将BALL-1细胞株和正常人骨髓细胞按不同比例混和以建立急性白血病微小残留病模型,流式细胞仪可检出10-5比例的阳性细胞。利用流式细胞仪检测急性B淋巴细胞白血病患者CD10/CD19/TDT/CD45,提示复发比骨髓细胞形态学确认复发早约120天。结论 CD10/CD19/TDT/CD45可作为急性B淋巴细胞白血病微小残留病检测,复发早于形态学确认的白血病复发。     

CD40/CD40L与缺血性脑卒中的关系

缺血性脑卒中是危害人类健康的主要疾病，其主要的危险因素是不稳定斑块的脱落。CD40和CD40受体(CD40L)是由白细胞分化的，在动脉粥样硬化患者中高表达，它们的相互作用导致动脉粥样硬化斑块的不稳定，从而诱发斑块脱落，导致缺血性脑卒中。因此，探讨CD40/CD40L在缺血性脑卒中的调控机制，了解缺血性脑卒中的病理生理，对阻止动脉粥样硬化的形成、预防缺血性脑卒中有重要意义。     

重组anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒的构建

目的:构建pLNCX/anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ的重组真核表达载体,转染PA 317细胞株,包装制备重组非复制型逆转录病毒.方法:采用DNA重组技术把pBULLET上的CD28-ζcDNA插入到已含anti-CD20 scFv/CD80的真核逆转录病毒载体pLNCX质粒上,转染PA 317细胞株,经G418筛选,收获上清液获非复制型逆转录病毒,将病毒感染NIH 3T3细胞株,用PCR、流式细胞术检测目的基因在NIH 3T3细胞中的表达情况,确定病毒滴度.结果:经酶切及测序鉴定均证实pLNCX/anti-CD20scFv/CD80/CD28/ζ的成功构建;采用PCR方法能够从逆转录病毒感染的NIH 3T3细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段;流式细胞术检测显示该目的基因能够在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白.结论:成功构建高滴度表达anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒,并能在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白.     

胃癌组织中CD95/CD95 L的表达

0 引言 胃癌中不仅存在细胞过度增殖,同时还存在细胞凋亡异常,CD95/CD95L参与了细胞凋亡异常的调节[1].我们检测胃癌组织中CD95/CD95L的表达.     

协同刺激分子CD28/B7及CD40/CD40L在哮喘特异性免疫治疗中的作用

目的探讨协同刺激分子CD28／B7—1、CD28／B7—2及CD40／CD40L在哮喘发病中的作用及在特异性免疫治疗前后表达水平的变化。方法选择30例哮喘患者为实验组，30例健康人群为对照组。采用流式细胞仪方法比较两组间T、B淋巴细胞表面CD28／B7—1、B7—2及CD40／CD40L的表达及与血清总IgE水平的相关性，以及哮喘患者特异性免疫治疗前后T、B淋巴细胞表面CD28／B7—1、B7—2及CEl40／CEl40L的表达水平。结果与健康人群相比，哮喘患者CD28、CD40L、B7—2及CD40表达水平均增高。血清总IgE水平与T淋巴细胞表达CD40L水平呈正相关。特异性免疫治疗6个月后，哮喘患者T、B淋巴细胞表达的CD28／B7—2及CD40／CD40L水平均有所下调，但均未达正常水平。结论协同刺激分子CD28／B7—2及CD40／CD40L表达水平的上调在哮喘发病中可能起重要作用，特异性免疫治疗能下调哮喘患者CD28／B7-2及CD40／CD40L的表达水平，并可能由此间接下调血清总IgE水平，起到相应的治疗作用。     

CD30/CD30L信号通路在免疫反应中的作用

CD30和CD30L是一对相互作用的细胞表面糖蛋白,分别是肿瘤坏死因子受体(TNFR)和肿瘤坏死因子(TNF)超家族的成员[1]。大量临床资料表明,在一些淋巴系统恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、病毒感染性疾病和移植排斥反应的患者体内,CD30 细胞增多和/或血清sCD30(一种由CD30 细胞释放的可溶性CD30)含量升高。通过检测血清的sCD30含量,可以预测这些疾病的发生风险,甚至可以判断其中某些疾病的严重程度。弄清CD30/CD30L信号通路在免疫反应中的作用对于理解和解释这些临床现象有重要意义,许多学者对此进行了广泛地研究。下面对…     

门静脉高压症患者外周血CD80/CD28的表达

目的检测门静脉高压症(portal hypertension,PHT)患者外周血淋巴细胞中CD80/CD28的表达情况,分析其与患者淋巴细胞亚群以及免疫功能的关系。方法采用流式细胞分析技术对30例门静脉高压症患者和30例正常人进行研究,对两组人群外周血CD80/CD28和淋巴细胞进行检测。结果流式细胞仪检测显示门静脉高压症患者外周血T细胞的CD80、CD28表达明显下降,PHT患者CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+细胞均低于正常对照,与正常人对照组相比差异均有显著性。结论 PHT患者外周血T细胞低表达CD80、CD28,不能有效激活其通路,导致免疫功能低下。     

肾移植受者外周血中共刺激分子CD28与CD40/CD154的表达研究

目的检测肾移植受者外周血中共刺激分子CD28与CD40/CD154表达的动态变化情况。方法对同种异体移植肾患者于术前1、术后1、3、7、14、21和28d分别取外周血,对AR受体,在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血。对白细胞进行免疫荧光双标记,用流式细胞仪检测各共刺激分子在外周血淋巴细胞中的表达。结果术后1、3d内CD28 、CD4 CD28 、CD8 CD28 细胞比率均有显著下降,但术后7d逐渐恢复至术前水平;AR时表达上升,其中CD28 和CD4 CD28 细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后下降至术前水平。AR时CD40 和CD154 细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后恢复至术前水平。结论外周血淋巴细胞CD28、CD40、CD154在移植后排斥反应时表达上调,提示外周血淋巴细胞共刺激分子的表达在临床肾移植急性排斥反应中起重要作用。     

CD200/CD200R在大鼠脓毒症急性肺损伤中的表达

目的研究脓毒症致大鼠急性肺损伤肺组织中CD200/CD200R的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术复制大鼠脓毒症急性肺损伤(ALI)模型,将36只大鼠随机分为急性肺损伤组和假手术组,每组设8、16、24 h 3个观察时间点,急性肺损伤组为A、B、C组,假手术组与之相对应的时间点分别为D、E、F组,各组大鼠在相应的时间点行动脉血气分析、检测IL-4、肺湿/干质量比测定、肺组织病理学观察,采用RT-PCR法检测肺组织CD200/CD200R mRNA表达、免疫印迹法检测肺组织CD200/CD200R的蛋白表达。结果①CD200/CD200R蛋白及mRNA表达情况:急性肺损伤A、B组较相应对照D、E组表达显著降低(P<0.05),而急性肺损伤C组与相应对照F组比较无显著差异(P>0.05);B组较A组表达显著上升(P<0.05),C组较B组表达显著上升(P<0.05),急性肺损伤组随着病情进展CD200/CD200R的蛋白及mRNA逐渐恢复至假手术对照组水平,各组间差异有统计学意义(P<0.05);②动脉血气分析:A组较相应对照D组无显著差异(P>0.05),B、C组较相应对照E、F组显著降低(P<0.05);急性肺损伤组随着病情进展动脉血氧分压逐渐降低;③IL-4检测:A组较相应对照D组无显著差异(P>0.05),B、C组较相应对照E、F组显著升高(P<0.05),急性肺损伤组随着病情进展IL-4浓度逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);④肺湿/干质量比:A组较相应对照D组无显著差异(P>0.05),B、C组较相应对照E、F组显著升高(P<0.05),急性肺损伤组随着病情进展肺湿/干质量比逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);肺组织病理变化:急性肺损伤组随病情进展,病理变化逐渐加重,假手术组病理学变化不明显。结论急性肺损伤组大鼠肺组织CD200/CD200R蛋白及mRNA早期表达降低,至24 h恢复至假手组水平,IL-4呈逐渐升高趋势,参与肺损伤炎症反应,提示CD200/CD200R参与脓毒症ALI。     

MACS方法分选CD133 /CD44 前列腺癌干细胞的初步鉴定

【摘要】 目的：通过磁珠细胞分选（Magnetic bead cell sorting, MACS）方法从人前列腺癌细胞系PC-3中分选CD133 /CD44 干细胞,为进一步功能性研究奠定基础。方法：运用流式细胞仪检测MACS分选前后PC-3细胞膜上CD133和CD44表达情况;观察无血清培养成球情况,免疫荧光表达情况;比较细胞在分选前后的形态学、增殖能力方面的差异;免疫组化和Western blot检测诱导分化前后PAP蛋白情况。结果：流式细胞术检测PC-3细胞CD133和CD44的阳性表达分别是(1.33?0.05)%和(0.87?0.06)%,而MACS分选后分别为(84.82?0.07)%和(99.91?0.03)%;免疫荧光检测CD133 /CD44 细胞培养后继续呈阳性表达;CD133 /CD44 细胞增殖能力高于PC-3细胞(t=11.0, P=0.008)以及高于诱导后的CD133 /CD44 细胞(t=40.1, P=0.001);CD133 /CD44 细胞经过TGF-β诱导后免疫组化和Western blot检测PAP表达呈阳性,而未诱导的CD133 /CD44 细胞表达呈阴性。结论：MACS从PC-3细胞株中分选的CD133 /CD44 细胞经过初步功能性鉴定具有干细胞的某些特性,可为前列腺癌干细胞的进一步探索充当铺垫。     

CD40/CD40L基因及其多态性与动脉粥样硬化的研究进展

CD40/CD40配体(CD40L)是一对互补的跨膜糖蛋白,表达于免疫细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、血小板等多种细胞上,参与免疫、炎症、高凝等多种病理生理状态的调控。大量研究表明:当发生动脉粥样硬化时,CD40与CD40L结合活化后进入细胞,激活包括核转录因子NF-κB在内的下游信号通道,上调促炎和促血栓形成基因的表达,在动脉粥样硬化的发生发展以及斑块破裂诸多环节中发挥重要作用。CD40/CD40L是沟通免疫、炎症、高凝状态三者间的桥梁,可能是防治心血管疾病的重要靶点。     

糖皮质激素对系统性红斑狼疮患者CD4+ CD25+ CD127dim/-T淋巴细胞GITR表达及凋亡的影响

目的:探讨糖皮质激素(glucocorticoids,GC)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者CD4+CD25+CD127dim/-T淋巴细胞(Treg)糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced tumor necrosisfactor receptor,GITR)的表达及Treg细胞凋亡的影响,并分析其临床价值。方法:分离28例SLE患者(SLEDAI评分<10分为13例,SLEDAI评分≥10分为15例)及12例正常对照者外周血CD4+CD25+CD127dim/-T细胞,分别加入地塞米松5×10-2mg/L后培养48 h,流式细胞仪检测培养前后的GITR表达和Treg细胞的凋亡率,并分析其与临床和实验室指标的相关性。结果:SLE患者Treg细胞上GITR表达和凋亡率均高于正常对照,差异有统计学意义(P=0.016;P=0.049)。加入地塞米松前后SLE患者Treg细胞上GITR表达差异无统计学意义(P>0.05);但正常对照组在加入地塞米松后Treg细胞GITR表达明显增加(P=0.034)。与未加入地塞米松相比,加入地塞米松后SLE患者Treg细胞凋亡率减少,差异有统计学意义(P=0.033);而正常对照组Treg细胞凋亡率增加,差异亦有统计学意义(P=0.012)。SLE患者Treg细胞GITR表达比例与SLEDAI评分成正相关,与补体C3成负相关。结论:GITR在SLE患者Treg细胞上呈病理性表达,其可能作为SLE疾病活动的免疫学指标之一;GC对SLE的治疗作用可能通过抑制Treg细胞的异常凋亡而并非抑制GITR的表达。     

联合放化疗对鼻咽癌患者CD4＋/CD25＋与CD28＋/TCR＋T淋巴细胞亚群的影响

目的：研究鼻咽癌患者联合放化疗前后CD4＋/CD25＋与CD28＋/TCR＋T淋巴细胞亚群的变化。方法：招募43例接受联合放化疗的鼻咽癌患者,在联合放化疗前、联合放化疗3周及6周后分别抽取外周静脉血,运用葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法分离并收集淋巴细胞,流式细胞仪检测CD4＋/CD25＋与CD28＋/TCR＋T淋巴细胞亚群的比例。结果：联合放化疗3周及6周后CD4＋/CD25＋淋巴亚群无明显变化（P〉0.05）,CD28＋/TCR＋淋巴亚群明显升高（P〈0.05）。结论：联合放化疗可部分恢复鼻咽癌患者受抑制的免疫功能。     

小儿体外循环对中性粒细胞CD11/CD18表达水平的影响

目的:观察小儿体外循环(CPB)对中性粒细胞CD 11/CD 18的表达水平,探讨CD 11/CD 18在小儿体外循环诱发的全身炎症反应中的作用。方法:30例房室水平左向右分流型先天性心脏病在CPB下行心内直视手术患儿(CPB组)和20例非CPB胸科或腹部手术患儿(对照组)被纳入本研究对象,于麻醉诱导后、体外循环转流后10~15 m in、体外循环转流结束、术后2 h和术后第1、2、3天取外周静脉血,采用流式细胞术检测外周血中性粒细胞CD 11/CD 18分子表达水平,酶联免疫法(EL ISA)定量测定血浆中IL-6、IL-8水平。结果:CPB组体外循环停机后血浆IL-6、IL-8水平开始升高并于术后2 h达峰值(P<0.05),随后开始下降,但仍高于诱导后水平(P<0.05);对照组血浆IL-6、IL-8水平于术后2 h达峰值(P<0.05),但其变化幅度小于CPB组相应时间点的值。CPB组外周血中性粒细胞CD 11b/CD 18表达水平于转流后10~15 m in明显升高(P<0.05)并达峰值,术后第1、2天低于基础水平(P<0.05),第3天与基础水平比无显著性差异(P>0.05)。对照组外周血中性粒细胞CD 11b/CD 18表达水平在各时间点间无显著性差异(P>0.05)。CPB组和对照组外周血中性粒细胞CD 11a/CD 18、CD 11c/CD 18表达水平于各时间点均无显著性差异(P>0.05)。结论:小儿体外循环可促发外周血中性粒细胞CD 11b/CD 18表达水平增高,而对CD 11a/CD 18和CD 11c/CD 18的表达水平无明显影响,CD 11b/CD 18在小儿体外循环诱发的全身炎症反应中可能发挥重要作用。     

CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞在系统性红斑狼疮活动期患者中的表达

目的 检测调节性T细胞(Treg)的新旧标志,进一步探讨Treg细胞在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用.方法 采用三色直接荧光素标记法和多参数流式细胞术检测29例SLE患者及24例正常对照组外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+ CD25highT细胞及CD4+ CD25+FOXP3+T细胞的比例,同时检测外周血抗dsDNA等抗体及免疫球蛋白、补体等水平并进行相关分析.结果 SLE患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05),CD4+ CD25+ FOXP3+T细胞[(2.1±1.2)%]及CD4+ CD25highT细胞[(0.8 ±0.4)%]与正常对照组[(1.8±0.8)%及(4.0±1.4)%]比较差异有统计学意义(P＜0.01);SLE组3种细胞占CD4+ CD25+T细胞的比例均明显低于正常对照组(均P＜0.01),CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+CD25+ FOXP3+T细胞及CD4+ CD25highT细胞分别占CD4+ CD25+T细胞的比例及与年龄、性别和病程,IgG、IgA、IgM、尿蛋白,24 h蛋白尿,抗dsDNA、抗Clq、抗核小体抗体水平均无相关性(均P＞0.05);但其与SLEDAI评分均存在负相关(P＜0.05).仅CD+ CD25+ GD127low/-T细胞/CD+ CD25+T细胞与补体C4存在明显的负相关(P＜0.01).结论 Treg细胞与活化的CD4+T细胞的相对比例可能在SLE的发病中起到重要作用.