银杏叶提取物GBE50对兔心肌组织bcl-2、bcl-xL基因表达的影响

目的探讨新型银杏叶提取物GBE50对兔心肌细胞抗凋亡基因bcl2、bclxL表达的影响。方法成年雄性新西兰大白兔随机分为GBE50组和对照组,GBE50组每日按体重100mg·kg-1口饲给予新型银杏叶提取物GBE50,对照组仅给予赋形剂2羧甲基纤维素钠,饲养4周后,处死动物,取左室心肌组织,采用RTPCR技术在凝胶电泳成像基础上半定量检测bcl2、bclxL基因的表达水平。结果GBE50组bcl2、bclxL基因的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论新型银杏叶提取物GBE50可促进兔心肌细胞抗凋亡基因bcl2、bclxL的表达。     

银杏叶提取物金纳多对心内直视手术期间心肌损伤标志物的影响

目的 探讨银杏叶提取物金纳多对心内直视手术期间心肌损伤标志物的影响。方法 40例先天性心脏病单纯房间隔缺损或室间隔缺损修补术患者,按随机数字表法随机分为银杏组和对照组,每组20例。两组均采用4℃St Thomas＇停搏液主动脉根部灌注,银杏组在此基础上加入银杏叶提取物金纳多（0．5mg／kg）;两组均于心脏完全停跳后开始心内手术。手术前、术后即刻、术后6、12、24、48h取中心静脉血,采用免疫比浊法测定血清C-反应蛋白（CRP）,采用ELISA法检测肌酸激酶同功酶（CK-MB）、肌钙蛋白T（cTnT）和肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）浓度的变化。结果术前两组间CRP、CK-MB、cTnT、cTnI浓度比较,差异无显著性（P〉0．05）,两组患者血清CRP、CK-MB、cTnT、cTnI浓度在术后即刻显著升高（P〈0．05）,对照组于术后12h达峰值,术后48h降至术前水平,同一时点比较,银杏组明显低于对照组（P〈0．05,P〈0．01）。结论 银杏叶提取物金纳多应用于心内直视手术中可显著降低心肌损伤标志物升高程度,促进术后心功能恢复,具有良好的心肌保护效果。     

银杏叶提取物对大鼠急性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（EGB）对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法采用结扎左冠状动脉前降支（LAD）30 min,再灌注2 h复制大鼠心肌缺血再灌注模型,分别以缺口末端标记法（TUNEL）及免疫组织化学法检测心肌凋亡细胞、心肌细胞Bcl-2、Bax基因的蛋白表达的变化。结果缺血再灌注（IR）组心肌细胞凋亡数量显著高于假手术组（P〈0.0 1）,EGB组心肌细胞凋亡明显受到抑制（P〈0.0 1）。IR组和EGB组Bax、Bcl-2、P5 3基因蛋白表达均明显增加（P〈0.01）;EGB明显促进Bcl-2基因表达,同时抑制Bax、P53基因表达（P〈0.01）,Bcl-2和Bax的比值也随之升高。结论 EGB可明显下调Bax和P53基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,从而显著抑制心肌缺血再灌注损伤（MIRI）后心肌细胞凋亡。     

黄芪甲甙保护阿霉素心肌损伤大鼠抗凋亡作用的机制研究

目的 探讨黄芪甲甙（简称黄芪）抗阿霉素所致心肌细胞凋亡的可能机制。方法 取SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄芪3个剂量（低、中、高）组。空白组腹腔注射生理盐水,余4组分别给予阿霉素造模（15mg／kg,隔日腹腔注射1次,共6次）。黄芪3个剂量组同时用不同剂量黄芪甲甙灌胃治疗,空白组和模型组同时给予羧甲基纤维素钠。采用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡。细胞免疫组织化学检测bcl-2、bax蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测bcl-2、bax基因的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡发生率增高（P〈0．01）,抑制凋亡因子bcl-2基因及蛋白表达下降（P〈0．01）,而促进凋亡因子bax基因及蛋白表达增强（P〈0．01）,bcl-2／baxmRNA比值降低（P〈0．05）。与模型组比较,黄芪高剂量组大鼠心肌细胞的凋亡率显著下降（P〈0．05）,bcl-2基因及蛋白水平表达增强（P〈0．05）,bax基因及蛋白水平表达下降（P〈0．05）,bcl-2／baxmRNA比值明显上升（P〈0．05）。结论 高剂量黄芪甲甙治疗可以抑制阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与凋亡基因bcl-2表达有关。     

Effects of electroacupuncture on bcl-2 and bcl-XL in the degenerative cervical intervertebral disc of rats

目的：观察电针天柱穴对大鼠颈椎间盘退变组织bcl-2、bcl—XL表达的影响。方法：将40只SD雄性大鼠，随机分为4组，即假手术组、电针组、西药组和模型组，每组10只。除假手术组外，其余3组造成动静力失衡性颈椎间盘退变模型。电针组给予电针天柱穴、大杼穴治疗；西药组用芬必得治疗；模型组造模后不作任何处理。治疗30d后，运用免疫组化法观察各组大鼠椎间盘组织bcl-2、bcl—xL的表达。结果：bcl-2在电针组、假手术组和西药组中表达明显高于模型组（P〈0．01），电针组、假手术组和西药组之间的表达无显著性差异。bcl-XL在电针组的表达低于假手术组（P〈0．01），高于西药组、模型组（P〈0．01）。结论：电针可以提高大鼠退变椎间盘组织bcl－2、bcl—XL的表达，是其延缓椎间盘组织凋亡，发挥治疗作用的可能途径之一。     

银杏叶提取物对心脏围手术期患者血管内皮生长因子的影响

目的 探讨银杏叶提取物(金纳多)心停跳液对围手术期血浆血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响及其临床意义。 方法 20例心脏手术患者采用数字表法随机均分为两组,对照组(10例)常规建立体外循环(CPB),阻断升主动脉后经主动脉根部顺灌4 ℃ St Thomas′停搏液(15 mL/kg);银杏叶组(10例)：在4 ℃ St Thomas′停搏液中加入金纳多（0.5 mg/kg）,余同对照组。麻醉诱导前后、主动脉插管后转机前、主动脉阻断0.5 h、主动脉开放0.5 h、术毕即刻、术后6 h、术后24 h分别取桡动脉血2 mL采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定VEGF浓度。 结果 对照组VEGF浓度在主动脉阻断0.5 h开始上升,术后6 h达到高峰(P<0.01);银杏叶组在主动脉阻断0.5 h时已达高峰(P<0.01),主动脉开放0.5 h时开始下降。 结论 金纳多可诱导VEGF生成,这可能是其心肌保护的机制之一。     

胡黄连提取物对大鼠脑缺血再灌注后半暗带区细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的:研究胡黄连提取物对脑缺血再灌注半暗带神经细胞凋亡及其相关基因表达的影响。方法:Wister大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和治疗组。利用流式细胞仪分别观察缺血1.5h再灌注用药5d后半暗带神经细胞凋亡及相关基因bcl-2蛋白表达。结果:与模型组比较,胡黄连组缺血半暗带凋亡细胞百分数明显降低(P<0.05),bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:胡黄连提取物可能通过促进bcl-2基因的表达,对脑缺血再灌注模型半暗带的细胞凋亡产生抑制作用。     

柴胡提取物对CVB3m感染小鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨柴胡提取物调节心肌细胞凋亡的作用机制。方法以柯萨奇病毒嗜心肌株（CVB3m）腹腔注射诱导BALB／c小鼠病毒性心肌炎模型,将实验小鼠分为正常对照组、模型组、柴胡提取物组,柴胡提取物组每天予0．2ml／10g的浓度为2mg／ml的柴胡提取物灌胃,正常对照组、模型组予以等量生理盐水灌胃,于造模后第10天处死,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,采用免疫组化、RT—PCR法检测各组小鼠心肌中Fas、Bcl-2、Caspase3表达。结果正常组小鼠心肌未检测到凋亡的心肌细胞,Fas、Bcl-2、Caspase3均有不同程度表达,模型组可见大量心肌细胞凋亡,且Fas、Bcl-2、Caspase3表达均强于对照组（P〈0．01）,柴胡提取物组心肌细胞凋亡明显减少,与模型组比较差异显著（P〈0．01）,Fas、Caspase3表达明显降低,Bcl-2表达轻度升高。结论柴胡提取物可以抑制病毒性心肌炎时心肌细胞凋亡,明显下调Fas及Caspase3表达,轻微上调Bcl-2表达。     

银杏叶提取物对缺氧复氧诱导心肌细胞损伤的影响

目的:通过培养SD大鼠乳鼠心室肌细胞建立缺氧/复氧(H/R)模型,观察银杏叶提取物(EGB)对心肌细胞缺氧/复氧所致心肌细胞损伤的影响,为心脏缺血/再灌注损伤的防治提供理论依据。方法:采用胶原酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞。分正常对照组、H/R组、H/R+银杏叶提取物组,用MTT法观察心肌细胞存活率、用Western blotting测定Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:与空白对照组相比,H/R组心肌细胞存活率显著降低,Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax表达水平上调;银杏叶提取物预处理后进行H/R较大程度地逆转了上述指标变化,与H/R组相比差异均有显著性(P<0.05)。结论:H/R可以诱导心肌细胞损伤;银杏叶提取物可以通过上调Bcl-2,下调Bax而减轻心肌细胞凋亡,对心肌细胞有保护作用。     

益气通络方对缺氧再给氧心肌细胞bcl-2基因表达影响的血清药理学研究

目的：观察益气通络方含药血清对缺氧再给氧心肌细胞bcl-2基因表达的作用。方法：采用流式细胞仪检测缺氧再给氧心肌细胞bcl-2基因表达强度。结果：1．缺氧24h、再给氧4h组心肌细胞bcl-2阳性表达比率增加,与正常对照组比较具有显著差异（P＜0．01）;2．益气通络方低、中、高剂量含药血清组bcl-2阳性表达比率较单纯缺氧再给氧组增加,组间比较呈显著差异（P＜0．01）。讨论：缺氧再给氧能诱导心肌细胞bcl-2基因表达,益气通络方含药血清可增强其表达,可能是益气通络方保护缺氧再给氧心肌细胞,发挥抗缺血再灌注损伤的重要机制之一。     

丹参诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2、bax基因表达研究

目的探讨丹参作用类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax基因mRNA水平的表达。方法关节液原代培养获取成纤维样滑膜细胞,分别用终浓度为0,0.195和0.39 g/L的丹参作用24 h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存,采用rt-PCR方法检测bcl-2和bax在mRNA水平的表达。结果以丹参浓度为0(bcl-2的相对表达量为0.55±0.27)作为溶剂对照组,bcl-2的表达在丹参浓度为0.195 g/L时(bcl-2的相对表达量为0.53±0.35)没有显著性差异(P=0.468),当丹参浓度达到0.39 g/L时,bcl-2的表达(相对表达量为0.25±0.17)显著性降低(P<0.05);bax的表达在2种丹参浓度条件下均无显著性差异(P均>0.05)。结论丹参可抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2的表达,从而通过降低bcl-2/bax的值促进成纤维样滑膜细胞凋亡。     

胃炎消对胃癌癌前病变bcl-2癌基因mRNA表达的影响

观察胃炎消对胃癌癌前病变(PLGC)的治疗作用及其对PLGC组织中bcl-2凋亡相关癌基因表达的影响。方法:采用随机双盲法,将40例PLGC患者分为治疗组(胃炎消治疗)25例和对照组(维酶素治疗)15例,治疗前、后胃黏膜活检标本采用原位分子杂交标记法作bcl-2癌基因mRNA转录水平的检测。结果:治疗组临床总有效率为84.00%,病理疗效以中度异型增生为好,作用优于对照药(P"0.05);治疗组患者治疗后bcl-2癌基因mRNA转录水平表达下调(P"0.05)。结论:胃炎消对PLGC有良好的治疗作用,其机制可能与下调PLGC组织中bcl-2癌基因mRNA转录水平的表达有关。     

生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜细胞Fas mRNA及bcl-2 mRNA的影响

目的探讨生化止血饮对药物流产(药流)后大鼠子宫蜕膜凋亡基因Fas mR-NA及凋亡抑制基因bcl-2 mRNA的影响及作用机制。方法建立正常对照组、模型组、益母草组、生化止血饮组,用原位杂交的方法检测凋亡基因Fas mRNA及凋亡抑制基因bcl-2mRNA的表达。结果生化止血饮可显著增加子宫蜕膜细胞凋亡基因Fasm RNA的表达,减低凋亡抑制基因bcl-2 mRNA的表达,与益母草组和模型组比较均有显著性差异(P均<0.05)。结论生化止血饮能通过增加蜕膜组织中凋亡基因Fas的表达和降低凋亡抑制基因bcl-2的表达而加速残留蜕膜从子宫壁剥脱来达到止血的目的。     

银杏叶提取物金纳多对低温体外循环脑损伤的保护作用

目的 探讨银杏叶提取物金纳多对低温体外循环脑损伤的保护作用。方法 择期行风湿性心脏病二尖瓣置换术患者60例,美国麻醉医师协会（American Society of Anesthesiologists,ASA）分级Ⅱ～Ⅲ级,静脉麻醉后,按随机数字表法随机分为两组。银杏组（30例）：开胸之前给予银杏叶提取物（金纳多）1mg／kg,静脉滴注,体外循环（CPB）开始前滴完;对照组（30例）：以等量生理盐水同速度静脉滴注。分别在CPB开始前（T1）、鼻咽温（降至30～31℃）稳定期（T2）、鼻咽温复温至36℃（T3）、CPB结束后30min（T4）、CPB结束后3h（T5）5个时点同步采集桡动脉和颈内静脉血,测定血气、乳酸浓度、血浆超氧化物歧化酶（SOD）活性及血浆丙二醛（MDA）含量,并计算动脉及颈内静脉血氧含量（Ca02,Civo,）、动一颈静脉血氧含量差（Ca-jvO2）、脑氧摄取率（ER0O）和动-颈内静脉血乳酸浓度差（ADVL）。结果 CPB开始后银杏组Ca-jvO2、ERO2降低的幅度明显大于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,乳酸浓度、ADVL、MDA含量升高的幅度明显低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,SOD活性明显高于对照组（P〈0．01）。结论 低温体外循环期间银杏叶提取物金纳多能改善脑氧供需平衡,提高SOD活性,抑制自由基生成,具有明显的脑保护作用。     

康泉方对大鼠前列腺组织凋亡调控基因bax、bcl-2mRNA表达的影响

目的 探讨康泉方对实验性大鼠前列腺组织凋亡调控基因bax mRNA、bcl-2 mRNA的影响.方法 采用大鼠去势后注射丙酸睾丸酮致前列腺增生法造模,同时灌胃给药30天后,处死大鼠取前列腺组织并测量湿重,RT-PCR法检测各组前列腺腹叶组织bax mRNA、bcl-2 mRNA的表达.结果 与模型组比较,康泉各剂量组前列腺湿重显著下降（P＜0.05或P＜0.01）;康泉高剂量组前列腺湿重与正常组比较,差异无显著性（P＞0.05）;与模型组比较,康泉各剂量组bax mRNA及bax/bcl-2显著升高（P＜0.01）,bcl-2 mRNA显著下降（P＜0.01）;康泉高剂量组bax mRNA、bcl-2 mRNA及bax/bcl-2与正常组比较,差异无显著性（P＞0.05）.结论 康泉方对大鼠良性前列腺增生有明显的治疗作用,其作用机理可能通过调节前列腺组织bax mRNA、bcl-2 mRNA表达,促进前列腺细胞凋亡,并呈明显量效关系.     

丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠肥厚心肌血管紧张素受体的影响

目的 通过研究丹参酮ⅡA（丹参酮）对腹主动脉缩窄的高血压大鼠肥厚心肌血管紧张素Ⅱ受体（ATR）基因表达及细胞内游离钙离子浓度（〔Ca2+〕i）的影响,探讨其抑制高血压左心室肥厚的分子生物学机制。 方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,术后4周将手术大鼠随机分为手术对照组、丹参酮低剂量组〔10 mg/(kg·d)腹腔注射〕、丹参酮高剂量组〔20 mg/(kg·d)腹腔注射〕及缬沙坦组〔10 mg/(kg·d)灌胃〕,另有8只SD大鼠作为假手术组。用药8周后检测各组尾动脉压,取左心室组织检测左心室质量指数（LVMI）、病理切片HE染色测量心肌纤维直径（MFD）;采用逆转录－聚合酶链式反应（RT-PCR）、免疫印迹法（Western blot）分别检测AT1R、AT2R的mRNA和蛋白的表达水平。利用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内〔Ca²⁺〕i的变化。 结果 （1）低、高剂量的丹参酮均对升高的血压无影响,仍显著高于假手术组和缬沙坦组（P<0.01,P<0.05）。（2）丹参酮低、高剂量组和缬沙坦组的LVMI、MFD高于假手术组（P<0.05）,显著低于手术对照组（P<0.01）。(3)低、高剂量的丹参酮和缬沙坦均下调手术大鼠心肌的AT1R mRNA和蛋白的表达（P<0.05）;丹参酮低、高剂量对AT1R的影响不及缬沙坦（P<0.05）。(4)缬沙坦组的AT2R mRNA和蛋白表达水平较其他各组升高（P<005）,其他各组之间差异无统计学意义（P>0.05）。(5)丹参酮低、高剂量与缬沙坦均可使肥厚心肌的〔Ca ^2+_)i显著降低,高剂量丹参酮对〔Ca ²⁺ 〕i 的影响明显超过缬沙坦组（P<0.05）。 结论 丹参酮ⅡA对心肌肥厚的抑制作用是非血压依赖性的,其对高血压心肌肥厚的抑制作用可能与抑制心肌细胞AT1R的mRNA、蛋白表达、阻止心肌细胞的钙离子内流有关;AT2R有可能参与了缬沙坦降低血压、逆转心肌肥厚的作用。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠疗效及滑膜fas、fasL及bcl-2表达的影响

目的：观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠疗效及对病变滑膜fas,fasL,bcl-2表达的影响。方法：采用弗氏完全佐剂造模，设立正常组，模型组，甲氨喋呤（MTX）组，雷公藤（TPT）组和新风胶囊（XFC）组；记录各组大鼠的关节炎指数及体重变化；检测fas,fasL,bcl-2在局部关节滑膜组织中的表达。结果：与治疗前比较，XFC组，TPT组及MTX组治疗前后大鼠的关节炎指数显著降低（P＜0．01，P＜0．05）。XFC组给药前后体重增加值与正常组比较，差异无显著性（P＞0．05）；TPT组及MTX组给药前后体重增加值显著低于正常组和XFC组（P＜0．01）。与模型组比较，XFC组fasL表达显著增加（P＜0．05）；XFC组上述数据与MTX组，TPT组比较差异无显著性（P＞0．05）。结论：XFC与MTX，TPT一样能降低佐剂性关节炎模型大鼠的关节炎指数，XFC在增加模型大鼠的体重方面优于MTX和TPT；XFC可能通过促进fasL的表达，抑bcl-2的表达，促进增生滑膜细胞的凋亡，达到抑制滑膜增生的目的。     

灵杞黄斑颗粒对光损伤大鼠视网膜c-fos、caspase-3及bcl-xL表达的影响

目的：研究灵杞黄斑颗粒对大鼠光损伤模型视网膜细胞凋亡相关基因c-fos、caspase-3及bcl-xL表达的影响。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、光损伤给水组、光损伤给药组。采用白色荧光灯持续照射5h建立光损伤模型,于光照2·5h、5h及光照后1d及3d,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫蛋白印迹（western blot）分析视网膜c-fos、caspase-3及bcl-xL的转录表达。结果：c-fos、caspase-3mRNA和蛋白表达下调,bcl-xL mRNA和蛋白表达上调。结论：灵杞黄斑颗粒可调控光损伤大鼠视网膜细胞凋亡相关基因的表达。     

芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4表达的影响

目的:通过观察芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠心肌、下丘脑瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)和瞬时感受器电位香草酸受体4(TRPV4)表达的影响,探讨芍药甘草汤及其拆方抗高温的机制。方法:SPF级SD雄性大鼠75只,适应饲养1周后,按体质量随机分为5组,分别为常温正常组,高温正常组,芍药甘草汤组(2. 16 g·kg~(-1)),单味白芍组(1. 08 g·kg~(-1))和单味甘草组(1. 08 g·kg~(-1)),除常温正常组外,均饲养于人工气候箱,各给药组按相应剂量连续给药13 d,常温正常组和高温正常组均给予同体积的纯净水;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)测定各组心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4蛋白和m RNA的表达情况。结果:与常温正常组比较,高温正常组大鼠心肌TRPV3蛋白表达显著上升(P 0. 01);心肌TRPV4 m RNA表达明显下降(P 0. 05);下丘脑TRPV3蛋白表达显著上升(P 0. 01);下丘脑TRPV3 m RNA表达明显下降(P 0. 05)。与高温正常组比较,单味白芍组大鼠心肌TRPV3,TRPV4蛋白表达显著下降(P 0. 01);芍药甘草汤组与单味甘草组大鼠心肌TRPV4蛋白表达明显下降(P 0. 05);单味白芍组大鼠心肌TRPV4m RNA表达明显上升(P 0. 05)。结论:大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4通道在高温环境下被激活,芍药甘草汤及其拆方抗高温机制与调节大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4通道蛋白及m RNA表达有关。