人参总皂甙增加白血病细胞对化疗药物的敏感性

目的：探讨人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）化疗药物敏感性的作用。方法：采用白血病祖细胞集落形成（ＣＦＵ－ＡＭＬ）药敏试验法。选用４种化疗药物：高三尖杉酯碱（ＨＨｒ）、阿糖胞苷（Ａｒａ）、阿霉素（Ａｄｒ）和足叶乙甙（Ｖｐ－１６）。结果：ＴＳＰＧ刺激ＣＦＵ－ＡＭＬ在体外增殖，集落数提高３７．９８％，使化疗药物对ＣＦＵ－ＡＭＬ的抑制率从原先的３０．４％￣４７．４％分别提高到５１．２％￣     

清解灵诱生的内源性集落刺激因子对增强宿主防御功能的 …

目的：为探讨清解灵（ＱＪＬ）诱生的内源性集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）对增强宿主防御功能的作用。方法：给正常小鼠注射清解灵，获取血清，用ＥＬＩＳＡ、骨髓细胞增殖及集落生成试验证明该血清含有Ｇ－ＣＳＦ活性后，将该血清动转输给８只正常ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，４８ｈ后用大肠杆菌攻击该鼠，次日样鼠，测脾悬液中大肠菌数。对照组（８只）以正常小鼠血清取你实验组用的血清，而后同法处理。结果：经清解灵注射的小鼠血清与抗Ｇ－     

人参皂甙对CD34+造血干/祖细胞的增殖和分化作用

目的：探索人参皂甙（ＧＳ）对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：采用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＾＋细胞，在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的ＧＳ，检测对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞增殖，形成祖细胞集落的提高率，并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果：ＧＳ（５～５０μｇ／ｍｌ）能提高ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ集落     

灵芝水提取物对人免疫细胞及IL-6的调节作用

目的：观察灵芝水提取物对人免疫细胞及细胞因子的调节作用。方法：灵芝水提取物（ＧＬ－Ｗ）作用于人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）,用ＭＴＴ法及流式细胞仪技术检测。结果：１．ＧＬ－Ｗ以经植物凝集素（ＰＨＡ）活化的和未经ＰＨＡ活化的人ＰＢＬ均有促增殖效应,其中经ＰＨＡ活化的增殖反应显著（Ｐ〈０．０５）,细胞周期检测发现其主要促进细胞进入Ｓ期,表明ＧＬ－Ｗ可促进人ＰＢＬ的ＤＮＡ合成。２．选择最大促进增殖效诮浓度的     

富硒绿茶对人肝癌细胞株Bel—7402的诱导分化作用

目的：观察富硒绿茶对人肝细胞株Ｂｃｌ－７４０２诱导分化的影响。方法：方法１采用给家兔灌服富硒绿茶７ｄ后，取其血清加至细胞培养基中进行实验，即血清药理学方法；方法Ⅱ采用直接加富硒绿茶提取液至细胞培养基中进行实验。应用细胞生物学方法对处理后的Ｂｅｌ－７４０２细胞进行生长曲线，克隆形成，ＡＦＰ和ＡＬＢ的合成和分泌，ｒ－ＧＴ活力的测定及细胞形态的观察，结果：富硒绿茶及其血清能够抑制细胞生长及克隆形成，减少     

茶树（Camellia Sisensis O． Ktze）叶片培养的器官发生

以叶片为外植体，采用ＭＳ基本培养基，附加１～５ｍｇ／Ｌ的６－苄基嘌呤（６－ＢＡ）、２ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）、３ｍｇ／Ｌ赤霉素（ＧＡ３），０．２～０．３％活性炭诱导愈伤组织。并用ＭＳ或ＥＲ为基本培养基，附加０．５～５ｍｇ／Ｌ６－苄基嘌呤（６－ＢＡ），０．５ｍｇ／Ｌ吲哚丁酸（ＩＢＡ）诱导胚状体和器官，进一步形成小植株。采取ＭＳ加５～８ｍｇ／Ｌ细胞分裂素和０．５～１ｍｇ／Ｌ的细胞生长素，每天光照１０小时便形成“丛生叶”，植株矮小；若上列激素的配比接近时，每天光照１２～１４ｈ，即打破丛生叶形态，节间抽长形成正常的互生叶小植株。     

LAG—IgG与TB—DNA联合检测诊断结核性胸腹积液

目的：ＬＡＭ－ＩｇＧ及ＰＣＲ法在结核性胸腹水中诊断应用价值。方法：应用快速酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测胸腹水中ＬＡＭ－ＩｇＧ。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测胸腹水中结核菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）。结果：９３例结核性胸腹水中ＬＡＭ－ＩｇＧ检测阳性率为６４．５％,特异性９０．５％,ＴＢ－ＤＮＡ阴性率５４．８％;特异性８１．０％;ＬＡＭ－ＩｇＧ与ＴＢ－ＤＮＡ联合检测其敏感性可达７８．５％,特异性为７８．６％。结论：通过检测胸腹水中ＬＡＭ－ＩｇＧ对结核性胸腹腔积液有较高的诊断价值。若与ＴＢ－ＤＮＡ联合检测可进一步提高敏感性。     

猪苓多糖、香菇多糖和分枝杆菌多糖对淋巴因子活化杀伤细胞活性增强作用的研究

本实验对猪苓多糖（ＰＰＳ）、香菇多糖（ＬＥＮ）和分枝杆菌多糖（ＭＰＳ）在体外对淋巴因子活化杀伤（ＬＡＫ）细胞活性的影响进行了研究，将三种不同浓度的多糖与不同浓度的重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）一起共同培养健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭｃ），９６小时后以氚－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法细胞毒试验检测ＬＡＫ细胞对不同靶细胞（包括ＮＫ敏感和ＮＫ抵抗）的体外杀伤活性。结果发现：三种多糖在一定浓度范围内与ｒＩＬ－２合用能增加ＬＡＫ细胞活性４２％～５６．９％，降低ｒＩＬ－２用量５０％（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结果提示：三种多糖均可作为细胞活性上向调节剂（ＬＵＲＡ）用于ＬＡＫ细胞疗法。     

植物激素对丹参悬浮培养细胞生长和酚酸类化合物含量的影响

本文报道了２,４－Ｄ、ＢＡ和ＧＡ３对丹参悬浮培养细胞生长和酚酸类化合物含量的影响。在继代培养基（ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ）中,培养第１２天细胞生长和迷迭香酸含量达到最大值,而紫草酸Ｂ的含量在培养的第１６天达到最大值,证实产物的形成属于生长依赖型。在相同浓度（１ｍｇ／Ｌ）,２,４－Ｄ促进细胞生长和抑制紫草酸Ｂ的形成,对迷迭香酸作用不明显;ＧＡ３抑制细胞生长和促进二种化合物的形成     

大蒜素对血管平滑肌细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的：观察大蒜素对培养的兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖细胞核抗原（ＰＣ－ＮＡ）表达的影响。方法：用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＳＭＣ的ＰＣＮＡ表达，同时测定培养液中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、前列环素（ＰＧＩ２）及环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）的含量。结果：大蒜素能增加ＳＯＤ活性，降低ＬＰＯ，升高ＰＧＩ２和ｃＡＭＰ水平，抑制ＳＭＣ的ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０５－０．０１）。结论：大蒜素有抑     

热毒清对HL-60细胞产生分泌型肿瘤坏死因子α及肿瘤坏死因子α转换酶mRNA表达的影响

目的：探讨纯中药制剂热毒清抑制肿瘤因坏死因子α（TNFα）失控释放的分子机制。方法：采用细胞和分子生物学技术观察热毒清对HL－60细胞分泌炎性细胞因子－分泌型肿瘤坏死因子α（sTNFα）及肿瘤坏死因子α转移酶（TACE）mRNA表达的影响。结果：（1）1：30稀释的热毒清能有效地控制内毒素脂多糖（LPS）刺激所引起的sTNFα的高分泌。（2）热毒清单独作用HL－60细胞时，对TACEmRNA的表达虽无明显的抑制作用，但对LPS刺激增加表达的TACEmRNA具有明显的抑制效果。结论：热毒清对LPS引起的炎性细胞因子sTNFα的分泌及时sTNFα激活的关键酶－TACE的基因表达具有双重抑制作用，提示热毒清可能是一种TACE良好的天然抑制剂。     

大黄素对HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨大黄素对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响。方法:应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响;应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡;蛋白印迹法(Western-Blot)检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:在5～20mg/L浓度范围内,大黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用呈时间剂量依赖性20mg/L作用72h后,抑制率分别达到(19.8±2.7)%,(58.8±4.4)%和(73.8±5.7)%;流式细胞术检测发现:大黄素5、10和20mg/L作用24h后,细胞凋亡率分别为(15.5±3.4)%、(56.0±3.4)%和(71.1±5.0)%,与对照组(1.01±0.06)%有显著性差异(P<0.05);DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯形条带。大黄素作用24h后,Bcl-2蛋白的表达水平随药物波度增加呈逐渐下降趋势。结论:大黄素能够抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。Bcl-2基因可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的过程。     

青藤碱对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的:研究青藤碱对人肝癌HepG2细胞增殖的影响及其机制。方法:以不同浓度青藤碱处理体外培养的A549细胞,采用MTT法检测24h、48h、72h后HepG2细胞的增殖状态;流式细胞仪测定青藤碱处理过的细胞凋亡、细胞周期分布及凋亡率,相对定量RT-PCR测定Cox-2mRNA的表达、Western blot检测细胞凋亡相关基因Cox-2的表达。结果:青藤碱能显著抑制人肝癌HepG2细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性。青藤碱处理组细胞早期凋亡率较对照组升高,呈时间剂量依赖性。相对RT-PCR结果显示其能下调HepG2细胞Cox-2mRNA的表达。Western blot检测Cox-2蛋白表达明显抑制。结论:青藤碱在体外能有效抑制肝癌细胞增殖。     

甘草次酸对白血病细胞侵袭力及明胶酶活性的影响

目的 研究甘草次酸（glycyrrhetinic acid，GA）对白血病细胞侵袭能力及明胶酶表达的影响。 方法 对体外培养的白血病细胞系K562、HL-60，用MTT法检测不同浓度GA对细胞增殖的影响；采用Transwell小室基质胶侵袭实验观察GA对K562、HL-60细胞株侵袭能力的影响；明胶酶谱法检测GA对细胞明胶酶活性的影响。 结果 GA对K562、HL-60细胞有明显的增殖抑制作用；能够以浓度依赖性的方式抑制K562、HL-60细胞的侵袭能力；GA能够显著下调K562、HL-60细胞明胶酶的A、B活性。 结论 GA能够抑制白血病细胞K562、HL-60明胶酶活性，从而抑制K562、HL 60细胞的侵袭能力，为白血病细胞髓外浸润的预防提供实验依据。     

双氢青蒿素抑制人胰腺癌细胞SW-1990的实验研究

目的:研究双氢青蒿素对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测不同浓度双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖的影响;流式细胞术Annexin V-FITC和PI双标染色法检测不同浓度DHA对其凋亡的影响;并且用激光共聚焦显微镜观察在Hoechst 33342/PI荧光双染色下胰腺癌细胞SW-1990形态学变化;RT-PCR检测DHA对胰腺癌细胞SW-1990中端粒酶催化亚单位hTERT mRNA表达的影响。结果:DHA在体外可以明显的抑制SW-1990的增殖,并且具有浓度-时间依赖性;DHA在体外能明显诱导SW-1990细胞的凋亡;DHA可以抑制胰腺癌细胞SW-1990中hTERT mRNA的表达,并且与浓度呈正相关。结论:DHA在体外抑制胰人腺癌细胞SW-1990的增殖、诱导其凋亡,其作用机制可能是抑制了肿瘤细胞中端粒酶催化亚单位hTERT mRNA的表达。     

贵州产天冬总皂苷提取物对人早幼粒白血病细胞株HL-60的影响

目的： 提取贵州产天冬中总皂苷（ASP）并研究其对人早幼粒白血病细胞株HL-60增殖和凋亡作用。 方法： 选取贵州产天冬为研究对象,提取其总皂苷成分;以不同浓度梯度的天冬总皂苷提取物作用于人早幼粒白血病细胞株HL-60,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;应用实时定量（Real-time） PCR检测各组HL-60细胞中B细胞淋巴瘤/白血病2（Bcl-2） mRNA的表达。 结果： 随着天冬总皂苷浓度的升高,其对HL-60细胞增殖的抑制作用明显增强,呈现剂量依赖趋势;与对照组相比,天冬总皂苷组使HL-60细胞凋亡率明显增加;并且能够使HL-60细胞内的Bcl-2 mRNA表达下降。 结论： 贵州产天冬总皂苷提取物下调Bcl-2 mRNA的表达、诱导人早幼粒白血病细胞株HL-60凋亡,可能是其治疗白血病的机制之一。     

Effect of Perilla frutescens on nitric oxide production and DNA synthesis in cultured murine vascular smooth muscle cells

The effects of perilla (Perilla frutescens, Labiatae) on murine cultured vascular smooth muscle cells (VSMC) were investigated. The water extract of perilla leaves induced nitric oxide (NO) production of VSMC and this effect was synergistically augmented when combined with interferon (IFN)-gamma or tumour necrosis factor (TNF)-alpha, while the perilla extract significantly inhibited NO production induced by IFN-gamma combined with lipopolysaccharide (LPS). Northern blot analysis revealed that these effects of the perilla extract paralleled mRNA expression of inducible nitric oxide synthase. However, the perilla extract significantly inhibited platelet derived growth factor (PDGF) or TNF-alpha-induced VSMC proliferation measured as DNA synthesis. The inhibitory effect of the perilla extract on TNF-alpha-induced VSMC proliferation was significantly suppressed by N(G)-monomethyl-L-arginine, a non-specific nitric synthase inhibitor, suggesting that this effect was partially mediated by NO production as an autocrine/paracrine factor. The present findings suggest that perilla would be useful for the prevention of vascular diseases such as arteriosclerosis.     

冬凌草甲素对HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的:探讨冬凌草甲素对白血病HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制.方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL-60细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAP-PCR-ELISA及FCM法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及P53蛋白表达水平的变化.结果:8 umol/L以上的冬凌草甲素对HL-60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,并呈现出明显的量-效与时-效关系.药物作用48小时后细胞的凋亡率达高峰,在Hoechst染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的凋亡改变.在细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降,同时P53蛋白的表达水平显著升高.结论:冬凌草甲素对HL-60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,升高P53蛋白的表达水平及降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一;这为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗急性白血病提供了有力的试验依据.     

四藤方对Bel-7402细胞增殖和凋亡作用研究

目的:观察清热解毒中药-四藤方对肝癌细胞Bel-7402增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度四藤方处理人肝癌细胞Bel-7402、人肝细胞HL-7702,WST-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡形态变化,Western Blot法检测半胱天冬酶-3(caspase-3)活化。结果:与对照组比较,四藤方对人肝细胞HL-7702增殖无明显影响;100～400μg.mL-1四藤方作用24 h可显著抑制肝癌Bel-7402细胞增殖,促使细胞Bel-7402凋亡,呈现细胞凋亡形态,并可活化Bel-7402细胞caspase-3。结论:四藤方可以抑制Bel-7402细胞增殖,促Bel-7402细胞凋亡,并可能与活化caspase-3相关。     

柴胡皂苷-d对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响

目的探讨柴胡皂苷-d（saikosaponin—d,SSd）对脂多糖（1ipopolysaccharides,LPS）作用后肾小球系膜细胞（mesangialcell,MC）增殖及细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的异常增生的影响,为肾小球硬化的防治提供实验依据。方法体外培养、鉴定大鼠肾小球MC。利用MTT、LDH释放实验、流式细胞技术观察SSd对LPS刺激后MC增殖的作用,ELISA法检测细胞外基质Ⅳ型胶原（type1Vcollagen,ColⅣ）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）及转化生长因子（transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1）。细胞免疫化学法检测细胞素依赖性蛋白激酶4（cyclin—dependentkinase4,CDK4）、c—Jun、c—Fos。结果SSd对MC增殖有抑制作用,可使Go／G1期细胞增多,并诱导细胞凋亡;SSd可抑制MC分泌ColⅣ、FN、TGF-β1,并抑制了CDK4、c-Jun、C—Fos的表达。结论SSd对肾小球硬化（glomerulosclerosis,GS）的抑制作用是通过抑制CDK4、c—Jun、c-Fos的表达实现的。