复方补脾肾中药对环磷酰胺所致的造血抑制小鼠骨髓有核细胞、CFU-GM、CFU-F生成的影响

观察复方补脾肾中药补肾阴方和补肾阳方对造血抑制小鼠骨髓造血的影响。方法：以环磷酰胺（Ｃｙ）１２０ｍｇ／ｋｇ给昆明种小鼠连续腹腔注射３ｄ，造成骨髓抑制模型。以补肾阴方和补肾阳方连续灌胃１０ｄ。以骨髓有核细胞计数法计数骨髓有核细胞，以骨髓造血祖细胞培养方法培养粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）和成纤维祖细胞（ＣＦＵ－Ｆ）。结果：两方均能提高骨髓有核细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ集落形成率，补肾阳方优于补肾阴方。     

复方补脾肾中药对环磷酰胺所致的造血抑制小鼠骨髓有核细胞,CF …

观察复方补脾肾中药补肾阴方和补肾阳方对造血抑制小鼠骨髓造血的影响。方法：以环磷酰胺１２０ｍｇ／ｋｇ给昆明种小鼠连续腹腔注射３ｄ，造成骨髓抑制模型，以补肾阴方和肾阳方连续灌胃１０ｄ，以骨髓有核计数法骨髓有核细胞，以骨髓造祖细胞培养方法培养粒－单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）和成纤维祖细胞（ＣＦＵ－Ｆ）。结果：两方均能提高骨髓有核细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ集落形成率、补肾阳方优于补肾阴方。     

地黄多糖对正常小鼠造血干细胞、祖细胞及外周血像的影响

本文采用实验血液学研究造血系统功能的常规方法，研究了地黄多糖对小鼠骨髓造血干细胞、造血祖细胞及外周血像的作用。结果表明，地黄多糖２０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×６ｄｉｐ可促进正常小鼠骨髓造血干细胞（ＣＦＵ－Ｓ）的增殖，１０～４０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×６ｄｉｐ可明显促进粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＣＭ）和早期、晚期红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ）的增殖分化，并在外周血像中有一定的反映。提示地黄多糖在一定剂量下可刺激小鼠的造血功能     

人参总皂甙增加白血病细胞对化疗药物的敏感性

目的：探讨人参总皂甙（ＴＳＰＧ）对急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）化疗药物敏感性的作用。方法：采用白血病祖细胞集落形成（ＣＦＵ－ＡＭＬ）药敏试验法。选用４种化疗药物：高三尖杉酯碱（ＨＨｒ）、阿糖胞苷（Ａｒａ）、阿霉素（Ａｄｒ）和足叶乙甙（Ｖｐ－１６）。结果：ＴＳＰＧ刺激ＣＦＵ－ＡＭＬ在体外增殖，集落数提高３７．９８％，使化疗药物对ＣＦＵ－ＡＭＬ的抑制率从原先的３０．４％￣４７．４％分别提高到５１．２％￣     

加味八珍汤对环磷酰胺致狗造血功能损伤的作用

观察了加味八珍汤对环磷酰胺所致狗造血功能损伤的治疗作用。结果表明：本方能较明显的促进粒系、巨噬系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）、红系集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ）和红系爆式集落单位（ＢＦＵ－Ｅ）产率的形成，与单纯环磷酰胺组比较，Ｐ〈０．００１）；增殖骨髓有核细胞数；对混合集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｉｘ）巨核系集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）也膛同程度的刺激增生作用，结果还为气血证本质的研究提供依据。     

人参总皂甙对白血病祖细胞作用的实验观察

采用白血病祖细胞集落形成培养法,观察不同浓度人参总皂ｅｇ－０１白血病细胞株和急性髓细胞白血病患者的骨髓细胞集落形成的影响,并以正常粒单祖细胞作比较。结果正常和白血病祖细胞均对低浓度的ＴＳＰＧ有反应,集落数提高２６．１－３５．４％中等浓度的ＴＳＰＧ仍然刺激正常ＣＦＵ－ＧＭ集落增加,但抑制ＨＬ－６０,Ｍｅｇ－０１和ＣＦＵ＝－ＡＭＬ集落生长,抑制率为５０．８％、２５．１％和１９．０％;较高浓度的６０、Ｍ     

三才注射液对小鼠红系细胞的影响

目的：探讨三才封髓丹对小鼠红系细胞造血的作用机理。方法：通过应用三才注射液对贫血及正常小鼠外周血的Ｈｂ、ＲＢＣ、网织红细胞（Ｒｅｔ）、红系分裂指数、骨髓有核细胞（ＢＭＣ）进行测定及采用红系造血祖细胞的培养方法，观察三才封髓丹的造血作用。结果：三才封髓丹能促进贫血小鼠的Ｈｂ、ＲＢＣ、Ｒｅｔ、红系分裂指数、ＢＭＣ的增加，在脾细胞或腹腔巨噬细胞条件下，能促进ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｅ的增殖。结论：三才封髓丹     

肠癌康复汤对大肠癌患者术后免疫功能的影响

目的：探讨肠癌康复汤对大肠癌患者术后免疫功能的影响。方法：将４８例Ｄｕｋｅｓ’Ｂ、Ｃ期的大肠癌手术后患者随机分为中药线１６例、化疗组１７例、中药加经疗组（以下简称中化组）１５分别予服肠癌康复汤与５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）化疗，观察Ｔ淋巴细胞亚群、ＮＫ细胞及免疫球蛋白的动态变化并与健康人组作对比研究。结果：手术前各组大肠癌患者的ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋、及ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋均明显     

补髓生血胶囊治疗慢性再生障碍性贫血的临床观察

探讨补髓生血胶囊治疗慢性再生障碍性贫血的理论依据。采用造血细胞培养和流式细胞仪技术，对口服补髓生血胶囊的３５例患者治疗４个月前后的骨髓单个核细胞进行对比观察。１；本品具有恢复造血干／祖细胞膜ＩＬ－３，ＩＬ－６，ＩＬ－１１受体的作用；２．补髓生血胶囊的疗效优于西药；３．治疗组中肾阳虚与肾阴虚型治疗前的造血干／祖细胞在ＩＬ－３，ＩＬ－６，ＩＬ－１１刺激下，其细胞集落产生率和ＣＤ＾＋３４细胞率有显著性差     

雷公藤红素对大鼠血管平滑肌细胞c-myc和血小板源性生长因子的mRNA的影响

目的：观察雷公藤红素对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中原癌基因（ｃ－ｍｙｃ）和血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）的ｍＲＮＡ表达水平的影响。方法：分别将所培养的第５￣１０代ＶＳＭＣ同步化培养２４ｈ后，加入２０％胎牛血清（ＦＣＳ）和不同剂量的雷公藤红素（０．１、０．２和０．３ｍｇ／Ｌ），共同孵育６ｈ和１２ｈ后，分别提取ＶＳＭＣ胞浆总ＲＮＡ，通过地高辛标记探针，采用斑点杂交方法检测ｃ－ｍｙｃ和ＰＤＧＦ的ｍＲ     

人参总皂甙对正常人和再生障碍性贫血患者造血祖细胞的刺激增殖作用

为了解人参对造血祖细胞的作用,应用红系祖细胞(BFU-E、CFU-E)和粒单系祖细胞(CFU-GM)体外培养技术,观察人参总皂甙(TSPG)对正常人和29例再生障碍性贫血(再障)患者的祖细胞刺激增殖作用,并与甲基睾丸素(甲睾)相比较。TSPG在20μg/ml浓度时,可使正常BFU-E、CFU-E和CFU-GM产率分别提高37.8±2.9%、31.4±2.9%和33.4±4.0%。去除红细胞生成素,TSPG亦具有直接刺激红系祖细胞增殖作用,而甲睾对CFM-GM无作用。29例再障中雄激素反应型14例(48.1%),均同时呈现对人参的敏感性(集落数增加30%以上)。而免疫介导型及干细胞缺少型中人参的作用均不能表达。提示TSPG的作用机制可能是通过增强红细胞生成素等造血生长因子的活性间接地促进骨髓造血。     

人参皂甙对红系、粒单系、巨核系细胞株的增殖及转录因子的诱导作用

目的：通过观察人参皂甙（GS）对c-fos，GATA－1转录因子的诱导作用，探讨GS在造血细胞内的作用机理。方法：选用粒系细胞株HL－60，单核细胞株U937，红系细胞株K562和巨系细胞株Meg-01作靶细胞，MTT法和祖细胞集落培养法观察GS的增殖效应，用Western Blot来分析核蛋白抗原与c-fos,GATA－1抗体的结合反应。结果：（1）MTTI地和祖细胞集落培养法均显著GS（10ug/ml)能够明显地刺激三系细胞增殖，与对照组比较差异有显著性（P＜0．05），（2）Western Blot分析表明HL060，K562和Meg-01 eqn x GS处理后核内c-fos转录调控蛋白量分别是未经处理细胞的1．5，2．0和2．5倍，但U937细胞不表达c-fos蛋白。（3）除了U937细胞不表达GATA－1蛋白外,其他细胞株经GS刺激后TATA－1转录调控蛋白量分别是处理前的1．5，2．1和1．3倍。结论：GS能够明显地刺激3种系列的细胞株增殖，并能有效地通过诱导c-fos或GATA－1转录因子而调控造血细胞与增殖或分化有关基因的表达。     

人参二醇、三醇皂苷对人骨髓造血祖细胞增殖作用的研究

目的：探讨人参二醇皂苷(panaxadiol saponin,PDS)和三醇皂苷(panaxtrol saponin,PTS)对骨髓造血祖细胞增殖的作用。方法：从人参总皂苷进一步分离纯化出PDS和PTS,用体外造血祖细胞集落形成技术,观察PDS、PTS对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU—E、BFU—E)、粒单系祖细胞(CFU—GM)和多向祖细胞(CFU—Mix)的刺激增殖作用。结果：不同浓度的PDS(2．5～200μg／m1)可促进造血祖细胞增殖;CFU—E,BFU—E,CFU—GM和CFU—Mix集落产率均显著高于对照组(P<0．05),提高率(％)分别达54．9±6．3、48．8±5．1、27．6±4．2和48．9±3．9。而PTS在同样浓度时,CFU—E、BFU—E产率均显著低于对照组(P<0．05)：终浓度为200μg／ml时,CFU—E、BFU—E集落产率为零。在CFU—GM培养中,12．5μg／ml浓度的PTS使集落产率提高(29．7±2．2)％(P<0．05);而100μg／ml和200μg／ml的PTS却出现对CFU—GM的抑制作用,抑制率分别为(48．6±3．9)％和100％,、结论：PDS是总皂苷内促进造血的有效成分,而PTS对红系祖细胞具有抑制作用,对粒-单系祖细胞的作用呈剂量依赖关系。     

川芎嗪对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞CD34抗原表达的影响

目的：探讨川芎嗪对免疫再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓细胞ＣＤ３４抗原分子表达的影响。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型，６．０Ｇｙ＾６０Ｃｏγ－射线照射和尾静脉输注淋巴细胞造成小鼠再障。分为正常组、再障组（对照组）、川芎嗪组，除正常组外均胃饲川芎嗪注射液４ｍｇ／次，１天２次，第１０天用流式细胞仪检测各组小鼠骨髓细胞膜上ＣＤ３４抗原表达量。结果：川芎嗪ＣＤ３４抗原表达量的荧光强度（７７．６±．６．５）     

Total saponins of Panax ginseng (TSPG) promote erythroid differentiation of human CD34 cells via EpoR-mediated JAK2/STAT5 signaling pathway

Ethnopharmacological relevance

Total saponins of Panax ginseng (TSPG), main constituents extracted from Panax ginseng, a highly valued traditional Chinese medicine, have been shown to be an effective agent on hematopoiesis.

Objective

To investigate the effect and mechanism underlying in which TSPG promote human CD34⁺ hematopoietic stem and progenitor cells to differentiate into erythroid-lineage cells.

Materials and methods

The effect of TSPG on erythroid differentiation of purified CD34⁺ cells derived from umbilical cord blood (UCB) was determined by methylcellulose assay system and colorimetry for hemoglobin content. The changes of EpoR expression in umbilical cord blood mononuclear cells (UCB-MNCs) and purified CD34⁺ cells were detected with Western blotting and flow cytometry, respectively, and observed under laser scanning confocal microscope (LSCM). RT-PCR was performed to examine EpoR mRNA expression in CD34⁺ cells. The effects of TSPG-pretreatment on Epo-induced JAK₂ and STAT₅ tyrosine phosphorylation were analyzed by immunoprecipitation.

Results

The addition of TSPG (20–70 mg/L) increased the colony formation rate of BFU-E. TSPG (50 mg/L) alone used significantly increased the hemoglobin content, the addition of AG490 evidently reduced TSPG-induced elevation of hemoglobin content. TSPG increased the expression of EpoR on the surface membrane of CD34⁺ cells but did not change the expression of EpoR in total UCB-MNCs. TSPG also increased the expression of EpoR mRNA in CD34⁺ cells. TSPG markedly enhanced Epo-induced tyrosine phosphorylation of JAK₂ and STAT₅ in UCB-MNCs.

Conclusion

These findings suggest that TSPG may enhance the erythroid differentiation of hematopoietic stem and progenitor cells via Epo/EpoR-mediated JAK₂/STAT₅ signaling pathway.     

三七总皂甙对免疫介导性再生障碍性贫血小鼠造血祖细胞的增殖作用

目的：探讨三七总皂甙(PNS)对免疫介导性再生障碍性贫血(再障)小鼠模型血细胞生成的作用。方法：采用免疫介导法进行再障造模,Balb／c小鼠经^60Coγ射线亚致死量照射后,自尾静脉输入DBA／2小鼠的淋巴细胞,随机分成4组,即模型组、PNS治疗高、中和低剂量组(每只3．2、1．6、0．8mg／d),并设正常对照组。腹腔注射给药,模型组和正常对照组注射生理盐水。治疗12天后,做血白细胞计数、骨髓病理检查和粒系、红系造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E)集落培养。结果：(1)PNS升高白细胞数,与模型组比较,PNS高、中和低剂量组的白细胞数提高率分别为(34．3±2．9)％,(29．2±1．7)％和(14．5±1．6)％(P<0．01或P<0．05)。(2)改善骨髓抑制,骨髓病理检查模型组出现大片空白区,被大量的脂肪组织代替,而PNS治疗组造血组织结构较完整,造血细胞量丰富。(3)促进造血祖细胞增殖,高、中和低剂量PNS对CFU—GM集落提高率分别为(64．4±2．8)％、(67．3±2．4)％和(21．9±1．8)％(均P<0．01);CFU—E集落的提高率分别为(31．9±3．6)％、(20．7±2．4)％和(12．8±2．6)％(P<0．01或P<0．05)。结论：免疫介导性再障小鼠在骨髓抑制、造血功能低下时,PNS通过促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖,改善骨髓造血组织增生,从而促进血细胞的生成。     

Ginsenoside Rg3 Inhibits Endothelial Progenitor Cell Differentiation through Attenuation of VEGF‐Dependent Akt/eNOS Signaling

Endothelial progenitor cells (EPCs) play a critical role both in vascular repair after cell transplantation for ischemic diseases and in the growth of early tumors by intervening with the angiogenic switch during tumor progression. This paper reports on the effect of ginsenoside Rg3 in EPCs as a candidate angiogenesis inhibitor for in vitro functional assays. CD34⁺ cells were isolated from human cord blood and the study investigated whether or not ginsenoside Rg3 regulated EPC bioactivities including cell proliferation, differentiation, migration and tube formation. Although ginsenoside Rg3 did not affect the ex vivo expansion of CD34 and/or KDR (VEGFR2) stem/progenitor cells, treatment with ginsenoside Rg3 led to a significant decrease in CD34‐expressing cells, specifically the absolute number of expanded CD34⁺ cells. Importantly, a significantly decreased number of EPC colony‐forming units among human cord blood‐derived CD34⁺ cells was observed, implying that ginsenoside Rg3 inhibited EPC differentiation, in particular, the commitment to primitive EPC colonies (the early stage of EPC differentiation). Moreover, treatment of CD34‐derived EPCs with ginsenoside Rg3 resulted in the attenuation of VEGF‐dependent Akt/eNOS signaling as well as the inhibition of migration and tube formation. In conclusion, this study provides in vitro evidence for ginsenoside Rg3 as a potential therapeutic molecule, specifically as an angiogenesis inhibitor that functions by attenuating EPC bioactivities. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

双黄升白颗粒剂对白细胞减少症模型小鼠造血细胞作用的研究

目的:探讨双黄升白颗粒剂升高白细胞作用及其作用机制。方法:采用Se-137放射源照射ICR小鼠,造成白细胞减少症动物模型,对模型动物给予双黄升白颗粒剂大、中、小剂量(分别为9.2,4.6,2.3 g.kg^-1.d^-1)灌胃,并设正常对照组,模型对照组,阳性对照利可君组。对小鼠外周血象,骨髓有核细胞(BMNC),脾结节(CFU-S)计数,胸腺指数(TI),脾脏指数(SI),骨髓细胞增殖,体外培养小鼠粒单系集落形成单位(CFU-GM),骨髓CD34+细胞比例,骨髓造血微环境等进行检测。结果:双黄升白颗粒可明显升高模型小鼠的白细胞(WBC);双黄升白颗粒可升高模型小鼠的BMNC计数并促进其骨髓细胞增殖;双黄升白颗粒升高模型小鼠CFU-S计数,提高CFU-GM产率,提高骨髓CD34+细胞比例,对造血干/祖细胞增殖具促进作用;双黄升白颗粒具有保护模型小鼠骨髓造血微环境作用;双黄升白颗粒升高模型动物SI,具有一定的免疫增强作用。结论:双黄升白颗粒剂具有明显升高白细胞作用,其作用机制与促进造血细胞增殖及保护骨髓造血微环境有关。     

当归补血汤不同剂型及配伍对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

 目的本实验通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异。旨在为中药颗粒剂的疗效提供实验室依据。方法本实验用高效液相色谱仪检测了当归补血汤不同制剂中阿魏酸、黄芪甲苷的含量差异;采用造血祖细胞培养术、外周血像计数法、ELISA等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中EPO,TPO,G-CSF的变化进行检测。结果当归补血汤煎剂、颗粒剂能通过平衡骨髓微环境中EPO,TPO,GM-CSF的表达;促进骨髓造血细胞从G_{0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像。结论当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒剂疗效较为突出。}