酶联免疫吸附试验终止剂的比较研究

酶联免疫吸附试验终止剂的比较研究梁中琴，穆荣普（苏州医学院生物技术研究所，江苏苏州２１５００７）终止剂作为在ＥＬＩＳＡ试验中的影响因素之一至今未能引起人们足够的注意。为此我们选择６种常用的终止剂进行较为系统地比较研究。为终止剂的优化提供依据，兹将实验...     

伊马替尼耐药的K562细胞系的建立及其生物学特性研究

目的　体外建立一株对伊马替尼 (imatinib)耐药的白血病细胞并阐明其生物学特性。方法　以药物浓度递增的方法诱导人白血病细胞株K5 6 2对伊马替尼产生耐药性 ,以MTT法确定其耐药倍数及抗药谱。用RT PCR和Westernblot方法检测耐药细胞中bcr/abl及mdr1基因及其蛋白BCR/ABL和P gp的表达。用免疫共沉淀法检测耐药细胞中BCR/ABL的磷酸化活性。用双色荧光原位杂交法检测细胞中融合基因bcr/abl拷贝数。结果　建立了针对伊马替尼的人白血病耐药细胞系K5 6 2 /G0 1,耐药倍数为 (15 .2± 3.0 )倍 ,其对阿霉素、三尖杉酯碱和鬼臼乙叉甙具有不同程度的交叉耐药性。主要的耐药机制为上调bcr/abl融合基因及其融合蛋白BCR/ABL表达 ,增强BCR/ABL磷酸化活性。此外 ,多药耐药相关基因mdr1及其蛋白产物P gp高表达也参与了耐药性的形成。 结论　建立了我国第一株对伊马替尼耐药的人白血病细胞系K5 6 2 /G0 1,并阐明了部分耐药机制。     

自噬参与6-羟基多巴胺诱导多巴胺能神经元死亡的实验观察

目的 观察自噬在6-9基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的大鼠多巴胺能神经元中的激活,初步探讨自噬在多巴胺能神经元死亡中的作用.方法 用脑立体定位黑质致密部给药法建立6-OHDA介导帕金森病大鼠模型,用透射电镜法观察多巴胺能神经元中自噬激活,免疫荧光法检测6-OHDA对多巴胺能神经元中LC3表达的影响.结果 透射电镜显示,6-OHDA注射后6h至24h,被损伤大鼠黑质致密部神经元内溶酶体被激活,自噬小体形成.免疫荧光法显示模型大鼠与对照组相比,黑质多巴胺能神经元受损,TH阳性细胞明显减少,LC3表达量显著增加.结论 自噬参与6-OHDA介导的多巴胺能神经元死亡过程.     

珍珠菜提取物对肝癌抑制作用的研究

目的 观察珍珠菜提取物(ZE4)对肝癌体内外的抑制作用.方法 体外采用MTT法、3H-TdR掺人法、集落形成实验观察ZE4对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤作用;采用划痕实验法与内皮细胞黏附实验观察ZE4对SMMC-7721细胞迁移的抑制作用,体内以抑瘤率和脏器指数为指标观察ZE4对小鼠肝癌H22的作用.结果 ZE4可抑制SMMC-7721细胞的增殖和转移;体内实验显示ZE4可显著抑制小鼠肝癌H22的增殖,抑瘤率均在30%以上,其中中剂量(200 mg/kg)组的效果最好,可达到57.8%.结论 ZE4对肝癌有很好的抑制作用.     

川芎嗪诱导急性胰腺炎胰腺细胞凋亡及其机制的初步研究

目的研究川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）对大鼠急性胰腺炎（acutepancreatitis,AP）的治疗作用,并探讨川TMP治疗AP的机理。方法采用腹腔内注射蛙皮素制备急性水肿型胰腺炎（acuteedematouspancreatitis,AEP）模型,腹腔内注射TMP,端口标记法（triphosphate-biotinnick-endlabeling,TUNEL）检测胰腺腺泡细胞凋亡,免疫组化法检测Bax基因表达,同时观察IL-6、TNF-α、CRP、AMY等变化,并进行胰腺组织形态学检查。结果采用蛙皮素腹腔注射造成AEP,发现AEP胰腺存在明显细胞凋亡。TMP可以抑制IL-6、TNF-α、CRP等表达,上调促凋亡基因Bax的表达,诱导AEP胰腺细胞凋亡。结论TMP对AEP有明显疗效,其机制与降低IL-6、TNF-α含量,抑制CRP等表达,上调促凋亡基因Bax表达,促进胰腺细胞凋亡有关。     

珍珠菜提取物对肝癌抑制作用的研究

目的 观察珍珠菜提取物 (ZE4) 对肝癌体内外的抑制作用。方法 体外采用 MTT 法、³Ｈ-TdR 掺入法、集落形成实验观察 ZE4 对肝癌 SMMC-7721 细胞的杀伤作用;采用划痕实验法与内皮细胞黏附实验观察 ZE4 对 SMMC-7721 细胞迁移的抑制作用。体内以抑瘤率和脏器指数为指标观察 ZE4 对小鼠肝癌 H22 的作用。结果 ZE4 可抑制 SMMC-7721 细胞的增殖和转移;体内实验显示 ZE4 可显著抑制小鼠肝癌 H22 的增殖,抑瘤率均在 30% 以上,其中中剂量 (200 mg/kg) 组的效果最好,可达到 57.8%。结论 ZE4 对肝癌有很好的抑制作用。     

女贞子提取物的体内抗肿瘤作用

目的：观察女贞子中含有熊果酸和齐墩果酸粗提物的抗肿瘤作用。方法：采用小鼠移植性肿瘤模型，观察了女贞子提取物（Extract of Nu Zhen Zi,ENZZ）对H22肝癌、S180肉瘤荷瘤小鼠的抑瘤作用，对S180荷瘤小鼠的生命延长作用。结果：女贞子提取物对小鼠移植性肿瘤H22有抑制，ENZZ250mg/kg，500mg/kg，1000mg/kg组平均抑瘤率分别为41.49%、48.32%、45.45%，对S180肉瘤实体型有抑制作用，上述三个剂量的抑瘤率分别为37.50%、44.23%、46.15%；女贞子提取物对S180肉瘤腹水型，H22肝癌腹水型无生命延长作用。结论：女贞子提取物对移植性肿瘤H22肝癌、S180肉瘤有抑制作用。     

金荞麦Fr4对小鼠lewis肺癌细胞MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的 探讨金荞麦提取物Fr4对小鼠lewis肺癌组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase，MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitors of metallproteinase，TIMP-1)蛋白表达的影响。方法 利用C57／BL6小鼠移植性肿瘤lewis肺癌模型，观察金荞麦Fr4对小鼠lewis肺癌生长的影响；利用免疫组织化学SP法研究金荞麦Fr4对lewis肺癌中MMP-9、TIMP-1表达的影响。结果 金荞麦Fr4在400mg／kg剂量时可明显抑制C57／BL，6小鼠lewis肺癌生长；金荞麦Fr4可下调MMP-9的表达，但不影响TIMP-1的活性。结论 金荞麦提取物Fr4具有明显的抗肿瘤作用，分子机制可能与下调MMP-9的表达有关。     

姜黄素抑制血管生成作用的实验研究

目的研究姜黄素对血管生成和内皮细胞生长的影响。方法利用生长因子(VEGF和bFGF)诱导的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管增生模型观察姜黄素对血管生成的影响；利用培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，采用MTT法观察不同时间、不同浓度姜黄素对内皮细胞增殖的抑制作用。结果姜黄素能明显抑制VEGF和bFGF诱导的CAM小血管生成，对内皮细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素具有显著的抗血管生成作用。     

云芝糖肽抗肿瘤的实验研究

采用小鼠移植性肿瘤病理模型,观察云芝糖肽对Ｓ－１８０Ａ荷瘤小鼠的抑瘤作用和对生命延长率的影响。结果：ＰＳＰ２５ｍｇ／ｋｇ腹腔给药,抑瘤率为３４．８５％,抑瘤率为３４．８５％;１０００ｍｇ／ｋｇ口服给药,抑瘤率为３２．９９％;连续腹腔给药２５ｍｇ／ｋｇ,１周后腹腔接种Ｓ－１８０Ａ,生命延长率达４４．６２％。