骨痛灵方对肺癌骨癌痛模型小鼠的疼痛行为学以及脊髓MCP-1和NGF的影响

  目的：观察骨痛灵方对肺癌骨癌痛模型小鼠脊髓单核细胞趋化因子(MCP-1)和神经生长因子(NGF)表达的影响,探讨骨痛灵方治疗骨癌痛的潜在作用机制。  方法：在C57小鼠左后肢胫骨骨髓腔注射Lewis肺癌细胞建立骨癌痛模型。50只小鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、西药组和中西药组,每组10只。中药组小鼠以骨痛灵方煎剂灌胃,西药组予以唑来膦酸腹腔注射,中西药组则两药联合运用。用Von Frey纤维及热痛测试仪分别于造模前,造模后第6(7)天、13(14)、20(21)天观察小鼠机械性缩足反射阈值(PWMT)和热痛觉缩足潜伏期(PWTL)的变化,酶联免疫吸附反应(ELISA)检测脊髓MCP-1和NGF蛋白的表达情况。  结果：3周后,3个治疗组的PWMT和PWTL均明显高于模型组(均P<0.05),中西药组的PWMT比中药组和西药组均增高,差异有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,中药组、西药组和中西药组的MCP-1蛋白表达均明显降低(均P<0.05);NGF则均显著升高(均P<0.05)。  结论：骨痛灵方可能通过减少脊髓MCP-1蛋白的表达,抑制中枢敏化,同时促进NGF蛋白的表达,修复中枢敏化中受损的神经元而发挥止痛作用。     

基于NF-κB P65/IκBα信号通路探讨养阴益气活血方治疗干燥综合征作用机制北大核心CSCD

目的研究养阴益气活血方对干燥综合征非肥胖糖尿病(NOD)小鼠颌下腺组织核因子-κB P65蛋白(NF-κB P65)/核因子κB抑制蛋白α(IκBα)信号通路的影响。方法取NOD小鼠24只随机分为4组,每组6只。模型组灌服去离子水0.4 mL(3 mg/mL),西药组灌服羟氯喹0.4 mL(2.5 mg/mL),中药组灌服中药养阴益气活血方0.4 mL,中西药组灌服中药养阴益气活血方及羟氯喹各0.4 mL,选取6只同龄Balb/c小鼠作为正常组灌服去离子水0.4 mL。给药8周后摘取双侧颌下腺组织进行PCR检测,镜下观察各组小鼠颌下腺组织免疫组化后蛋白变化。结果与正常组比较,模型组小鼠颌下腺组织P65mRNA表达著增高,IκBαmRNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,西药组、中药组、中西药组P65 mRNA表达降低,IκBαmRNA表达升高(P<0.05)。与西药组比较,中西药组P65 mRNA表达降低(P<0.05),中药组IκBαmRNA相对表达量降低(P<0.05)。镜下,模型组小鼠颌下腺组织P65蛋白呈高表达,IκBα蛋白呈低表达,中药组、西药组和中西药组P65蛋白散在表达,正常组表达最弱;IκBα蛋白在其余三组高表达,正常组表达最强。与正常组比较,模型组P65平均吸光度增高,IκBα平均吸光度减少(P<0.05);与模型组比较,中药组、西药组和中西药组P65平均吸光度降低,IκBα平均吸光度增加(P<0.05)。从药效比较,中西药组抑制NF-κB/IκBα通路中P65表达的疗效最好,西药组和中药组次之,且疗效相近;中西药组抑制IκBα磷酸化的效果最佳,其次是西药组,中药组最次。结论联合使用养阴益气活血方和羟氯喹能通过减少P65 mRNA及蛋白表达,维持IκBαmRNA及蛋白高表达,抑制NF-κB P65/IκBα信号通路,减少颌下腺炎症反应,从而发挥治疗干燥综合征的作用。     

马钱子水煎液对骨转移小鼠疼痛及骨转移灶中破骨细胞的影响

目的探讨马钱子对乳腺癌骨转移小鼠癌痛及骨转移灶破骨细胞影响。方法采用股骨内注射MDA-MB-231BO细胞法,成功建立乳腺癌骨转移癌痛小鼠模型,将24只小鼠随机分为假手术组、模型组、马钱子组、唑来膦酸组,每组8只。治疗前后小鼠机械痛觉超敏、热板法检测小鼠缩足反应百分率及热刺激痛阈值;采用微计算机断层扫描对各组小鼠股骨转移扫描,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色法来观察各组小鼠骨转移灶中破骨细胞的数量。结果与假手术组比较,模型组治疗前、后小鼠缩足反应百分率均升高(P0.05,P0.01),小鼠热刺激痛阈值、骨密度和骨体积分数值均下降(P0.01),TRAP(+)细胞数量增加(P0.01);与模型组比较,治疗后马钱子组小鼠缩足反应百分率均降低(P0.01),小鼠热刺激痛阈值、BMD及BV/TV值均升高(P0.01),小鼠TRAP(+)细胞数量均减少(P0.01)。结论马钱子可减轻乳腺癌骨转移小鼠的癌痛程度,其机制可能与马钱子可抑制破骨细胞的活性,并一定程度上减轻骨质的损伤相关。     

骨痛灵方调控骨转移模型小鼠脊髓MAPK信号通路的研究

目的从调控MAPK信号通路角度探讨骨痛灵方治疗骨转移疼痛的作用机制。方法将40只小鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、对照组,除假手术组外,其余各组建立小鼠骨转移模型。从造模第7天开始给药,中药组予骨痛灵方治疗,对照组以曲马多治疗,采用VonFrey纤维检测机械痛阈值评价其止痛疗效,观察肝肾心病理评价其安全性,采用Western blot法检测脊髓MAPK信号通路中p-JNK、p-p38、p-ERK蛋白的表达。结果 (1)造模第14天,与模型组比较,对照组和中药组机械痛阈值均有升高(P0.05)。造模第21天,中药组机械痛阈值较模型组与对照组均增高(P0.05)。(2)各组心肝肾病理均无明显改变。(3)与假手术组比较,模型组脊髓p-JNK、p-p38、p-ERK的表达均增加(P0.05)。与模型组比较,对照组和中药组脊髓p-JNK、p-p38和p-ERK的表达均显著减少(P0.05)。中药组和对照组脊髓p-JNK、p-p38和p-ERK的表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论骨痛灵具有良好的治疗骨转移疼痛的疗效,且对心肝肾无明显毒副作用,其止痛作用机制与调控MAPK信号通路p-JNK、p-p38、p-ERK蛋白表达有关。     

肺岩宁方通过RANK-RANKL途径调节肺癌骨转移中破骨细胞活化机制的研究

目的:探讨肺岩宁方对肺癌骨转移裸小鼠模型转移性骨破坏及破骨细胞活化的影响。方法:将40只BALB/c裸鼠随机分为空白组、模型组、唑来膦酸组、肺岩宁组,每组10只,除空白组外均采用骨髓腔内注射人肺腺癌A549细胞悬液的方法建立骨转移模型,各干预组给予对应药物治疗,共28d,期间记录体重及生存状态,28d后取骨组织进行Mirco-CT摄片分析、HE染色及抗酒石酸的酸性磷酸酶(TRAP)染色。结果:肺岩宁组和唑来膦酸组小鼠体重及生存质量较模型组更高;模型组见明显溶骨性骨破损、肿瘤细胞密集、TRAP(+)细胞数量增多,肺岩宁组和唑来膦酸组骨组织轻度破坏、肿瘤细胞减少、TRAP(+)细胞数量减少。结论:肺岩宁方可能通过抑制RANK-RANKL途径达到减少转移性骨质破坏及破骨细胞活化的作用,显示其作为抗肺癌骨转移药物的应用前景。     

盆痛灵方对子宫内膜异位症模型大鼠镇痛作用机制的研究

目的?基于神经生长因子（NGF）调控p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路探讨盆痛灵方对子宫内膜异位症（EMs）模型大鼠的镇痛机制。方法?采用自体内膜移植法建立SD大鼠EMs疼痛模型，将模型大鼠按随机数字表法分为鞘内注射4组[对照组、NGF诱导剂组（NGF组）、NGF抑制剂组（鞘K组）、p38MAPK抑制剂组（鞘S组）]，每组15只；直肠给药5组（模型组、盆痛灵方低、中、高剂量组、西药组），每组15只；另设假手术组15只。采用机械刺痛法观察鞘内注射组的痛阈值变化，免疫组化染色法检测鞘内干预后模型大鼠内异灶NGF、磷酸化p38（p-p38）、瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ（TRPV1）蛋白表达，并用蛋白免疫印迹（Western Blot）、反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测鞘内干预后内异灶及背根神经节（DRG）中NGF、p-p38、TRPV1蛋白及基因表达水平的变化以及盆痛灵方灌肠干预后p-p38蛋白及基因表达。结果?鞘内注射干预后，与对照组比较，NGF组痛阈值下降，鞘K、鞘S组痛阈值上升（P<0.01）；内异灶及DRG内NGF诱导剂组NGF、p38、TRPV1mRNA及蛋白表达均升高，内异灶内鞘K、鞘S组NGFmRNA及蛋白表达均下降（P<0.01），p-p38、TRPV1蛋白表达下降（P<0.01）；DRG内鞘K组NGF、p38mRNA及蛋白表达下降，鞘S组p38、TRPV1mRNA及蛋白表达下降（P<0.05）；及NGF、p-p38蛋白表达下降（P<0.01）。直肠给药干预后，与假手术组比较，模型组中p38 mRNA及蛋白表达增加；与模型组比较，西药组及盆痛灵高剂量组p38 mRNA及蛋白表达均降低（P<0.01），盆痛灵低、中剂量组p-p38蛋白表达下降（P<0.01）。结论?NGF-p38MAPK信号通路的激活降调TRPV1基因和蛋白的表达参与EMs疼痛的发生，盆痛灵方通过调控NGF-p38MAPK-TRPV1信号通路逆转EMs疼痛。     

芳香外敷方对骨转移癌痛小鼠机械性痛觉和热刺激痛觉的影响

目的评价芳香中药外敷缓解癌痛的疗效。方法将30只裸鼠通过股骨内注射表达绿色荧光蛋白的人肺腺癌A549细胞建立肺癌骨转移癌痛模型。造模成功后随机分为中药外敷组、扶他林组、模型组,每组10只,另设假手术组10只。中药外敷组给予芳香外敷方0.5 g/(kg·d)外敷,扶他林组给予扶他林0.1 g/(kg·d)局部涂抹,模型组和假手术组给予涂擦生理盐水0.5 ml/只,各组外敷至少持续6 h,每日1次。治疗前后观察各组大鼠机械痛觉超敏实验的缩足反应百分率和热刺激痛阈值。结果治疗前后模型组缩足反应百分率均较假手术组升高,而热刺激痛阈值明显降低(P0.01)。治疗后与扶他林组和模型组比较,中药外敷组缩足反应百分率明显降低,而热刺激痛阈值明显升高(P0.01)。结论芳香外敷方能缓解肺癌骨转移小鼠癌痛行为,且疗效优于扶他林。     

左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠足细胞凋亡的影响

目的探讨左归降糖益肾方治疗糖尿病肾病(DN)的效果及可能作用机制。方法 40只MKR小鼠随机分为MKR鼠组、模型组、中药组和西药组,每组10只,同期另设10只C57小鼠为对照组。模型组、中药组、西药组均予高脂饮食联合右肾切除建立糖尿病肾病模型,术后8周中药组给予左归降糖益肾方溶液28g/(kg·d),西药组给予格列喹酮片7.9mg/(kg·d)和贝那普利片1.3mg/(kg·d),其余各组均以等量蒸馏水灌胃,每日1次,连续8周。检测各组小鼠空腹血糖、尿微量白蛋白(Um A1b)、肾小球足细胞凋亡水平及Bcl-2 mRNA、Bax mRNA和蛋白表达水平。结果模型组可见凋亡细胞明显增多,多数为肾小球内的足细胞,中药组及西药组足细胞凋亡情况较模型组明显减少。与对照组比较,MKR鼠组和模型组小鼠空腹血糖、Um A1b和Bcl-2、Bax mRNA和蛋白表达均明显升高,并且模型组明显高于MKR鼠组(P0.01);给药后,中药组与西药组空腹血糖、Um A1b及Bax mRNA和蛋白表达均较模型组明显降低,Bcl-2mRNA和蛋白升高(P0.01),而中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论足细胞凋亡参与了DN的发病,左归降糖益肾方可能通过影响Bcl-2、Bax的表达以及抑制足细胞凋亡从而保护肾脏。     

壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎模型小鼠miR-29a及Wnt信号通路的影响

目的:研究壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎(AS)模型小鼠miR-29a及Wnt通路的影响,以探讨壮督驱寒合剂防治AS的机制。方法:将50只6～8周Balb/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均采取蛋白聚糖加完全弗式试剂腹腔注射复制AS小鼠模型。造模结束后各组分别进行相应药物灌胃处理,1次/d,连续6周,末次给药后取膝关节滑膜组织。采用实时荧光定量法测定miR-29a、DKK-1及β-catenin的mRNA表达,采用免疫印迹法检测β-catenin、DKK-1蛋白含量。结果:与空白组相比,模型组小鼠滑膜组织中miR-29a表达升高,β-catenin mRNA及蛋白表达升高,DKK-1 mRNA及蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,西药组及中药低、高剂量组miR-29a表达下降,β-catenin mRNA及蛋白表达下降,DKK-1 mRNA及蛋白表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:壮督驱寒合剂可能通过调控miR-29a来影响Wnt/β-catenin经典信号通路的表达,从而起到延缓AS新骨形成的作用。     

中药复方对癫痫小鼠海马c-fos蛋白表达的影响

目的　探讨中药复方对戊四唑 (PTZ)致痫小鼠海马不同亚区c -fos蛋白表达的影响。方法　将 5 0只昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型组、中药复方Ⅰ组、中药复方Ⅱ组及西药组。中药复方Ⅰ组和Ⅱ组灌服不同浓度的中药复方浓缩剂 ;空白对照组、模型组灌服蒸馏水 ;西药组灌服苯妥英钠。除空白对照组外 ,其余各组于第 6天给药 30min后腹腔注射PTZ( 5 5mL/kg)致痫 ,5 5min后处死动物。采用免疫组化法观察中药复方对癫痫小鼠海马不同亚区c-fos蛋白的影响。结果　PTZ致痫后c -fos表达增强 ,分布密集 ,染色加深 ;而中西药组表现为c -fos表达减少 ,分布稀疏 ,染色变浅。结论　中药复方能有效对抗PTZ所致的惊厥发作 ,可能与其能调节海马回内的c-fos蛋白的过度表达有关。     

益气扶正复方联合依维莫司对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞株裸鼠移植瘤的影响

目的研究益气扶正复方联合依维莫司对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用及其作用机制。方法体外培养三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞株,将细胞悬液接种于雌性BALB/C裸鼠第二乳腺乳垫处,建立皮下移植瘤模型。将造模成功的裸鼠随机分为对照组、益气扶正复方(中药复方)组(40mg/kg)、依维莫司组(2mg/kg)和联合组,每组6只。各组灌胃给予相应药物干预,连续30d。比较各组移植瘤体积和质量的变化,计算各组肿瘤抑制率。采用Real-time PCR检测各组mTor、Akt、P70s6k、4Ebp-1 mRNA的表达水平,Western blot检测各组Akt、p-Akt、m-TOR、p-mTOR、PTEN及mTOR下游底物p-4EBP-1、p-P70S6K的蛋白表达水平。结果与中药复方组相比,联合组移植瘤体积和质量显著减小(P0.05,P0.01),肿瘤抑制率明显升高,且联合组mTor和P70s6k mRNA表达及p-mTOR和P70S6K蛋白表达水平明显低于中药复方组,而联合组PTEN蛋白表达高于中药复方组(P0.05)。结论益气扶正复方与依莫维司联用能抑制MDA-MB-468荷瘤裸鼠的肿瘤组织生长,与益气扶正复方单用相比效应更为显著,其作用机制可能与抑制p-mTOR、p-Akt、p-P70S6K活性,提高p-4EBP-1、PTEN表达有关。     

妇痛宁对子宫内膜异位症COX2-PGE2作用途径的影响

[目的]通过研究化瘀散结中药妇痛宁对子宫内膜异位症(EMs)病灶中环氧化酶2(COX2)-前列腺素E2(PGE2)作用途径中相关分子基因和蛋白的表达,探讨妇痛宁对EMs中血管生成、侵袭和转移方面的影响。[方法]收集EMs患者的异位病灶组织,原代消化培养子宫内膜细胞,将25×106/m L浓度混合培养的异位子宫内膜细胞注射到裸鼠腹部皮下,成功建立模型后,将成模裸鼠分为空白对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性对照组,分别予无菌生理盐水、低剂量中药、中剂量中药、高剂量中药和孕三烯酮灌胃,3周后处死裸鼠,取病灶,测量病灶体积,免疫组化法检测各组病灶中血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD),逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测病灶中COX2、PGE2、VEGF、Snail和E-cadherin m RNA的表达,Western-blot法检测病灶中Snail和E-cadherin蛋白的表达。[结果]中剂量及高剂量妇痛宁治疗组裸鼠异位病灶体积减小、VEGF表达及MVD均降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。各剂量治疗组裸鼠异位病灶中COX2、PGE2、VEGF、Snail m RNA表达降低,Ecadherin m RNA表达升高,且Snail蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。[结论]妇痛宁可影响COX2-PGE2作用途径中与血管生成、侵袭和转移相关分子的表达,通过抑制异位病灶的血管生成、侵袭和转移能力而抑制病灶的生长。     

解毒化浊方对HER-2阳性乳腺癌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响

目的观察解毒化浊方血清对HER-2阳性乳腺癌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响,探讨解毒化浊方治疗HER-2阳性乳腺癌的作用机制。方法将雌性Wistar大鼠分为对照组、中药组、西药组、联合组4组,分别给药制备含药血清,再以给药血清干预SK-BR-3细胞,采用Western blot检测HER-2、p-HER-2蛋白表达以及PI3K/Akt通路相关蛋白p-Akt、Bad、p-Bad表达。结果 Western blot检测显示,中药组、西药组、联合组HER-2、p-HER-2灰度比较对照组均降低;西药组、联合组HER-2、p-HER-2、p-Akt灰度比较对照组明显降低,西药组、联合组较对照组HER-2、p-HER-2、p-Akt表达含量差异有统计学意义(P0.05)。中药组、西药组、联合组Bad、p-Bad灰度比较对照组降低,总Bad表达含量各组间差异无统计学意义(P0.05)。西药组、联合组p-Bad表达含量差异有统计学意义(P0.05)。结论解毒化浊方具有下调PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达,协同抑制剂发挥减毒增效的抗肿瘤作用。     

健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察中药复方健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤Bax及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用HCT8/V细胞制作裸鼠皮下移植瘤,将32只造模成功的裸鼠随机分为4组,每组8只。空白组予0.9%Na Cl溶液腹腔注射,化疗组予长春新碱腹腔注射,中药组予健脾解毒方灌胃,联合组予长春新碱腹腔注射和健脾解毒方灌胃。测量各组皮下移植瘤的瘤重及抑瘤率,光镜观察肿瘤组织病理情况,并采用Real-time PCR法测定Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果与空白组比较,化疗组、中药组、联合组瘤重明显降低,差异有统计学意义(P0.01);与化疗组比较,中药组、联合组瘤重均降低,差异有统计学意义(P0.01);相对于空白组,化疗组、中药组、联合组瘤体抑制率分别为22.84%、38.44%、51.53%,以联合组抑瘤效果最佳。与空白组比较,化疗组、中药组、联合组Bax mRNA表达水平显著升高(P0.05,P0.01),Bcl-2 mRNA表达水平均显著降低(P0.01);与化疗组比较,中药组、联合组Bax mRNA相对表达量高于化疗组(P0.05,P0.01),中药组、联合组Bcl-2 mRNA相对表达量均低于化疗组(P0.01)。结论健脾解毒方通过上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达,促进肠癌细胞的凋亡,且与化疗药具有协同作用。     

肠胃清抑制化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移的实验研究

目的研究肠胃清对化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移的抑制作用并探讨其机制。方法通过一次性腹腔注射最大耐受剂量(MTD)奥沙利铂,3天后尾静脉注射结肠癌细胞CT26,建立化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移模型,24只BALB/c小鼠随机分为模型组、化疗诱导肺转移组(L-OHP)、肠胃清加化疗诱导肺转移组(CWQ+L-OHP)。统计肺结节数目,苏木素-伊红染色(HE)检测肺组织内瘤灶,免疫组化检测肺转移瘤组织微血管密度(MVD);蛋白免疫印迹(Western blot)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺转移灶血管内皮生长因子(VEGF-A)、基质金属蛋白酶2/9(MMP2/9)蛋白和mRNA的表达。结果与L-OHP组比较,CWQ+L-OHP组肺转移结节数目减少(P0.05)、肿瘤组织MVD值下降(P0.01),肺组织VEGF-A、MMP2、MMP9蛋白和mRNA的表达均下调(P0.01)。结论肠胃清能抑制化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移,与其下调肿瘤组织VEGF-A、MMP2、MMP9的表达,降低肿瘤组织MVD,减少肿瘤血管生成有关。     

化痰消瘤方对荷Lewis肺癌小鼠nm-23,VEGF表达的影响

目的:观察化痰消瘤方对Lewis肺癌小鼠瘤质量及肺转移灶的影响,检测瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF),nm-23 mRNA表达的情况,探究其作用机制。方法:取雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为空白组,化痰消瘤方组(50 g·kg~(-1)·d~(-1)),环磷酰胺(CTX)组[0.06 g·kg~(-1)·(3,7 d)~(-1)],共3组,每组10只。右腋下注射细胞悬液建立荷Lewis肺癌小鼠模型,造模后观察21 d,处死,剥离瘤组织,计算抑瘤率,摘取肺组织,固定后显微镜下观察肺转移灶个数,计算抗肺转移率,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测瘤组织中nm-23,VEGF mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤组织中nm-23,VEGF蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,化痰消瘤方组及环磷酰胺组瘤质量、肺转移灶个数均显著降低(P0.01)。与空白组比较,化痰消瘤方及环磷酰胺能显著下调VEGF蛋白和VEGF mRNA的表达水平(P0.01),能显著上调nm-23蛋白和mRNA的表达水平(P0.01)。结论:化痰消瘤方具有抑制Lewis肺癌瘤体生长及转移的作用,其作用机制可能是通过降低VEGF的表达水平,减弱了肿瘤新生血管的生成,同时上调nm23 mRNA表达水平,抑制肿瘤生成与转移来实现的。     

龙蝎消水膏对艾氏腹水瘤小鼠VEGFmRNA、MMP-2mRNA、FLt-1mRNA表达的影响

目的探讨龙蝎消水膏对艾氏腹水瘤（EAC）小鼠的作用及其可能机制。方法Balb／c—nu／nu裸鼠除正常组10只外,另外40只小鼠腹腔内注射0．2mlEAC细胞株悬液（瘤细胞浓度1×10^7／m1）制备腹水瘤小鼠模型。造模成功后随机分为4组,即对照组（予0．9％NaCI溶液）、中药外敷组（予龙蝎消水膏组）、西药组 予恩度＋顺铂（DDP） 、联合治疗组（予龙蝎消水膏联合恩度、顺铂）。各组采取相应干预措施,观察小鼠体内腹水量和腹水瘤细胞的存活率。采用RT—PCR方法,测量各用药小鼠血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体（Fh-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA的含量变化。结果中药外敷组、西药组、联合治疗组对小鼠腹水的抑制作用明显优于对照组（P〈0．01）;与对照组比较,中药外敷组、西药组、联合治疗组治疗后小鼠瘤细胞计数下降（P〈0．05,P〈0．01）。与对照组比较,中药外敷组、西药组、联合治疗组肿癌组织中VEGFmRNA、MMP-2mRNA、FLt-1mRNA的表达水平差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。与西药组比较,联合治疗组的VEGFmRNA、MMP-2mRNA、FLt-1mRNA的表达水平下降（P〈0．05）。结论龙蝎消水膏对小鼠移植性腹水瘤具有明显抑制作用,能明显降低肿瘤组织VEGFmRNA,MMP-2mRNA、FLt-1mRNA表达,并与恩度、顺铂具有协同增效作用。     

滋阴益气活血方对免疫性卵巢早衰小鼠转化生长因子-β1及PI3K相关蛋白表达的影响

目的观察滋阴益气活血方对免疫性卵巢早衰小鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、PI3K、AKT1蛋白表达的影响,探讨其改善卵巢功能的作用机制。方法取Balb/C雌性小鼠60只,随机选取10只为空白组,其余50只用于造模。用透明带3作抗原,皮下多点注射制作免疫性卵巢早衰动物模型。成模后实验小鼠随机分为模型组、阳性对照组和滋阴益气活血方低、中、高剂量组,各给药组给予相应药物,连续给药30 d。HE染色观察小鼠卵巢组织病理形态,免疫组化检测小鼠卵巢组织TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠卵巢组织TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠卵巢内成熟卵泡数量均明显增多,闭锁卵泡数量相对减少,滋阴益气活血方中、高剂量组和阳性对照组小鼠卵巢组织TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论滋阴益气活血方可改善模型小鼠卵巢功能,其机制可能与升高TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白的表达相关。