香菇多糖抗肿瘤作用研究

目的:研究香菇粗多糖的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:体外培养S180内瘤细胞.接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型.将小鼠随机分组,蒸馏水组、香菇粗多糖高、中、低剂量组观察计算抑瘤率、腹腔巨噬细胞吞噬指数及吞噬率、外周血淋巴细胞转化率、血清溶血素水平、以及血清中细胞因子TNI-α、IL-4含量.结果:香菇粗多糖高、中、低剂量组对小鼠S180肉瘤均有抑制作用,能明显提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬指数与吞噬率、外周血淋巴细胞转化率及血清溶血素水平,并能提高血清中细胞因子TNF-α含量,对血清中细胞因子IL4含量的影响作用不显著.结论:香菇多糖具有抗肿瘤以及增强荷瘤小鼠免疫功能的作用.     

金针菇多糖对小鼠体内脾淋巴细胞转化、自然杀伤细胞活性及白细胞介素-2产生的影响

目的:探讨金针菇多糖的3个组分 FVP_1、FVP_2、FVP_3对小鼠体内脾淋巴细胞转化、自然杀伤(NK)细胞活性及白细胞介素(IL-2)产生的影响。方法:正常及接种 S_(180)的荷瘤小鼠,分别分为 FVP_1、FVP_2、FVP_3不同剂量组[5 mg/(kg·d)、10 mg/(kg·d)、20 mg/(kg·d)]和空白对照组,腹腔注射给药10天后,无菌取脾,以 MTT 比色分析法检测各标本的淋巴细胞转化指数、NK 细胞活性及 IL-2增殖指数。结果:3种剂量的 FVP_1、FVP_2、FVP_3均能使正常及荷瘤小鼠的脾淋巴细胞转化指数、NK 细胞活性和 IL-2增殖指数明显提高。结论:FVP_1、FVP_2、FVP_3体内给药能促进正常和荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化,提高 NK 细胞活性和促进IL-2生成,增强和恢复机体的免疫功能。     

大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素-1和白细胞介素-2的影响

目的在分子水平上探讨大蓟总黄酮的抗肿瘤机制，主要研究大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白介素-1（IL-1）和白介素-2（IL-2）的影响。方法通过RT-PCR方法半定量检测肿瘤小鼠细胞产生IL-1 mRNA和IL-2 mRNA的量来研究大蓟总黄酮能否促进肿瘤小鼠细胞产生IL-1 mRNA和IL-2 mRNA。结果大蓟总黄酮能够极为显著地提高肿瘤小鼠细胞产生IL-1和IL-2的转录水平（P〈0．01）。结论大蓟总黄酮能明显地促进肿瘤小鼠IL-1和IL-2 mRNA的表达。     

香菇多糖对荷瘤鼠脾细胞因子和NK活性的调节作用

目的 探讨香菇多糖对荷瘤鼠脾细胞因子和NK活性的调节作用.方法 昆明小鼠40只,随机分为4组:正常对照组,肿瘤(S180)模型组,环磷酰胺对照组,香菇多糖实验组.MTT法检测各组小鼠脾脏NK细胞杀伤活性,放免法检测各组小鼠脾组织匀浆TNF-α、IL-2和IL-6含量,ELISA法检测IL-10的含量.结果 香菇多糖能使荷瘤鼠脾组织匀浆中TNF-α、IL-2、IL-6水平升高,使IL-10的水平显著下降,P值均<0.01.荷瘤鼠应用香菇多糖后,脾NK活性恢复接近正常.结论 香菇多糖对脾NK活性具有促进效应,可影响多种脾细胞因子的分泌水平,提高机体免疫功能.     

白花蛇舌草多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠Th1/Th2漂移及肿瘤微血管形成的影响

目的:研究白花蛇舌草多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠Th1/Th2漂移及肿瘤微血管形成的影响。方法:选取C57BL/6小鼠,建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂(6 mg/kg)组及白花蛇舌草多糖高(400 mg/kg)、低(200 mg/kg)剂量组,另设正常对照组,每组10只,白花蛇舌草多糖组灌胃给药,正常对照组及模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d;顺铂组腹腔注射给药,3次/w。共给药2 w。记录所有小鼠给药前后的体温、体质量、移植瘤体积;给药后检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10、VEGF水平及外周血血小板和T细胞亚群、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脏器指数、肿瘤指数、肿瘤组织内微血管密度(MVD)、骨髓有核细胞计数,并检测肺组织Bcl-2、Bax m RNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠体温、体质量、巨噬细胞吞噬功能、骨髓有核细胞、胸腺指数、脾脏指数、血小板计数、CD3+T细胞比例、CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比值及血清IFN-γ、TNF-α、IL-2水平和肺组织中Bcl-2 m RNA表达显著降低,移植瘤体积、MVD、肿瘤指数...     

香菇多糖对荷瘤鼠免疫细胞及生存率的影响

目的 探讨香菇多糖对荷瘤S180鼠免疫细胞及生存率的影响.方法 昆明小鼠70只,分为正常盐水对照组,肿瘤模型Ⅰ、Ⅱ组,香菇多糖实验Ⅰ、Ⅱ组,生存实验模型组,生存实验给药组.观察计算小鼠体重、瘤重、肿瘤指数及抑瘤率,脾重及脾指数,脾组织结构,体视学方法计量脾白髓相对面积百分比及单位面积中脾小体的个数,外周血白细胞分类计数,小鼠生存质量和生存天数等指标.结果 ①香菇多糖有显著的抑瘤作用,并可明显延长荷瘤鼠的生存时间.②香菇多糖使脾指数明显升高,使荷瘤鼠脾白髓相对面积及脾小体个数明显增加.③香菇多糖使末梢血中性幼稚细胞比例明显增加.结论 香菇多糖能使荷瘤鼠免疫细胞数量增加,明显延长腹水型S_(180)小鼠的生存期.     

基于IL-7的甘草多糖抗肿瘤机制的研究

[目的]明确甘草多糖抗肿瘤作用及其作用机制。[方法]建立CT-26细胞荷瘤小鼠动物模型,随机分为正常组、模型组、甘草多糖组(甘草多糖灌胃500mg/kg)、香菇多糖组(阳性药组,香菇多糖灌胃195mg/kg)和白细胞介素-7(IL-7)抗体阻断组(甘草多糖灌胃500 mg/kg,IL-7抗体与0、5、10 d腹腔注射0.4 mg/kg)。连续给药14 d,计算小鼠肿瘤质量、抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数;检测小肠黏膜上皮细胞IL-7m RNA表达情况和血清中IL-7含量。[结果]灌胃给予甘草多糖14 d后,甘草多糖可以显著降低荷瘤小鼠肿瘤质量,其抑瘤率为21.56%;显著提高小鼠体质量和胸腺指数,改善其生活质量;提高小肠黏膜上皮细胞IL-7m RNA表达和血清中IL-7含量;IL-7抗体阻断后,其抑瘤率和胸腺指数显著降低,小肠黏膜上皮细胞IL-7m RNA虽高表达,但血清中IL-7含量低于试剂盒检测限。[结论]甘草多糖具有显著的抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制可能与提高小肠黏膜上皮细胞分泌IL-7有关。     

香菇多糖对荷瘤鼠血清IL-10、TNF-α和肿瘤DC表达的影响

目的探讨香菇多糖对S180荷瘤鼠血清IL-10、TNF-α水平及肿瘤中DC表达的影响。方法检测各组小鼠血清TNF-α、IL-10水平;通过S100免疫组化标记,计算S100+细胞在参照物(肿瘤)中所占面积百分比;计算DC密度。结果肿瘤模型组血清IL-10、TNF-α均升高,使用香菇多糖后,IL-10、TNF-α回复接近正常组水平,与肿瘤模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。香菇多糖实验组肿瘤细胞异型性较小,瘤巨细胞明显减少,其间的S100+细胞面积百分比和DC密度均高于肿瘤对照组(P<0.01)。结论香菇多糖能改善DC的功能,减少荷瘤机体(和/或肿瘤)免疫抑制因子的分泌,从而抑制肿瘤的发展。     

固齿健周汤对老年小鼠白细胞介素-1、白细胞介素-2生成的影响

目的:研究中药—固齿健周汤对老年小鼠白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)生成的影响。方法:用固齿健周汤灌喂老年小鼠(19月龄)3周,观察其体内 IL-1、IL-2水平变化,并与老年小鼠(19月龄)及青年小鼠(3月龄)作对照。结果:老年小鼠的 IL-1、IL-2水平显著低于青年小鼠(P<0.05,P<0.001),显示衰老与白细胞介素的关系。老年用药组的 IL-1、IL-2明显高于老年对照组(P<0.01,P<0.001),其中 IL-2回升到青年组水平。结论:固齿健周汤通过补肾固本、清热解毒有提高老年小鼠白细胞介素水平、调节免疫功能的作用。     

十全大补汤对移植乳腺癌小鼠免疫抑瘤作的实验研究

目的 研究十全大补汤对荷瘤小鼠抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法 以TA2移植性乳腺癌小鼠作为研究对象,给予50%SDT和灌胃,并给予化疗,以小鼠的体重、瘤重及脾内B淋巴细胞、T淋巴细胞增殖指数、IL-6,TNF-α,IL-2作为观察指标.结果 50%SDT可明显改善荷瘤鼠的一般状况,抑制肿瘤的生长;明显增强脾内T淋巴细胞的增殖,并调节B淋巴细胞的增殖,显著提高荷瘤小鼠脾细胞的IL-2,IL-6和TNF-α的分泌.结论 SDT可在体内抑制肿瘤的生长,并降低化疗药物对机体的免疫损伤作用.     

灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响

目的观察灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响,探讨其免疫调节机制。方法健康雄性清洁级昆明小鼠48只随机分为空白组、脾虚组、阳性组(香菇多糖)及灰树花多糖低、中、高剂量组,每组8只,各给药组给予相应药物,滤菌后腹腔注射10 d,第11日处死动物。流式细胞术检测各组小鼠外周血CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果高剂量灰树花多糖能明显升高脾虚小鼠外周血CD4+T淋巴细胞百分率(P＜0.05);中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠的 CD4+/CD8+T 细胞比值(P＜0.01)。中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠 CD3+T 淋巴细胞百分率(P＜0.01)。灰树花多糖中、高剂量组可以明显升高脾虚小鼠血清 IFN-γ含量(P＜0.01),灰树花多糖高剂量组可以明显降低脾虚小鼠血清IL-4含量(P＜0.01)。结论灰树花多糖可改善脾虚时所致CD4+/CD8+T细胞比值降低,使Th2细胞向Th1细胞转化,从而达到治疗脾虚证的目的。     

六月青多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能及p53, Bcl-2, Bax表达的影响

目的:探讨六月青多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能及凋亡基因p53,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),多肽抗原(Bax)表达的影响.方法:将50只小鼠于右腋皮下接种S180腹水肿瘤细胞建立S180荷瘤模型,造模24 h后随机分为5组:模型(生理盐水20 mL·kg-1·d-1)组,环磷酰胺(0.02 g·kg-1·d-1)组,六月青多糖高、中、低剂量(分别为1.2,0.6,0.3 g·kg-1·d-1)组.除环磷酰胺组隔天ip给药外,余均ig给药10 d.停药24 h后检测荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺系数和脾脏系数;MTT法检测ConA刺激脾淋巴细胞转化功能;中性红法检测腹腔巨噬细胞吞噬功能;免疫组织化学法检测肿瘤组织中p53,Bcl-2,Bax蛋白.结果:六月青多糖高剂量(1.2 g·kg-1·d-1)抑瘤率达38％;与模型组比较,六月青多糖各剂量组胸腺系数显著增高(P＜0.05),高、中剂量组脾脏系数、脾淋巴细胞刺激指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能显著增高(P＜0.01或P＜0.05);六月青多糖各剂量组p53表达无明显差异;高剂量组Bcl-2表达显著减弱(P＜0.05)而Bax表达明显增强(P＜0.05).结论:六月青多糖能抑制小鼠S180肿瘤生长,其机制与增强S180荷瘤小鼠免疫功能、下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白的表达有关.     

羧甲基茯苓多糖对巨噬细胞极化的影响

目的:探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CMP)对巨噬细胞活化、吞噬、分泌、一氧化氮(nitric oxide,NO)和炎症因子的影响。方法:体内实验,将Balb/c小鼠分为生理盐水组和CMP组,生理盐水组腹腔注射生理盐水,CMP组腹腔注射CMP溶液100 mg·kg~(-1),5 d后收集小鼠腹腔巨噬细胞,采用流式细胞术检测细胞吞噬功能。体外实验,将巨噬细胞RAW264.7分为空白组、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组和CMP低、中、高剂量组,并分别加入培养基,LPS(0.1 mg·L-1)和CMP(400,800,1 600 mg·L-1)共孵育48 h。流式细胞术检测巨噬细胞的活化标志分子CD86表达水平和吞噬功能,荧光显微镜观察巨噬细胞吞噬荧光微球情况。收集细胞上清液,Griess法检测NO分泌水平,流式细胞微珠阵列法(cytometric bead array,CBA)检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)的分泌水平。结果:体内实验结果显示,与生理盐水组比较,CMP组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均显著升高(P0.05)。体外实验结果显示,与空白组比较,CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞表达CD86分子水平显著升高(P0.05);荧光显微镜下观察到CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞吞噬2个以上荧光微球的数量明显增加,流式检测结果也表明CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数显著升高(P0.05);LPS诱导巨噬细胞分泌NO,IL-6,IL-10,MCP-1和TNF,然而CMP未见此效应,且NO,MCP-1和TNF分泌水平均低于空白组。结论:CMP可以刺激巨噬细胞活化,增强其吞噬功能,但不能促进巨噬细胞释放NO和炎症因子,因此推测其促进巨噬细胞向M2型极化。     

绞股蓝多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长抑制及免疫调节作用

目的探讨绞股蓝多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制及免疫调节作用。方法 MFC胃癌细胞接种于BALB/c小鼠右侧腋下,建立MFC胃癌荷瘤小鼠模型。将小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组(25 mg/kg)及绞股蓝多糖高、低剂量组(100、50 mg/kg),每组10只,环磷酰胺组腹腔注射,绞股蓝多糖组灌胃给药,1次/d,给药周期12 d。检测抑瘤率及脏器指数,NK细胞杀伤活性、脾淋巴细胞增殖能力及腹腔巨噬细胞吞噬功能,ELISA检测IFN-γ、IL-2和TNF-α水平,流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群。结果与模型组比较,各药物处理组小鼠瘤质量均明显降低(P0.05);环磷酰胺组小鼠体质量明显降低(P0.05),而绞股蓝多糖组小鼠体质量无明显差异(P0.05);环磷酰胺组小鼠脾脏指数、胸腺指数、NK细胞杀伤活性、淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬功能、IFN-γ、IL-2、TNF-α水平、CD4+、CD8+细胞水平及CD4+/CD8+比值均明显降低(P0.05),而绞股蓝多糖各剂量组上述指标均明显增加(P0.05)。结论绞股蓝多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠的肿瘤生长具有抑制作用,该作用与免疫调节作用有关。     

青藤碱对巨噬细胞吞噬能力的影响及机制探讨

目的:观察青藤碱(sinomenine,SIN)对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响,并对其机制进行探讨.方法:大鼠随机分为对照组和青藤碱(20、60、180 mg/kg4组,酵母多糖A腹腔注射诱导急性腹膜炎,提取腹腔巨噬细胞,贴壁法纯化.鸡红细胞吞噬法测定巨噬细胞吞噬指数和吞噬率;分别采用荧光定量realtime RT-PCR和免疫组织化学方法检测TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达.结果:20mg/kg青藤碱能明显提高巨噬细胞吞噬吞噬指数和吞噬率,明显降低巨噬细胞TNF-α、IL_6的表达:60、180mg/kg组能显著提高巨噬细胞吞噬指数和吞噬率,显著降低巨噬细胞TNF-α、IL-6的表达.结论:青藤碱能显著提高巨噬细胞吞噬能力,减少炎症因子表达.     

十全大补汤对移植乳腺癌小鼠免疫抑瘤作用的实验研究

目的研究十全大补汤对荷瘤小鼠抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法以TA2移植性乳腺癌小鼠作为研究对象,给予50%SDT和灌胃,并给予化疗,以小鼠的体重、瘤重及脾内B淋巴细胞、T淋巴细胞增殖指数、IL-6,TNF-α,IL-2作为观察指标。结果50%SDT可明显改善荷瘤鼠的一般状况,抑制肿瘤的生长;明显增强脾内T淋巴细胞的增殖,并调节B淋巴细胞的增殖,显著提高荷瘤小鼠脾细胞的IL-2,IL-6和TNF-α的分泌。结论SDT可在体内抑制肿瘤的生长,并降低化疗药物对机体的免疫损伤作用。     

赤芍总苷对荷瘤鼠细胞因子分泌的调节及对bcl-2、p16表达的影响

[目的]通过观察赤芍总苷(TGC)对荷瘤小鼠免疫功能的调节及对肿瘤细胞凋亡的调控,研究TGC抗肿瘤的作用机制.[方法]采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平;用免疫组化SABC法检测瘤荷小鼠瘤组织bcl-2和p16的表达.[结果]TGC提高瘤荷小鼠外周血IL-2的分泌,TGC组与荷瘤对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);与荷瘤对照组比较,TGC组IL-10分泌显著低于荷瘤对照组(P＜0.01),TGC降低IL-10分泌水平;TGC组与荷瘤对照组比较,bcl-2蛋白阳性细胞数表达均低于荷瘤对照组(P＜0.05),下调bel-2的表达水平,上调p16蛋白表达水平(P＜0.01).[结论]TGC通过调节荷瘤机体异常的免疫状态及诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

香菇多糖对荷瘤小鼠TDCs表达的影响

目的 探讨香菇多糖对荷瘤小鼠S100+ 胸腺树突状细胞(TDCs)和CD1a~+ TDCs表达的影响.方法 观察胸腺结构;通过S100和CD1a免疫组化标记,计算S100+细胞在参照物(胸腺)中所占面积百分比;计算TDCs密度;测算胸腺指数,肿瘤指数,抑瘤率等指标.结果 荷瘤香菇多糖组TDCs数量明显增加,特别在胸腺皮质密度很高,位于成簇的淋巴细胞之间,树状突起与淋巴细胞相接触.荷瘤香菇多糖组S100+ TDCs所占面积比和TDCs密度均比其他各组明显增高(P<0.01).结论 香菇多糖能增加TDCs数量及促进其分化成熟.     

壮药白莲Ⅰ号方对荷瘤S180小鼠抑瘤率及血浆白细胞介素-18的影响

目的 观察壮药白莲Ⅰ号方对小鼠移植性肉瘤S180的抑瘤作用和其对小鼠血浆白细胞介素-18(IL-18)的影响,以探讨该药抑制肿瘤的作用是否与诱生小鼠血浆中IL-18的舍量有关.方法 建立小鼠移植肉瘤S180模型.用大、中、小剂量壮药白莲Ⅰ号方及环磷酰胺治疗肉瘤S180小鼠,观察其抑瘤率及血浆IL-18的含量.结果 白莲Ⅰ号方在一定剂量范围内对荷瘤小鼠的抑瘤率＞30%,并且白莲Ⅰ号方各剂量组均有促进荷瘤小鼠IL-18生成的作用趋势,改善荷瘤小鼠的生存质量.结论 白莲Ⅰ号方能有效抑制小鼠S180实体瘤的生长,存在量-效关系;白莲Ⅰ号方具有诱生荷瘤S180小鼠血浆IL-18的作用,具有良好的免疫调节作用.     

山核桃树枝水煎剂的抑瘤作用及其对S180荷瘤小鼠IL-2和IL-4影响的实验研究

目的:探讨山核桃树枝水煎剂(DJM)的抑瘤作用及其对S180荷瘤小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测荷瘤鼠外周血IL-2和IL-4的水平。结果:DJM对荷瘤鼠的抑瘤率为35.68%,DJM对荷瘤鼠外周血IL-2水平较模型组明显升高(P<0.01),IL-4水平较模型组降低(P<0.05)。结论:DJM对S180荷瘤小鼠肿瘤组织的生长具有明显的抑制作用;DJM可通过提高荷瘤小鼠外周血IL-2水平,降低IL-4水平来逆转Th1/Th2漂移,发挥抗肿瘤作用。