枇杷清肺饮基于 MAPK/NF-κB 信号通路调控 HaCaT 细胞炎性损伤机制研究

目的：采用网络药理学和体外细胞实验研究枇杷清肺饮通过MAPK/NF-κB信号通路调控LPS诱导的HaCaT细胞炎性损伤机制。方法：通过TCMSP数据库、GeneCards、OMIM和TTD数据库,取枇杷清肺饮和痤疮交集靶点,使用STRING数据库建立PPI网络,DAVID数据库筛选靶点GO功能并进行KEGG通路富集分析,Cytoscape软件构建“活性成分-靶点-KEGG-痤疮”网络,预测其作用机制。进一步采用细胞实验验证预测靶点的准确性,采用LPS诱导HaCaT细胞炎症模型,CCK-8检测不同浓度枇杷清肺饮含药血清对细胞活力的影响,qPCR和ELISA检测HaCaT细胞IL-1β、AKR1B1、IL-4、TNF-α的mRNA及蛋白表达水平,Western blot检测NF-κBp65、P38-MAPK和JNK-MAPK蛋白的表达水平。结果：通过网络分析可知,6种中药包含153个活性成分共304个靶标,与痤疮共有靶标基因118个,关键靶点涉及IL-1β、IL-4、TNF-α、AKR1B1等;GO功能富集分析得到条目1 922个（P<0.05）;KEGG通路富集分析筛选到131条信...     

关于中医药本硕专业微生物学实验教学模式改革的设想

文章分析了我校中医药本硕专业微生物学实验教学模式改革的必要性及意义,并提出了综合设计性实验教学模式改革的设想。将打破已有的教学模式,采用教学、技能训练和创新活动相结合的新型综合设计性实验教学模式,从而将理论教学与实践教学更好地结合起来,有利于学生应用技能及创新能力的培养。文章针对综合设计性实验教学模式的构建,实验的总体安排,实验内容及要求,以及实验中可能遇到的问题及解决方案等进行了阐述。     

DNCB对BALB/c小鼠特应性皮炎的诱导作用及其机制

目的：采用2,4-二硝基氯苯（DNCB）致敏BALB/c小鼠诱导小鼠发生特应性皮炎（AD）,阐明DNCB作为半抗原诱导AD的可能致病机制。方法：12只BALB/c小鼠随机分为对照组和AD模型组,每组6只。于实验第1、4、7天,采用1.0% DNCB溶液涂抹于AD模型组小鼠背部皮肤进行致敏,于实验第14、17、19、22、24、27和29天,采用0.5% DNCB溶液涂抹于AD模型组小鼠左耳背部皮肤进行激发。对照组小鼠于相同时间点外用等体积基质溶液。评价2组小鼠皮肤组织炎症评分,观察2组小鼠耳部皮肤外观变化,HE染色和甲苯胺蓝染色观察2组小鼠左耳皮损部位皮肤组织病理形态表现,测量皮损处皮肤组织上皮层厚度,计数皮损处皮肤组织中肥大细胞数,免疫组织化学染色法检测2组小鼠皮损处皮肤组织中白细胞介素4（IL-4）表达水平;ELISA法检测2组小鼠血清IgE水平。结果：AD模型组小鼠皮肤组织炎症评分明显高于对照组（P<0.01）,小鼠左耳部皮肤明显红肿、变硬,伴随出现异常的搔抓行为;AD模型组小鼠皮损处皮肤组织上皮层厚度、浸润肥大细胞数、皮损处皮肤组织中IL-4表达水平和血清IgE水平均明显高于对照组（P<0.05或P<0.01）。结论：外用1.0% DNCB致敏和外用0.5% DNCB激发BALB/c小鼠能够成功诱导AD,其机制可能与二者引起皮肤组织中IL-4表达水平和血清IgE水平升高有关。     

不同应激对小鼠免疫防御功能的影响及其与H2-Eb基因多态性的关系

探讨两种应激对小鼠免疫防御功能的影响及其与H2-Eb基因多态性的关系。制备束缚应激和热应激动物模型,以大肠埃希菌攻击小鼠,比较应激状态下小鼠与正常小鼠的死亡率;采用PCR技术检测以MudoEb5和MudoEb7为代表的小鼠H2-Eb位点等位基因的多态性,分析应激免疫与H2-Eb基因多态性的关系。结果发现小鼠染菌后束缚应激组和热应激组小鼠死亡率均显著高于对照组小鼠(P<0.005),束缚应激组和热应激组小鼠死亡率无明显差异(P>0.05)。正常对照组和束缚应激组小鼠MudoEb5基因型与小鼠接受细菌攻击后生存状态间均无明显相关性(P>0.05),热应激组小鼠MudoEb5基因型与小鼠接受细菌攻击后生存状态间存在明显相关性(P<0.05),三组小鼠MudoEb7基因型与小鼠接受细菌攻击后生存状态间均无明显相关性(P>0.05),MudoEb5和MudoEb7交互作用对各组小鼠染菌后生存状态均无明显影响(P>0.05)。可见束缚应激和热应激均可降低小鼠的免疫防御功能,MudoEb5可能与热应激条件下免疫防御功能降低程度有关。     

试论中医药高校加强病原生物学教学的意义与措施

由于微生物的变异、人类生活环境的改变以及某些宿主自身变化等因素的影响，新发和再发感染性疾病日渐增多，且难以彻底控制，而目前部分高等中医药院校对病原生物学的教学落后于形势的变化。因此，有必要适应感染性疾病变化的趋势，加强病原生物学的教学。认真分析了感染性疾病难以控制的主要原因和高等中医药院校加强病原生物学教学的意义，并提出了加强其教学的若干措施。     

奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测

婴儿配方奶粉常因阪崎肠杆西(Enterobaeter sakazakii)污染而成为婴儿感染发病的主要原因"[1,2].为快速、高效对奶粉中阪崎肠杆菌进行检测和监控,本实验针对阪崎肠杆菌外膜蛋白A(ompA)基因[3]设计引物,建立PCR检测方法,并对人工污染细菌的奶粉进行检测,为奶粉中阪崎肠杆菌检测提供新的手段.现将结果报告如下.     

灰树花提取物对脾虚小鼠腹腔巨噬细胞和脾细胞的影响

目的:探讨灰树花提取物对脾虚小鼠的免疫调节机制。方法:健康雄性清洁级昆明小鼠30只随机分为6组,即空白对照组、脾虚组、阳性对照组(香菇多糖,2 mg·kg-1)、灰树花提取物低剂量组(5 mg·kg-1),灰树花提取物中剂量组(10 mg·kg-1)、灰树花提取物高剂量组(20 mg·kg-1),每组5只,滤菌后ip 10 d,第11天处死动物。检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红、产生一氧化氮(NO)能力(Griess法),以及MTT法检测淋巴细胞转化率、自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性。结果:高剂量灰树花提取物可明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力(P<0.05)和产生NO能力(P<0.01);高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏B细胞增殖能力(P<0.01);中、高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏T细胞增殖能力(P<0.05和P<0.01)灰树花提取物中、高剂量组小鼠脾脏NK细胞杀伤能力均明显高于脾虚组(P<0.01)。结论:灰树花提取物可以通过提高巨噬细胞吞噬能力和产生NO能力、以及淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性的途径提高脾虚小鼠的免疫功能。     

试论加强中医药专业硕士生免疫学实验能力培养的意义与措施

分析了加强中医药专业硕士生免疫学实验能力培养的必要性与意义,并提出实验能力培养的几项措施:进一步提高中医药专业硕士生对掌握免疫学实验能力的认识;编写一部适合中医药专业硕士生教学用的免疫学实验教材;适当增加实验课的教学课时;逐步更新实验教学的内容;改革实验教学模式和考核方法等.     

慢性束缚应激对小鼠全血铁锌钙镁含量的影响

[目的]通过观察慢性束缚应激后小鼠全血中铁、锌、钙和镁含量的变化,揭示慢性束缚应激反应对其全血中4种元素的影响和规律。[方法]建立小鼠慢性束缚应激模型,原子吸收分光光度法测定其全血中铁、锌、钙和镁的含量。[结果]正常对照组小鼠全血铁、锌、钙、镁含量(μg/ml)分别为:393.03±30.12,4.82±1.05,49.96±2.39,43.62±1.92;实验组小鼠全血铁、锌、钙、镁含量(μg/ml)分别为:291.72±83.57,3.62±1.24,59.53±8.97,40.31±5.31。与正常对照组比较,接受应激的小鼠全血中铁、锌显著降低,差异有统计学意义(P﹤0.05);血钙明显升高,差异有统计学意义(P﹤0.05);血镁降低,差异有统计学意义。[结论]慢性束缚应激使全血中铁、锌、镁降低,血钙明显升高。元素铁、锌、钙与慢性束缚应激反应之间存在一定的联系。