罗格列酮活化PPARγ促进顺铂抑制人肺腺癌裸鼠移植瘤生长作用研究

观察过氧化酶体增殖物激活受体,配体罗格列酮与顺铂联合应用时人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤的作用,探讨ROZ活化PPAR γ.下调NFκB,从而诱导人肺腺癌细胞凋亡的作用机制.方法体外培养人肺康癌A549细胞,建立人肺腺癌(A549)细胞裸鼠移植瘤模型,28只荷瘤裸鼠随机分组进行实验.结果罗格列嗣,顺铂及两药合用均能抑制裸鼠移植瘤的生长.结论罗格列酮通过上调PPAR γ蛋白表达,下调NFκB蛋白表达,增强顺铂抑制人肺癌裸鼠移植瘤生长.     

益肺解毒方协同顺铂对肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的研究益肺解毒方协同顺铂对人肺腺癌A549细胞增殖的作用。方法（1）应用血清药理学方法制备益肺解毒方含药血清。（2）应用MTT法检测益肺解毒方药物血清、顺铂以及两药协同对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。结果益肺解毒方药物血清能够抑制人肺腺癌A549细胞的生长,单纯顺铂对人肺腺癌A549细胞增值抑制作用为50．12％,与益肺解毒方协同抑制率提高到85．02％,并且q值大于1．15。结论益肺解毒方具有协同顺铂增效的作用。     

MicroRNA-98对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨MicroRNA-98（miR-98）对肺腺癌耐顺铂细胞系A549／DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA（miRNA）芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549／DDP细胞：M．rr检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549／DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR．98的A549／DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549／DDP对顺铂的药物敏感性。     

顺铂与蒿甲醚联用增强对人肺腺癌A549细胞的抑制作用

目的体外观察顺铂和蒿甲醚对人肺腺癌A549细胞的相互作用。方法采用MTT法,利用中效原理判定联合应用顺铂及蒿甲醚对人肺腺癌A549细胞的效应。结果顺铂与蒿甲醚联用可以明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,两药单用和联用时随着药物浓度增加,其效应也增加;两药联用时的中效浓度明显小于两药单独使用时的中效浓度(顺铂减少34.5%,蒿甲醚减少97.2%);两药大剂量合用时CI<1,小剂量合用时CI>1;且两药联用时的效应与给药的时间先后次序无关(P>0.05)。结论顺铂与蒿甲醚的联用可以明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,两药联用时的中效浓度较单用时明显减小,在两药小剂量联用时表现为拮抗效应,大剂量为协同效应,且两药联用时的效应与给药的时间先后次序无关。     

双脱甲氧基姜黄素对肺腺癌细胞A549生长活性影响的初步研究

目的初步探讨中药姜黄的主要活性单体成分双脱甲氧基姜黄素体内外抗肺癌生长活性的作用.方法(1)应用形态学观察、MTT、流式细胞仪技术等研究双脱甲氧基姜黄素对传代培养人肺腺癌细胞系A549的生长形态、细胞周期等生物学特性的影响;(2)建立裸鼠人肺腺癌细胞A549移植瘤模型,腹腔注射双脱甲氧基姜黄素,研究其对裸鼠移植瘤生长的影响,同时观察双脱甲氧基姜黄素与传统化疗药顺铂联用对抑制裸鼠移植瘤生长有无增效作用.结果(1)双脱甲氧基姜黄素对体外培养的A549细胞有增殖抑制效应,显微镜下可见明显的形态改变,其IC50为12.108μg/ml,流式细胞仪显示细胞周期主要阻滞在S期,浓度增至15μg/ml时,出现明显的细胞凋亡现象;(2)双脱甲氧基姜黄素具有较好的抗人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤生长作用,移植瘤重量及体积显著低于阴性对照组(P＜0 01);(3)双脱甲氧基姜黄素与顺铂联合应用能显著抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长,裸鼠移植瘤体积及瘤重均显著低于双脱甲氧基姜黄素和顺铂单药治疗组(P＜0 01).结论(1)双脱甲氧基姜黄素有明确的抑制体外培养人肺腺癌细胞A549恶性表型的作用;(2)双脱甲氧基姜黄素能明显抑制人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的生长;(3)双脱甲氧基姜黄素与顺铂联用对抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长具有相加作用.     

姜黄素与顺铂联合对人肺腺癌A549细胞增殖抑制作用的体外研究

目的研究姜黄素和顺铂联合应用对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法采用MTT法观察姜黄素和顺铂对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。结果姜黄素及顺铂能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖，并呈浓度及时间依赖性，两者作用人肺腺癌A549细胞48h的半数抑制浓度（IC50）分别为18．4μmol／L、0．966μg／ml。姜黄素10μmol／L、15μmol／L、20μmol／L与顺铂1μg／ml、2μg／ml联合24h、48h、72h的抑制率显著高于单用顺铂、姜黄素组（P〈0．05），两者呈现出相加的抗瘤效果。结论姜黄素在体外对人肺腺癌A549细胞的增殖有明显的抑制作用，能提高顺铂对人肺腺癌A549细胞的敏感性。     

褪黑素联合顺铂对肺腺癌A549细胞生长的影响

目的:探讨褪黑素联合顺铂对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法:分别将不同浓度褪黑素(100、300、500、7001、000μmol/L)及顺铂(2.55、、10μg/mL)联合与肺腺癌A549细胞共培养48 h,MTT法检测细胞抑制率。结果:不同浓度顺铂(2.5、5、10μg/mL)与500μmol/L的褪黑素联合使用对肺腺癌细胞生长抑制率([71.25±5.01)%(、86.37±7.10)%(、97.63±8.65)%)]明显高于单独使用顺铂(P<0.05)。结论:褪黑素和顺铂均可抑制肺腺癌A549细胞增殖,二者联合可协同抑制肿瘤细胞增殖。     

人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株的建立及其特性研究

目的 建立耐紫杉醇的人肺腺癌A549(A549/Taxol)细胞株,并初步研究其生物学特性.方法 应用抗肿瘤药紫杉醇以体外浓度递增和短时作用法筛选A549细胞株.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的耐药指数及对多种抗癌药物的敏感性;免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P170)、β-tubulin等耐药相关蛋白的表达情况.结果 A549/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50 )是亲代A549细胞的512.8倍,群体倍增时间是亲代细胞的1.28倍,对紫杉醇、丝裂霉素、长春新碱、诺维本的耐药指数依次为512.8、66.48、4.88和 2.06;而对顺铂、健择无交叉耐药.A549/Taxol细胞高表达P170,β-tubulin表达水平高于其亲代细胞系.结论 成功建立了一株耐紫杉醇的A549/Taxol,并呈多药耐药特性.     

槲寄生碱联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的生长抑制及诱导凋亡作用

目的 探讨槲寄生碱、顺铂及两者联用对人肺腺癌细胞A549增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法 MTT法观察槲寄生碱、顺铂及两者联用对人肺腺癌A549细胞增殖的影响;DAPI染色观察槲寄生碱、顺铂及两者联合作用时A549细胞凋亡形态,流式细胞术检测槲寄生碱、顺铂和两者联合应用对人肺腺癌A549凋亡和细胞周期的影响.结果 ①槲寄生碱、顺铂均能抑制人肺腺癌细胞A549的生长,并表现为浓度和时间的依赖性:槲寄生碱0.0625、0.125mg/mL分别与顺铂1、2mg/L联合24、48、72 h的抑制率显著高于单用顺铂、槲寄生碱组(均为P<0.01),两者呈现出相加的抗瘤效果.②DAPI染色后槲寄生碱纽、顺铂纽和联合用药组A549肺癌细胞均表现出典型的细胞凋亡特征.③槲寄生碱和顺铂均可在一定程度上诱导细胞凋亡,两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用显著增强(P<0.01).④槲寄生碱将细胞周期阻滞在G0/G1期,顺铂将细胞周期阻滞在S期.结论 槲寄生碱、顺铂均可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖、诱导细胞的凋亡,槲寄生碱可明显提高顺铂对A549细胞的杀伤效果.两者具有明显的相加作用.     

CIK对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP杀伤效应及耐药逆转作用

目的探讨CIK细胞对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP体外杀伤效应及逆转作用。方法用MTT法分别检测顺铂、CIK细胞、CIK联合顺铂对人肺腺癌细胞A549及人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的杀伤活性,计算耐药倍数,逆转倍数。结果①顺铂对人肺腺癌细胞A549及A549/DDP的50%杀伤浓度(IC50)分别为1.823g/mL、6.392 g/mL,差异有统计学意义(P<0.05),人肺腺癌细胞A549/DDP对顺铂的耐药倍数(IR)为3.506。②CIK对人肺腺癌细胞A549及A549/DDP均有杀伤作用,其IC50分别7.657×105个细胞/mL、7.955×105个细胞/mL,差异无统计学意义(P>0.05)。③不同浓度的CIK细胞(1×105,2×105and3×105个/mL)与人肺腺癌细胞共培养后,再加顺铂,其IC50值分别降至1.743g/mL、1.336g/mL、0.883g/mL,差异有统计学意义(P<0.05);计算逆转倍数(FR)分别为(2.369、3.091、4.677)。结论①人肺腺癌细胞A549/DDP较A549对顺铂有明显的耐药性。②CIK对人肺腺癌细胞A549及A549/DDP均有杀伤作用,杀伤效果在两种细胞中无明显差异。③无毒剂量CIK联合顺铂作用于人肺腺癌细胞A549/DDP,可以增加顺铂对耐药细胞的杀伤活性。逆转倍数随着CIK密度的增加而增大,说明CIK细胞能部分逆转耐药细胞A549/DDP对顺铂的耐药性。     

紫杉醇、顺铂及康莱特对Lewis肺癌细胞株抑制作用的实验研究

目的:研究紫杉醇、顺铂、康莱特单用及联用对Lewis肺癌细胞株的增殖抑制作用。方法:以不同浓度的紫杉醇、顺铂、康莱特单独及联合处理Lewis肺癌细胞株,24小时后MTT法测定细胞生长抑制作用,应用金氏公式进行联合用药分析。结果:紫杉醇、顺铂、康莱特对Lewis肺癌细胞均有不同程度的增殖抑制作用(P<0.05),但当康莱特的浓度增加到20μl/ml时抑制率不再增加,因此联合用药组中康莱特浓度固定为20μl/ml。作用24小时后紫杉醇、顺铂的IC50分别是15.42、2.59。两种或三种药物联用后对Lewis肺癌细胞株的抑制率显著增加,明显高于单一用药组(P<0.05),其中6μg/ml的紫杉醇与15μl/ml的康莱特联用时,其抑制率接近于12μg/ml的紫杉醇单用药;2μg/ml的顺铂与15μl/ml的康莱特联用时,其抑制率接近于4μg/ml的顺铂单用药,但紫杉醇联用顺铂组与三药联用组的作用差异无显著性(P>0.05)。结论:紫杉醇、顺铂能明显抑制Lewis肺癌细胞的增殖,与康莱特联合用药时可产生较好的协同作用,并且能够减少常规化疗药物的用量。     

抑制ERCC1基因对肺癌细胞顺铂敏感性的影响

目的 探讨RNA干扰切除修复交叉互补基因(ERCC)1对肺腺癌细胞A549顺铂敏感性的影响.方法 体外设计合成针对ERCC1基因的小干扰RNA(siRNA).转染肺腺癌细胞A549,应用RT-PCR、Western印迹和免疫细胞化学方法检测转染后ERCC1基因mRNA和蛋白的改变,应用四唑盐比色(MTT)法检测干扰ERCC1基因后A549细胞对顺铂敏感性的变化.结果 转染针对ERCC1基因的siRNA后24、48、72 h,A549细胞ERCC1基因mRNA和蛋白水平显著下降;关闭ERCC1基因后,A549细胞对顺铂的敏感性增加3.07倍.结论 RNA干扰ERCC1基因能增加肺腺癌A549细胞对顺铂的敏感性.     

Smac在顺铂促非小细胞肺癌细胞株凋亡中的作用

目的 探讨Smac在顺铂诱导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株凋亡中的作用.方法 不同浓度顺铂刺激NSCLC细胞株A549,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,Annexin V/P双染流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blotting检测Smac mRNA及蛋白表达.结果 顺铂对A549细胞株具有增殖抑制作用,且呈浓度依赖性.顺铂对A549细胞株具有促凋亡作用,且呈浓度依赖性.顺铂作用后,Smac的mRNA及蛋白表达增加,且呈浓度依赖性.结论 smac在顺铂诱导NSCLC细胞株A549凋亡过程中,可能起到促凋亡的作用.     

MTT法检测非小细胞肺癌对紫杉醇的敏感性

目的 探讨四氮唑蓝比色分析法（MTT法）用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为非小细胞肺癌临床化疗用药提供参考.方法 培养肺癌A549细胞,加入不同浓度的紫杉醇,作用24、48、72、96 h,用MTT法计算细胞生长抑制率,测定其对肿瘤细胞的体外敏感性.结果 不同浓度的紫杉醇对A549细胞的生长均有一定的抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性.结论 MTT法检测有助于指导临床选择化疗药物剂量,提高化疗效果,减少毒副作用,为非小细胞肺癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据.     

罗勒多糖对顺铂等三种化疗药物抑瘤增效作用的实验研究

目的 :研究罗勒多糖与顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶三种化疗药物合用对不同组织来源的肿瘤细胞株的生长抑制作用,以期明确罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效适用范围。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株、人喉癌Hep-2细胞株和人胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测定罗勒多糖对顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶抑制上述肿瘤细胞生长的增效作用。结果:罗勒多糖联合顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶共同作用48 h可明显提高三种化疗药物对A549细胞、Hep-2细胞和SGC-7901细胞的生长抑制作用,且其作用具有一定的剂量依赖性。结论:罗勒多糖对多种化疗药物抑制不同组织来源的肿瘤细胞株的生长具有增效作用,提示罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效具有广泛适用性。罗勒多糖是一种潜在的化疗增效药物,也可以作为化疗辅助的功能食品开发应用。     

顺铂联合5-氟尿嘧啶对肺癌A549细胞生长的影响

目的揍讨顺铂和5-氟尿嘧啶（5-Fu）在体外联合用药对人肺癌A549细胞的生长抑制和促凋亡作用。方法运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测顺铂和5-FU单独及共同作用48h后对A549细胞生长的影响,每个药物浓度设6个复孔,实验重复3次,结果取平均值;并用流式细胞术检测两药合用对细胞周期和凋亡的影响。结果MTT法结果显示顺铂和5＂FU联合使用对A549细胞的生长抑制率高于两药单独使用（P〈0．01）;流式细胞仪检测可见两药合用后晚期凋亡明显增多,S期细胞增多（P〈0．01）。结论在体外实验中,顺铂与5-FU联合使用能够更好地抑制肺癌A549细胞的增殖,并可改变细胞周期分布,促进细胞凋亡。     

MT1X siRNA对肺癌A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响

目的探讨金属硫蛋白1X（MT1X）在肺癌耐药细胞株（A549／DDP）顺铂耐药中的作用。方法通过化学合成针对MT1X的siRNA段抑制其在A549／DDP中的表达,实时定量聚合酶链反应（PCR）及WB检测干扰效果,M1Tr及平板克隆形成实验检测干扰前后细胞对顺铂的药物敏感性变化;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果针对MT1X的siRNA片段能在RNA及蛋白水平有效抑制其在A549／DDP中的表达;与对照组相比,MT1X表达被抑制后,肿瘤细胞对顺铂的敏感性明显升高;增殖被抑制,平板克隆形成率明显降低（P〈O．05）,细胞凋亡率显著增高（P〈0．05）。结论针对MT1X的siRNA片段可部分逆转肺癌细胞（A549／DDP）对顺铂的耐受,为提高肺癌的化疗效率提供了一种新方法。     

榄香烯对人肺癌A549细胞中eIF4E表达的影响

目的研究榄香烯对肺癌A549细胞真核起始因子4E(eIF4E)蛋白表达的影响及其作用机制。方法浓度为20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL和120μg/mL的榄香烯、顺铂以及联合处理细胞后,Western blot法检查eIF4E蛋白表达,MTT法观察榄香烯对A549细胞的抑制作用,TUNEL法检测细胞凋亡。结果各实验组eIF4E蛋白表达水平在24 h和48 h均显著降低;MTT法、TUNEL法结果显示,榄香烯对A549细胞的抑制率及凋亡率呈浓度依赖性。结论榄香烯明显抑制肺癌A549细胞生长,其机制可能与下调eIF4E表达有关。     

洛伐他汀对3种肺癌细胞株增殖的抑制作用

目的：观察洛伐他汀对肺癌细胞体外增殖的抑制作用。方法：采用MTT法，观察不同浓度的洛伐他汀分别作用24、48、72h对3种人肺癌细胞（A549，NCL—H460，PGCL3）生长增殖的影响。结果：洛伐他汀用药24、48、72h对3种肺癌细胞的生长增殖均有不同程度的抑制作用。洛伐他汀作用72h对3种肺癌细胞株（A549，NCL—H460，PGCL3）的IC50分别是39．6、28.3、35．6 μmol／L。结论：洛伐他汀能有效抑制肺癌细胞的体外增殖，并且呈时间依赖性和浓度依赖性。     

吉非替尼联合用药对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株的实验研究

目的：研究吉非替尼联合用药对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株的影响。方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测和培养肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株,待24 h、48 h、72 h后采用不同浓度的吉非替尼、奥曲肽、顺铂、5-FU进行单用和联用处理,流式细胞术检测细胞凋亡率,分析药物的增效效果。结果联合用药对肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株可起到协同抑制作用,与单独用药组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。联合用药组的肺癌敏感 A549、耐药A549/GR 细胞株培育48 h 后的IC50=（5.3±0.5）、（5.4±0.8） mg/L,单药组IC50=（20.1±1.2）、（20.3±1.4） mg/L,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株后凋亡率差异明显,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论吉非替尼联合用药对细胞的增生具有协同抑制作用,对其他肺癌的治疗也具有一定的效果。