稳定干扰长链非编码RNA LINC01224结直肠癌细胞株的建立及其对细胞凋亡的影响

目的 建立稳定干扰长链非编码RNA(lncRNA) LINC01224表达的结直肠癌LoVo和SW620细胞株,并探讨下调LINC01224表达对结直肠癌细胞凋亡的影响。方法 使用GEPIA2数据库分析LINC01224在结直肠癌组织中的表达情况;qPCR法检测LINC01224在10种人结直肠癌细胞中的表达水平。3种不同的LINC01224 siRNA分别转染人结直肠癌LoVo细胞,取抑制LINC01224表达效果最显著的siRNA序列构建LINC01224 shRNA慢病毒载体。在HEK293T细胞内包装成重组慢病毒颗粒,再感染LoVo和SW620细胞,经嘌呤霉素筛选后以有限稀释法获得稳定干扰LINC01224的单克隆细胞。MTS法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 LINC01224在结直肠癌组织中的表达高于正常结直肠组织,其在10种结直肠癌细胞中的表达也高于正常结直肠上皮细胞HCOEPic。siRNA-3对LoVo细胞内LINC01224表达的抑制率高于siRNA-1和siRNA-2。故选择siRNA-3设计LINC01224 shRNA。与对照组(sh-NC组)...     

洛伐他汀对高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期和增殖的影响

目的 探讨洛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期和增殖的影响.方法 以MTT法检测洛伐他汀对HO-8910PM细胞增殖的影响;流式细胞术分析洛伐他汀对HO-8910PM细胞周期的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变.结果 洛伐他汀对HO-8910PM细胞增殖有明显的抑制作用,并使G0/G1期细胞增多,G2/M、S期细胞减少,32μmol/L用药48h有指示细胞凋亡的亚G1期"凋亡峰"出现.结论 洛伐他汀阻滞HO-8910PM细胞于G0/G1期,并能有效抑制癌细胞的体外增殖,以上作用均有剂量和时间依赖性.     

辛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移及Ras表达的影响

目的：研究辛伐他汀（SIM）通过抑制法尼基化途径对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移相关能力及Ras信号转导作用的影响。方法：以MTT法、流式细胞技术分析检测SIM对HO-8910PM细胞生长增殖和细胞周期的影响；用Transwell小室法及细胞粘附人工重组基底膜实验检测SIM对HO-8910PM细胞侵袭粘附能力的影响；RT-PCR、Western blot法检测SIM对HO-8910PM细胞Ras、ERK2表达水平的影响；采用7-32P掺人法检测MAPK活性。结果：（1）4～64μmol／L的SIM处理24～72h后，HO-8910PM细胞的生长增殖受到一定的抑制；各给药组内G1期细胞明显增多，G2、S期细胞减少，用药浓度高时有指示细胞凋亡的亚G1期“凋亡峰”出现。以上作用均有浓度一效应和时间依赖关系。（2）SIM能够明显地抑制HO-8910PM细胞的体外趋化运动、侵袭和粘附能力（P〈O．05）。（3）随用药浓度的增高，K-RasmRNA的表达没有明显的变化，细胞膜上Ras蛋白水平逐渐降低，胞浆中Ras蛋白水平逐渐增加，总Ras蛋白的表达变化不大；SIM能明显下调HO-8910PM细胞的ERK2蛋白表达。（4）激酶活性检测结果显示，SIM能明显抑制MAPK活性（P〈O．01）。结论：SIM能抑制人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭、运动和粘附能力。SIM抗肿瘤转移的作用机制与它们抑制某些蛋白（如Ras蛋白）的法尼基化反应有关。SIM能抑制Ras蛋白的法尼基化即抑制它锚定于细胞膜上，抑制了其生物活性，从而影响Ras-MAPK信号转导作用和其下游靶蛋白。     

槲皮素精氨酸复合物的制备研究

目的：制备水溶性槲皮素精氨酸复合物（QAC），拓宽槲皮素的给药途径。方法：取一定量槲皮素（QUE）和L－精氨酸在乙醇中回流制备QAC，通过胶束纸色谱，紫外吸收光谱、红外吸收光谱和X射线衍射图谱对QAC进行结构鉴定。结果：摩尔比为1：1的QUE和L－精氨酸形成了QAC，并且QAC常温下稳定存在。与QUE比较，QAC的水溶性明显增大，仍然对抑制细胞生长具有较强的活性。结论：该制备方法简捷实用，有助于提高QUE的生物利用度。     

中药厚朴及其提取工艺的研究概况

对中药厚朴的化学成分及其药理作用进行了综述，着重总结了厚朴有效成分提取方法的研究进展，为全面开发利用中药厚朴提供参考。     

急性单核细胞白血病全基因组微小RNA的表达谱分析

目的研究急性单核细胞白血病（AMoL）全基因组的微小RNA（miRNA）表达谱。方法应用Illumina高通量测序技术对10 例AMoL 患者和10 例非恶性血液病患者骨髓样本的miRNA 表达水平进行检测,分析两者的表达差异,并通过茎环引物实时荧光定量PCR（Stem-loop qPCR）技术对部分Illumina 测序结果进行验证。结果两组样本共发现差异表达的miRNA 285个,其中,199 个miRNA 在AMoL组呈表达上调,86 个miRNA呈表达下调。6 个miRNA 的Stem-loop qPCR 验证结果与其测序结果具有相同的变化趋势。结论miR-126-3p 和miR-29b-3p 可作为潜在的分子靶点用于AMoL发病机制的进一步研究。     

水溶性高良姜素精氨酸酯的制备研究

目的制备水溶性高良姜素衍生物,提高高良姜素的生物利用度。方法采用过量的L-精氨酸与高良姜素在乙醇中回流反应,反应混合物经柱层析分离纯化,得3个水溶性化合物B,C,D。结果经TLC,UV,IR谱初步分析,确定B,C,D分别为:高良姜素一精氨酸酯、高良姜素二精氨酸酯、高良姜素三精氨酸酯。高良姜素,B,C,D抑制红白血病K562细胞生长的IC50(μg/m l)值分别为:26.2,40.4,47.9,60.5。结论此高良姜素水溶性衍生物的制备反应为一酯化过程;但高良姜素结构中羟基封闭不利于其生物活性的保持。     

半边旗有效成分5 F对腹膜炎小鼠血清NO和细胞因子的影响

目的：研究半边旗有效成分贝壳杉烷型二萜类化合物5F对腹膜炎小鼠血清一氧化氮（NO）和细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α、MCP-1的影响。方法预先给予50和100 mg·kg-15F溶液3 d后,腹腔注射50 mg·kg-1酵母多糖建立腹膜炎模型,Griess法测一氧化氮含量,流式细胞术检测IL-6、IL-10、TNF-α和MCP-1的水平。结果与模型组比较,5F可以降低腹膜炎小鼠血清一氧化氮水平（ P﹤0.05）,减少IL-6、IL-10、TNF-α和MCP-1含量（P﹤0.05或P﹤0.01）。结论5F可以有效减少酵母多糖诱导的腹膜炎小鼠血清一氧化氮、TNF-α、IL-6、IL-10和MCP-1含量。     

洛伐他汀对3种肺癌细胞株增殖的抑制作用

目的：观察洛伐他汀对肺癌细胞体外增殖的抑制作用。方法：采用MTT法，观察不同浓度的洛伐他汀分别作用24、48、72h对3种人肺癌细胞（A549，NCL—H460，PGCL3）生长增殖的影响。结果：洛伐他汀用药24、48、72h对3种肺癌细胞的生长增殖均有不同程度的抑制作用。洛伐他汀作用72h对3种肺癌细胞株（A549，NCL—H460，PGCL3）的IC50分别是39．6、28.3、35．6 μmol／L。结论：洛伐他汀能有效抑制肺癌细胞的体外增殖，并且呈时间依赖性和浓度依赖性。     

5F-Na注射液对人肝癌MHCC97L细胞毒性及凋亡的影响

目的 探讨5F-Na对低转移型人肝癌MHCC97L细胞的抗癌效应.方法 不同浓度5F-Na注射液(20、40、80μg·mL-1)处理MHCC97L细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;Annexin V-EGFP染色及半胱氨酸蛋白酶-3活性检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期.结果 5F-Na注射液对MHCC97L细胞增殖抑制作用呈明显的时间、剂量依赖关系;不同浓度5F-Na注射液作用细胞24 h后,细胞凋亡比例较对照组明显升高(P<0.05);并可使细胞阻滞于G2期.结论 5F-Na注射液抑制MHCC97L增殖与阻滞细胞于G2期,促进凋亡有关.