二甲双胍对肺腺癌耐厄洛替尼细胞株A549ER的耐药逆转作用

目的 探讨二甲双胍对人肺腺癌耐厄洛替尼细胞株A549ER的耐药逆转作用.方法 将人肺腺癌细胞株A549细胞设为亲本组;将耐厄洛替尼细胞株A549ER细胞分为空白对照组、厄洛替尼组、二甲双胍组和联合用药组（厄洛替尼±二甲双胍组）,采用CCK8法检测不同浓度药物作用下各组细胞的50％抑制浓度（IC50）,计算耐药倍数和逆转倍数.采用流式细胞术检测各组A549ER细胞的凋亡率和细胞周期,计算增殖指数.结果 在0 ～ 20 mmol/L浓度范围内,二甲双胍对A549细胞及A549ER细胞均有生长抑制作用,抑制率随二甲双胍浓度升高而增加.厄洛替尼对A549细胞和A549ER的IC50分别为15.15 μmol/L和118.8 μmol/L,A549ER的耐药倍数为7.84.联合用药组A549ER细胞IC50为73.55 umol/L,耐药倍数为4.85.二甲双胍对A549ER厄洛替尼耐药性的逆转倍数为1.62.空白对照组、厄洛替尼组、二甲双胍组和联合用药组的凋亡率分别为（5.53±3.00）％、（7.51±3.73）％、（10.25 ±4.23）％和（16.92±1.20）％.根据细胞周期结果计算空白对照组、厄洛替尼组、二甲双胍组和联合用药组的增殖指数分别为0.84±0.15、0.78 ±0.10、0.73±0.08和0.60 ±0.09.结论 A549ER细胞较A549细胞对厄洛替尼有明显的耐药性;二甲双胍对A549ER细胞厄洛替尼的耐药性具有逆转作用;二甲双胍通过抑制细胞生长、促进细胞凋亡、减缓细胞周期进程等途径逆转A549ER细胞耐药.     

Livin异构体基因转染对肺腺癌A549细胞生长及放化疗敏感性的影响

目的研究转染Livin α、β两种异构体基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响。方法基因转染获得稳定表达Livinα和β的A549细胞克隆，逆转录一聚合酶链反应及免疫荧光化学法了解Livin α、β在转染细胞中基因水平和蛋白水平的表达情况；用平板克隆形成实验研究细胞生长情况；甲基偶氮唑蓝法研究细胞对放、化疗的敏感性；细胞周期分析法了解细胞凋亡情况。结果与转染前比较，基因转染后，阳性细胞尤其是表达Livin α的A549细胞克隆形成能力提高约20％、倍增时间缩短5～6h（P〈0．05），对多种化疗药物和放射线敏感性降低（P〈0．01），10Gy放射线照射下仅有0．2％细胞发生凋亡。结论Livin尤其是Livin α参与肺癌的发生发展，是肺癌细胞对放、化疗耐受的重要机制之一。     

非小细胞肺癌脑转移综合治疗进展

脑部是肺癌最常见的远处转移器官之一,是导致肺癌治疗失败的常见原因。近年来,随着肺癌发病率的上升,以及各种诊疗技术的进步,肺癌脑转移的发生呈逐年上升趋势,有文献报道其发生率为25．4％-65．0％,占脑转移癌的40％-60％。     

X射线对人肺腺癌A549细胞增殖及线粒体DNA基因表达的影响

目的 研究X射线辐射对人肺腺癌A549细胞增殖及线粒体DNA(mtDNA)基因表达的影响。方法 8 MV X射线以4 Gy的吸收剂量照射A549细胞,照射后不同时间检测细胞周期分布和凋亡率,电镜下观察细胞超微结构,人mtDNA基因表达谱芯片检测靶基因的表达变化。结果 照射后12 h即出现G₂/M期的阻滞,凋亡率在照射后48 h达到峰值,透射电镜下可见凋亡的形态改变。X射线照射后mtDNA编码基因表达呈普遍下调,包括12 h组的1种tRNA和4种mRNA基因、24 h组的2种tRNA和4种mRNA基因、48 h组的13种mRNA和2种rRNA及4种tRNA基因、72 h组的11种mRNA和2种rRNA基因。结论 X射线辐射可导致A549细胞G₂/M期阻滞,mtDNA编码基因的普遍低表达可能和辐射诱导凋亡相关。     

NF-κB、cyclin D1和p27在非细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨核转录因子-KB（NF-κB）、细胞周期素DI（cyclin D1）和p27在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法：应用免疫组化S-P法检测58例非小细胞肺癌（NSCLC）和15例正常肺组织中NF-κBp65、cyclin D1、p27的表达。结果：NSCLC组织中NF-κBp65和cyclin D1的表达明显高于正常肺组织中的表达（P〈0．01），p27表达则明显低于正常肺组织（P〈0．01）。NF-κBp65表达与NSCLC瘤体大小、淋巴结转移、临床分期密切相关（P〈0．05）cyclin D1表达与瘤体大小、肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期密切相关（P〈0．05）；p27表达与瘤体大小、肿瘤分化密切相关（P〈0．05）。NF-κBp65与cyclin D1在NSCLC组织中的表达呈正相关（P〈0．05），cyclin D1与p27的表达呈负相关（P〈0．05），NF-κBp65与p27的表达无相关性（P〉0．05）。结论：NF-κB、cyclin D1、p27与非小细胞肺癌的发生、发展有关，检测三种蛋白的表达可以间接判断NSCLC的生物学行为。     

非小细胞肺癌患者癌组织与外周血淋巴细胞p53蛋白表达相关性研究

目的 探讨p53蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织和外周血淋巴细胞(PBL)中的表达及其相关性,以期建立更为实用简便的化疗敏感性预测指标.方法 采用免疫荧光化学染色法检测49例手术NSCLC患者癌组织和PBL中突变p53蛋白的表达,并以健康人PBL中突变p53蛋白表达作为阴性对照.结果 p53蛋白在癌组织、NSCLC患者PBL和健康人PBL中的表达分别为63.26%(31/49)、59.18%(29/49)和5%(1/20),其中癌组织的p53蛋白表达与NSCLC患者PBL的表达呈正相关,20例健康人PBL中p53蛋白表达阳性率显著低于NSCLC患者(P＜0.01).p53的表达在NSCLC不同临床病理类型及分期间差异无统计学意义(P>0.05),而在有无淋巴结转移患者间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 检测NSCLC患者PBL中p53蛋白表达可间接反应癌组织的p53蛋白表达状况.     

31例中国汉族人外周血白细胞线粒体DNA高变Ⅰ区序列特殊变异分析

目的通过分析线粒体DNA序列,进一步了解中国汉族人线粒体基因多态性的特点.方法一步法制备31个无亲缘关系的中国汉族个体的外周血白细胞线粒体DNA,PCR扩增包括非编码高变Ⅰ区在内的1 528 bp核酸片段,并直接测序,分析高变Ⅰ区序列变异情况.结果高变Ⅰ区16 223和16 362核苷酸位点,分别出现高频率C→T变异(70.97%,22/31)及T→C变异(48.39%,15/31).结论线粒体DNA第16 223核苷酸位点T和第16 362核苷酸位点C很可能是中国汉族人特异性的单核苷酸多态性位点.     

103例非小细胞肺癌p16INK4a蛋白表达及其临床意义

目的研究p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学S-P方法检测103例NSCLC癌组织标本中p16INK4a蛋白表达,同时以20例肺部炎症病变组织做对照.结果 103例标本中,p16INK4a阳性表达58例,阴性表达45例,表达阴性率为43.69%,其中鳞癌、腺癌、肺泡癌中p16INK4a表达阴性率分别为58.82% (20/34)、39.39% (13/33)、33.33% (12/36),且鳞癌与肺泡癌之间p16INK4a表达阴性率差异有显著意义(P<0.01).临床Ⅲ Ⅳ期病例p16INK4a蛋白表达阴性率为60.71%,明显高于临床Ⅰ Ⅱ期病例(35.14%),差异有显著性意义(P<0.05).结论 p16INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌中常见,提示p16INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌的发生、发展中起重要作用,它有可能成为预测肺癌患者病程进展的指标之一.