趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6体外促前列腺癌增殖、侵袭作用

目的:探讨趋化因子及其受体CXCL16/CXCR6在人前列腺癌细胞系体外增殖侵袭中的作用。方法:免疫细胞化学技术检测CXCL16/CXCR6在人前列腺癌细胞系DU145中的表达;MTT法分析CXCL16/CXCR6对DU145细胞的促增殖作用;迁移、侵袭实验分析CXCL16对DU145细胞体外侵袭能力的调节作用。结果:DU145既表达CX-CR6蛋白,也表达CXCL16蛋白;外源性CXCL16可明显提高DU145细胞体外增殖活力和促进DU145细胞的体外迁移、侵袭能力,CXCL16中和抗体可以有效消除CXCL16对细胞的促侵袭作用,但CXCL12或CXCR4中和抗体不能阻断CXCL16的促侵袭作用。结论:CXCL16/CXCR6可能是参与前列腺癌转移的重要趋化因子配受体对。     

CXCR4 shRNA对胶质瘤细胞U251增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨CXCR4 shRNA对胶质瘤细胞U251体外增殖和侵袭能力的影响,为CXCR4 shRNA治疗胶质瘤提供实验依据. 方法 用脂质体LipofectimineTM2000将CXCR4-shRNA转染U251细胞,MTT实验检测转染细胞的增殖,Transwell侵袭实验检测转染细胞的迁移和侵袭能力. 结果 与转染非特异的pGPU6/GFP/NC组和未转染组比较,转染CXCR4-shRNA载体pGPU6/GFP/Rac 1-421组的U251细胞CXCR4 mRNA显著降低(P＜0.05),并且细胞体外增殖能力减弱(P＜0.05),侵袭到滤膜底面的细胞数为36.67±9.76,分别低于对应的pGPU6/GFP/NC组和未转染组(P＜0.05). 结论 CXCR4 shRNA载体pGPU6/GFP/Rac1-421可下调U251细胞CXCR4的表达,抑制U251细胞的增殖和迁移侵袭能力,提示CXCR4在胶质瘤发展过程中具有重要作用.     

趋化因子轴CXCL16/CXCR6在人前列腺癌转移中的作用

目的 探讨趋化因子轴CXCL16/CXCR6在人前列腺癌转移机制中的作用.方法 采用免疫组织化学技术分析CXCL16/CXCR6蛋白在人前列腺癌和骨组织的表达;逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学技术分析CXCR6在人前列腺癌细胞系PC3和LNCap中的表达;迁移、侵袭试验分析外源性CXCL16对Pc3和LNCap细胞体外侵袭能力的调节作用.结果 人前列腺癌组织表达CXCR6蛋白,不表达CXCL16蛋白;正常骨组织表达CXCL16蛋白;PC3和LNCap细胞在基因和蛋白水平表达CXCR6,其mRNA相对转录水平分别为0.38±0.054、0.41±0.019;经过外源性CXCL16处理后,PC3和LNCap的体外迁移、侵袭能力明显提高(侵袭细胞数分别为211.50±5.60、89.25±3.31).且CXCL12或CXCR4中和抗体不能阻断CXCL16的促侵袭作用.结论 CXCL16/CXCR6可能是前列腺癌骨转移的另一种独立趋化因子轴.     

CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭和转移影响的实验研究

目的 探讨CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭及转移的影响及可能机制。方法 设计合成CXCR4特异性短发夹状RNA(shRNA)插入pSilencer载体,转染人高转移性黑色素瘤细胞株MV3、RT-PCR和Western blot法检测shRNA对靶基因CXCR4表达的影响。利用Transwell小室模型检测细胞体外侵袭能力,MTT法检测细胞体外增殖能力。通过裸鼠尾静脉瘤细胞注射,将转染后的细胞接种至裸鼠皮下,构建黑色素瘤转移模型,观察肿瘤生长情况。结果 CXCR4-shRNA能有效下调CXCR4基因的表达,降低黑色素瘤细胞增殖、体外侵袭及转移能力。RT-PCR及细胞免疫荧光显示,转染CXCR4-shRNA的黑色素瘤瘤MV3细胞系MMP-2表达下调;免疫组化结果显示,实验组裸鼠黑色素瘤瘤体及转移灶组织MMP-2的表达低于对照组。结论 shRNA介导的CXCR4基因沉默在体外实验能够显著抑制黑色素瘤细胞的生长和增殖活性,减弱体外侵袭能力,且体外产生抑瘤效应,明显降低肝、脑器官转移能力和定向肺转移能力。其机制可能与SDF-1/CXCR4信号途径阻断,进而抑制MMP-2的表达有关。     

趋化因子基质细胞衍生因子-1及其受体对胃癌腹膜转移潜能的影响

目的 探讨趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及趋化因子受体4(CXCR4)对胃癌腹膜转移潜能的影响.方法 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌细胞NUGC4及间皮细胞HMrSV中CXCR4和SDF-1 mRNA的表达.采用MTT实验检测NUGC4细胞增殖能力的变化,采用间皮细胞黏附实验及间皮细胞迁移实验评价体外培养的NUGC4细胞与间皮细胞发生黏附的能力及其穿越间皮细胞发生迁移的能力.通过建立裸鼠胃癌腹膜种植瘤模型,评价NUGCA细胞腹膜肿瘤生成能力及荷瘤裸鼠生存时间的变化.结果 NUGC4细胞表达较高强度的CXCR4mRNA,而间皮细胞表达高强度的SDF-1 mRNA.抗CXCR4单抗对NUGC4细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜0.05);SDF-1可促进NUGC4细胞与间皮细胞黏附及穿越间皮细胞发生迁移,抗CXCR4单抗处理可显著抑制NUGC4细胞的黏附及迁移能力(P＜0.05).体内实验结果显示,CXCR4拮抗剂AMD3100治疗组裸鼠的平均生存时间显著长于对照组[(43.8±2.8)vs(28.2±2.5)d,P＜0.01],瘤结节数目显著低于对照组[(64.6±8.2)vs(103±12.4),P＜0.01].结论 趋化因子SDF-1及其受体CXCR4参与胃癌腹膜转移过程,与肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞-问皮细胞问的黏附和肿瘤细胞迁移等步骤密切相关;干扰SDF-1/CXCR4生物学轴可以作为胃癌腹膜转移的潜在治疗策略.     

沉默CXCR4基因表达抑制胰腺癌增殖和侵袭的体外研究

目的 利用RNAi技术构建CXCR4 shRNA表达载体,观察CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖及侵袭能力的变化.方法 在不同分化程度胰腺癌细胞株中筛选出CXCR4高表达胰腺癌细胞株,RNAi技术构建CXCR4shRNA表达载体,转染胰腺癌CXCR4高表达细胞Miapaca-2并应用G418筛选出稳定表达株,Real-time PCR、Western blot实验观察RNAi对CXCR4基因的抑制效率;MTT实验检测CXCR4基因干扰后胰腺癌细胞增殖,应用Transwell侵袭小室观察CXCR4干扰对胰腺癌细胞侵袭转移力的影响.结果 胰腺癌细胞株Miapaca-2 CXCR4表达异常增高,特异性CXCR4基因沉默能够在基因和蛋白水平稳定、高效、特异地抑制CXCR4的表达,抑制效率达70％以上.特异性CXCR4 shRNA能够抑制细胞生长,细胞达到对数生长期的时间延长(P＜0.05).Transwell实验证明CXCR4基因干扰后细胞侵袭能力减低(P＜0.05),即使SDF-1的刺激也不能够使细胞侵袭能力增加.结论 成功构建了针对胰腺癌细胞CXCR4的siRNA载体;CXCR4基因沉默能抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和成瘤能力.     

CXCL10、CXCR3及T细胞亚群在进展期白癜风患者外周血中的表达及复方中药对其影响

目的 检测进展期白癜风患者外周血中T细胞亚群及趋化因子配体10(CXCL10)及其受俸3(CXCR3)的表这情况,并探索复方中药对其影响.方法 采用流式细胞仪检测治疗前后白癜风患者外周血中T细胞亚群的细胞比例,ELISA法检测治疗前后白癜风患者外周血清中CXCL10及CXCR3水平.结果 服用复方中药1个月后,白癜风患者外周血中CD3+ CD4+、CD3+ CD8+T细胞比例均较治疗前升高(P＜0.05).治疗前外周血清中CXCL10水平较健康对照组明显升高(P＜0.01),治疗后较治疗前明显降低(P＜0.05).治疗前外周血清中CXCR3水平较健康对照组明显升高(P＜0.01),治疗后仍明显高于健康对照组(P＜0.01).结论 CXCL10、CXCR3表达水平及T细胞亚群比例异常可能与白癜风的发病相关,本研究所用的复方中药可能通过调节T细胞亚群、CXCL10及CXCR3的表达水平发挥其治疗作用.     

过表达趋化因子受体4的内皮祖细胞影响血管平滑肌细胞迁移、增殖

目的 研究过表达趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移、增殖的影响.方法 分离培养并鉴定大鼠骨髓来源EPCs.CXCR4的重组腺病毒感染EPCs后,流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测细胞膜CXCR4受体及mRNA表达,CCK-8法、Transwell法分别检测EPCs增殖活性、迁移能力.建立过表达CXCR4的EPCs与VSMCs非接触共培养模型,Transwell法、CCK-8法检测EPCs对VSMCs的迁移、细胞存活的影响.结果 CXCR4重组腺病毒感染EPCs 48 h后,EPCs细胞膜CXCR4受体和mRNA表达明显增高(P＜0.01),过表达CXCR4对EPCs增殖活性无明显影响,但可增强EPCs定向迁移能力(P＜0.01).共培养模型中,SDF-1α诱导下,CXCR4组VSMCs迁移、细胞存活率明显降低(P＜0.05),无SDF-1α诱导下空白对照组、GFP组及CXCR4组VSMCs的迁移、细胞存活率整体高于SDF-1α诱导下各组(P＜0.05).结论 过表达CXCR4可增强EPCs的迁移能力,在SDF-1/CXCR4调控轴中加强EPCs对VSMCs迁移和增殖的抑制作用,可用于防治血管再狭窄的细胞治疗.     

COMMD7调控肝癌干细胞间充质-上皮转化过程抑制其侵袭转移能力

目的 探讨抑制COMMD7基因后对肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)侵袭转移能力的影响及其机制.方法 使用shRNA慢病毒转染抑制COMMD7在LCSCs中的表达,粘附、Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力,鬼笔环肽染色检测细胞形态学特征,Western blot检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达.结果 抑制COMMD7基因表达可以显著降低LCSCs的侵袭迁移能力,对照组与转染组粘附相对细胞量为(1.00±0.12),(2.35±0.20),转染组粘附细胞数量显著增加(P＜0.05).对照组与转染组每视野迁移相对细胞量为(1.00 ±0.04),(0.24±0.03),每视野侵袭相对细胞量为(1.00 ±0.05),(0.24±0.04),转染组迁移侵袭细胞数明显降低(P＜0.05),同时导致细胞表现出低侵袭迁移能力的形态学变化,上述改变伴随了间充质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)相关分子E-cadherin表达上升(P＜0.05),N-cadherin、Vimentin表达下调(P＜0.05).结论 COMMD7可能通过调控MET过程抑制LCSCs的侵袭转移能力.     

CXCR7在胃癌细胞中的表达及对SGC-7901细胞迁移及侵袭的影响

目的 探讨趋化因子受体7(CXCR7)在不同分化程度的胃癌细胞系中的表达以及siRNA沉默CXCR7后对胃癌SGC-7901细胞迁移及侵袭能力的影响。方法 体外培养5种人胃癌细胞系:未分化腺癌HGC-27、低分化黏液腺癌MGC-803、低分化腺癌BGC-823、中分化腺癌SGC-7901和高分化腺癌MKN-28。采用Western blot及RT-PCR法分别检测CXCR7的蛋白及mRNA表达。应用脂质体转染siRNA的方法沉默SGC-7901细胞CXCR7的表达,并采用其配体基质细胞衍生因子-1（SDF-1）干预,实验分为4组:阴性对照siRNA(NC siRNA组), NC siRNA+SDF-1组,CXCR7 siRNA组和CXCR7 siRNA+SDF-1组。应用Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力。结果 CXCR7在不同人胃癌细胞系中表达程度不一,其中高分化MKN-28几乎不表达,中分化SGC-7901细胞表达程度最高。与 NC siRNA组相比,NC siRNA＋SDF-1组的迁移细胞数和侵袭细胞数增加（P CXCR7 siRNA组的迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P CXCR7 siRNA＋SDF-1组的迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P CXCR7 siRNA抑制。     

趋化因子及其受体在肿瘤转移中作用的研究进展

肿瘤的转移是疾病恶化的重要指征,也是由多种细胞因子参与的复杂的调控过程。研究揭示,除诱导正常细胞发生基因突变之外,趋化因子与趋化因子受体在肿瘤转移的多个阶段均发挥调控作用。本综述按照肿瘤的发展过程,对趋化因子及其受体在肿瘤转移中的调控作用进行总结。     

CCL27 CCL28及 CCR10在癫痫小鼠急性期表达增高

目的：探讨趋化因子 CCL27、CCL28及其受体 CCR10在小鼠癫痫急性期外周血中的表达变化。方法取正常及癫痫小鼠急性期不同时间点(10 min、30 min、1 h、2 h)外周血利用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)法检测毛果云香碱致癫痫发作小鼠急性期外周血中 CCL27、CCL28 mRNA 水平;同期取正常及癫痫急性期不同时间点(10 min、30 min、1 h、2 h)肝素抗凝外周血,提取淋巴细胞层后利用 FACSsort 型流式细胞仪检测外周血淋巴细胞 CCR10蛋白水平的表达变化。结果癫痫小鼠发作急性期外周血中 CCL27、CCL28 mRNA 水平、淋巴细胞中 CCR10蛋白表达水平均在癫痫发作2 h 高于对照组(P <0.05)。结论癫痫发作早期已出现外周血免疫功能紊乱,该病理变化可能与癫痫发病过程中的炎性反应和神经细胞的凋亡相关。     

趋化因子受体对卒中后神经炎症的调控作用

神经炎症反应是脑卒中的重要发病机制之一。卒中后神经炎症可引起继发性脑损伤,通过激活免疫细胞,释放促炎细胞因子,进一步加重炎症损伤。由于趋化因子及其受体在募集免疫细胞至炎症部位中起关键作用,目前已被人们广泛研究,且趋化因子受体是更具吸引力的药物靶点。近年来的研究显示,卒中后神经炎症与趋化因子受体之间的联系愈发密切,该文就趋化因子受体对卒中后神经炎症的调控作用展开综述,以期为深入了解和有效治疗脑卒中带来新的启示。     

趋化因子及其受体在妊娠免疫耐受中的作用

妊娠免疫耐受是正常妊娠时母体形成的一种特殊类型的外周免疫耐受,保护作为半同种移植物的胎儿不被母体免疫系统排斥而成功妊娠。趋化因子及其受体参与免疫细胞的活化和游走等过程,在诱导免疫耐受中发挥重要作用。文章就趋化因子及其受体在妊娠免疫耐受中的作用进行了综述。     

Expression of CC Chemokine Ligand 5 in Patients with Rheumatoid Arthritis and Its Correlation with Disease Activity and Medication

Objective To determine the levels of CC chemokine ligand 5 （CCL5） in serum and synovial fluid （SF） from patients with rheumatoid arthritis （RA） and their relations with disease activity and medication. Methods CCL5 in serum and SF was quantified by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） in 28 RA patients and 21 osteoarthritis （OA） patients. In RA patients, the correlations of CCL5 levels in serum and SF with disease activity were analyzed. Meanwhile, the serum CCL5 levels among RA patients treated with disease-modifying antirheumatic drugs （DMARDs）, Tripterygium Glucosides, and other Chinese herbs without disease-modifying effects were also compared. Results CCL5 levels in both serum and SF of RA patients were significantly higher than those of OA patients （P 〈 0.05）. Moreover, the level of CCL5 was higher in SF than that in serum of RA patients （P 〈 0.01）. Serum CCL5 level was correlated significantly with the number of swollen joints （r = 0.3329, P 〈 0.05）, erythrocyte sedimentation rate （r = 0.4001, P 〈 0.05）, and C reactive protein （r = 0.3735, P 〈 0.01） In addition, the level of CCL5 had a trend of lower in patients treated with DMARDs or Tripterygium Glucosides than those treated with other Chinese herbs, although the difference was not significant among those patients due to the small number of patients in each group. Conclusions In RA patients, the expression of CCL5 increases and correlates with some clinical and laboratory parameters of RA, which indicate that CCL5 plays an important role in RA and may serve as a useful marker of disease activity. DMARDs and Tripterygium Glucosides might exert their clinical effects through reducing CCL5 production in RA.     

多发性硬化与趋化因子及其受体研究进展

多发性硬化是一种病因不明的中枢神经系统慢性脱髓鞘性炎症性疾病。趋化因子是一类具有趋化功能的细胞因子,在向炎症区募集并激活白细胞中发挥着主要作用,其与多发性性硬化的发生、发展与转归关系密切,将为揭示多发性硬化的发病机制、寻找诊断和治疗多发性硬化的新靶点提供新的契机。本文将对趋化因子及受体的分类、特性、致炎机制,及其与多发性硬化(MS)的关系进行阐述。     

CXCL12-CXCR4/CXCR7轴在非霍奇金淋巴瘤中的研究进展

趋化因子是指由白细胞和某些基质细胞分泌的、可结合在内皮细胞表面、对中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞具有趋化和激活作用的细胞因子。趋化因子在炎症反应中具有重要作用,可吸引白细胞移行到感染部位的一些低分子量蛋白质。随着对其的深入研究发现,趋化因子与其受体共同构成的网络系统与多种肿瘤的发生、发展相关。研究还发现,CXC类趋化因子亚家族的成员之一的趋化因子C-X-C趋化因子配体12及其受体C-X-C趋化因子受体4、C-X-C趋化因子受体7,与非霍奇金淋巴瘤的多种生物学过程相关。     

趋化因子及其受体在妊娠免疫耐受中的作用

妊娠免疫耐受是正常妊娠时母体形成的一种特殊类型的外周免疫耐受,保护作为半同种移植物的胎儿不被母体免疫系统排斥而成功妊娠.趋化因子及其受体参与免疫细胞的活化和游走等过程,在诱导免疫耐受中发挥重要作用.文章就趋化因子及其受体在妊娠免疫耐受中的作用进行了综述.     

CXCL12/CXCR4 Expression in Trophoblasts Takes Part in Materno-fetal Immune Tolerance and Vascular Remodeling

Immunological tolerance is necessary for materno-fetal interface in pregnancy. The enrichment of CD56brightCD16-NK cells in decidual plays a crucial part in the immunological tolerance[1], which was reported recently to be related with chemokine CXCL12[2]. On the other hand, EVTs exert significant effect on placenta embed during gestation. It is known that CXCL12 is concerned with tumor invasion and metastasis[3], and EVTs have the invasive and migratory ability similar to malignant tu…     

Expression of CC Chemokine Ligand 20 and CC Chemokine Receptor 6 mRNA in Patients with Psoriasis Vuigaris

Itiswell knownthatimmune inflammatorymechanism playsanimportantroleinpsoriasis .Therelationshipbetweenchemokine ,receptorsandpsori asishasbeenconfirmed[1] .CCchemokineligand 2 0(CCL2 0 )isanewmemberinthefamilyof β chemokineandalsotheonlyligandofCCchemoki…