2型糖尿病大鼠肾脏相关细胞因子表达与足细胞损伤关系

目的 探讨转化生长因子β1（TGF-β1）、骨形态发生蛋白7（BMP-7）、结缔组织生长因子（CTGF）、nephrin在2型糖尿病肾病（DKD）大鼠肾脏组织表达变化,及其与肾脏足细胞损伤的关系。方法 雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组（NC组,20只）和模型组（DKD组,30只）,DKD组给予高糖高脂饲料喂养8周建立2型糖尿病模型,建模成功后空腹状态下给予小剂量链脲佐菌素（STZ,30 mg/kg）一次性腹腔注射;NC组给予常规饲料喂养,腹腔注射等量枸橼酸缓冲液,继续喂养8周。于8周末检测两组24 h尿清蛋白（UAL）、空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）,电镜观察肾小球足细胞超微结构的变化,光镜检测肾小球硬化指数（GSI）,免疫组化、实时定量PCR检测肾组织nephrin、BMP-7、CTGF、TGF-β1的表达。结果 与NC组比较,DKD组大鼠UAL、GSI明显升高,肾小球足细胞nephrin、BMP-7表达下调,而CTGF及TGF-β1表达上调,差异均有显著性（t=3.20-41.17,P〈0.01）。光镜下观察,DKD组大鼠肾小球肥大,系膜细胞增生,细胞外基质增多。电镜下观察,DKD组大鼠肾脏足细胞肿胀,足突融合消失,足细胞损伤。结论 DKD 大鼠肾小球存在足细胞损害,其机制可能与 BMP-7 表达下调及 CTGF、TGF-β1 过度表达有关。     

萝卜硫素通过TGF-β/Smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响

【摘要】 目的 探讨萝卜硫素通过转化生长因子（TGF-β）/smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响及其作用机制。方法 采用2μM TGF-β诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）增生,将细胞分为对照组、TGF-β刺激组、TGF β联合20 μM萝卜硫素组及TGF-β联合40 μM萝卜硫素组。5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型,不同剂量萝卜硫素处理HBZY-1细胞及肾病综合征大鼠,将大鼠分为空白对照组、阿霉素刺激组、阿霉素联合30 mg/kg萝卜硫素组及阿霉素联合60 mg/kg萝卜硫素组,每组各8只;采用CCK8法检测HBZY-1细胞增殖,HE染色分析肾病综合征大鼠肾组织系膜基质沉积,Western Blotting方法检测粘连蛋白（FN）、Ⅳ胶原蛋白（Col4）、TGF-β及p Smad3蛋白表达水平。结果 TGF-β刺激组能明显诱导HBZY-1细胞增生及HBZY-1细胞FN和Col4蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;TGF-β联合20、40 μM萝卜硫组与TGF-β刺激组相比能明显抑制TGF-β诱导的HBZY-1细胞增殖和明显抑制TGF β诱导的FN和Col4蛋白表达（P＜0.05）。阿霉素诱导肾病综合症大鼠肾脏系膜基质沉积增多（P＜0.05）,而不同剂量萝卜硫素治疗后,能显著降低肾脏系膜基质沉积（P＜0.05）。阿霉素刺激组能明显诱导大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平升高和大鼠肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;与阿霉素刺激组相比,不同剂量萝卜硫素能明显降低大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平、降低肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 萝卜硫素可通过下调TGF-β/Smad3信号传导抑制基质合成相关蛋白表达,进而降低了肾病综合征大鼠肾小球系膜细胞增生。     

大蒜素对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的探讨大蒜素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法将60只雄性SD大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功的大鼠采用随机数字表法分为低、中、高剂量组[分别采用15、30、45mg/（kg·d）大蒜素混悬液灌胃]、贝那普利组[贝那普利17.5mg/（kg·d）灌胃]和模型组（0.9%氯化钠溶液灌胃）,各12只,另以10只SD大鼠0.9%氯化钠溶液灌胃为正常对照组,分别于用药的0、4、8、12周末检测大鼠空腹血糖（FBG）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）和24h尿白蛋白排泄率（UAE）水平,12周末时检测大鼠体质量、肾质量、肾质量/体质量;采用电镜及Masson染色观察大鼠肾组织病理学变化;采用Westernblot法检测肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、I型胶原（CollagenI）及p-ERK1/2蛋白的表达强度。结果12周末时,高剂量组大鼠的肾质量/体质量、FBG、Scr、BUN、UAE低于模型组（均P＜0.05）,且肾小球肥大、系膜细胞增生、肾小球变形病变明显减轻,TGF-β1、CollagenI及p-ERK1/2的蛋白表达均显著下降（P＜0.01）。结论大蒜素可降低糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、CollagenI及p-ERK1/2的表达,具有一定的肾保护作用。     

迷迭香酸对大鼠系膜增生性肾小球肾炎肾内TGF-β1表达的影响

目的：探讨迷迭香酸（RA）对大鼠抗Thy1．1系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）的治疗作用及其对肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法：制备大鼠MsPGN模型，随机分为3组：模型组、低剂量及高剂量RA治疗组，另设正常对照组。治疗组每天分别给予迷迭香酸（25mg／kg及50mg／kg）灌胃，连续7天，隔日检测24h尿蛋白总量。第8天处死大鼠并留取肾组织，PAS染色观察肾脏病理形态学改变．半定量RT-PCR及免疫组化方法检测大鼠肾皮质中TGF-β1的相对表达量。结果：免疫组化结果显示，正常大鼠TGF-β1少量表达于肾小球毛细血管袢及系膜区，模型组毛细血管袢及系膜区TGF-β1表达明显增多。两给药组肾小球TGF-β1表达量较模型组明显下降，24h尿蛋白定量及病理改变较模型组均有明显改善；两给药组肾组织中TGF-β1 mRNA的相对表达量均小于模型组。结论：RA对大鼠MsPGN模型具有明显的保护作用，其机制可能部分与其抑制肾组织TGF-β1的过高表达有关。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠肾病组织中蛋白激酶C-α和转化生长因子β表达的影响研究

目的探讨分析苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠蛋白激酶C-α(PKC-α)及转化生长因子β(TGF-β)表达的影响,为苦瓜总皂苷开发和临床2型糖尿病肾病的治疗提供参考。方法雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,大鼠左肾切除+链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4周、第8周处死大鼠各半,测血糖、24h尿蛋白定量;取肾组织做HE染色行肾组织病理观察、RT-PCR以及Western Blot检测肾组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达。结果苦瓜总皂苷治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组比较明显减少,血糖明显升高,差异有显著性(P0.05);病理组织显示正常对照组肾小球基底膜完整,没有增生,肾脏组织结构整齐,纹理清晰,模型组肾小球基底膜增厚同时伴有一定的系膜细胞增生,苦瓜总皂苷组肾小球基底膜较完整,增生较少,炎症反应也较小;RT-PCR和Western Blot可见:与模型组比较,苦瓜总皂苷治疗组肾脏组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05)。结论苦瓜总皂苷可抑制糖尿病肾病大鼠肾组织PKC-α和TGF-β的表达,进而保护肾脏,可能有一定的临床应用价值。     

尾加压素Ⅱ和转化生长因子β1在糖尿病大鼠肾脏的表达及其意义

目的：观察尾加压素Ⅱ（UⅡ）和转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球的动态表达规律及其在糖尿病肾病发病中的作用。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组及糖尿病2、4、8和12周组。糖尿病大鼠模型用单次腹腔注射链脲菌素（55 mg•kg^-1）诱发。生化法测定血糖、血和尿肌酐、尿白蛋白和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）含量。免疫组织化学法检测肾脏UⅡ、TGF-β1、纤连蛋白（FN）和Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）的表达。结果：糖尿病各组大鼠的生化指标均明显高于对照组（P<0.05）。糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球可见UⅡ和TGF-β1阳性染色颗粒,对照组未见该阳性染色颗粒。与糖尿病2周时比较,糖尿病4、8和12周组UⅡ和TGF-β1表达（阳性染色肾小管数和细胞数）随着病程进展进行性增加(P<0.05),肾小管上皮细胞UⅡ的表达水平与尿NAG含量呈正相关（r=0.895,P<0.01）。糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞UⅡ与TGF-β1的表达水平呈正相关（r=0.769,P<0.01）。糖尿病8和12周组大鼠肾脏FN和ColⅣ表达明显高于对照组（P<0.05）。结论：糖尿病大鼠肾小管上皮细胞和肾小球UⅡ及TGF-β1蛋白表达均明显增加,提示其在糖尿病肾病的肾小管损害及细胞外基质积聚中可能起一定作用。     

α-硫辛酸对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响研究

目的通过α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,研究其延缓肾脏纤维化的作用及机制,为临床防治糖尿病肾病提供实验依据。方法将健康SD大鼠50只,体重250～300 g,随机分为6组：①正常对照组;②糖尿病对照组;③α-硫辛酸15、30、60mg/（kg.d）。50只采用STZ 45 mg/kg造成糖尿病模型,10只用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射,造成模型组,用α-硫辛酸给糖尿病模型组给予剂量。检测各组的大鼠血糖,血清肌酐,肾重指数,制备肾脏石蜡切片,测定肾小球体积（MGA）和计算肾小球平均体积（MGV）。比较MGA和MGV;用SureStep Plus型血糖仪于实验结束前检测空腹血糖;用Western-Blot法检测肾组织TGF-β1、CTGF的表达。结果 DM组大鼠血糖明显升高,血清肌酐无明显变化;与DM组相比,治疗组大鼠血糖,血清肌酐均无统计学意义;DM组大鼠肾重指数明显增加,光镜先显示：DM组的大鼠肾小球体积明显增大,肾小球HE染色区扩大,系膜区增宽,毛细血管管腔受压,肾小球基底膜增厚,α-硫辛酸治疗后上述异常均有不同程度的改善,但未恢复到正常状态图像显示;DM组肾小球平均面积（MGA）和肾小球平均体积（MGV）明显扩大,与其相比,治疗组有不同程度的缩小。结论α-硫辛酸通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达而发挥其抗纤维化的作用,从而延缓STZ糖尿病大鼠肾脏纤维化的发展。     

健肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织中ET-1mRNA表达及肾功能的影响

目的观察中药健肾颗粒剂对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏组织内皮素-1(ET-1)mRNA表达及肾功能的影响。方法雄性Wistar大鼠40只,采用5/6肾切除加尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制大鼠DN动物模型,并随机分为健肾颗粒剂、苯那普利、保肾康、病理对照4组,每组10只,另设正常对照组10只。采用生化法检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);肾脏组织标本,经染色后用光学及电子显微镜观察肾脏组织病理结构;用PCR方法检测肾脏组织中ET-1mRNA。结果健肾颗粒剂组大鼠SCr、BUN水平低于苯那普利、保肾康及病理对照组(P<0.05或P<0.01);健肾颗粒剂组肾脏组织中ET-1mRNA表达明显低于其他3组(P<0.05或P<0.01)。光镜下肾脏组织病理结构示健肾颗粒剂组,肾小球体积,球囊粘连程度,肾小球系膜细胞增生程度,系膜基质等情况均较其他3组有明显改善;而电镜下肾小球上皮细胞增生、肿胀、足突融合、低矮、扁平、以及假绒毛样变,系膜细胞增生,基质增生,毛细血管扩张、细胞堆积等病理变化也均较其他3组有明显减轻。健肾颗粒剂降低DN大鼠血糖、尿蛋白及血脂的作用明显优于苯那普利、保肾康及病理对照组(P<0.05...     

α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的:通过α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,研究其延缓肾脏纤维化的作用及机制,为临床防治糖尿病肾病提供实验依据。方法:将50只健康SD大鼠随机分为正常对照组,糖尿病模型组和α-硫辛酸低、中、高剂量组。采用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)以60 mg/kg于左下腹腔一次性注射建立大鼠糖尿病模型。α-硫辛酸低、中、高剂量组分别按15、30、60 mg/(kg.d)灌胃12周。检测各组大鼠的血糖、肾重指数,制备肾脏石蜡切片,测定肾小球平均截面积(MGA)并计算肾小球平均体积(MGV)。用SureStep Plus型血糖仪于实验结束前检测空腹血糖;经HE染色,光镜下观察肾小球体积,肾小球基底膜变化,用免疫组化法检测肾组织TGF-β1、CTGF的表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠血糖明显升高;与模型组相比,α-硫辛酸各剂量组大鼠血糖显著降低;糖尿病模型组大鼠肾重指数明显增加,光镜显示糖尿病模型组大鼠的肾小球体积明显增大,系膜区增宽,毛细血管管腔受压,肾小球基底膜增厚,肾组织TGF-β1、CTGF蛋白表达明显降低;糖尿病模型组MGA和MGV明显扩大,与其相比,α-硫辛酸各剂量组有不同程度的缩小。结论:α-硫辛酸通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达而发挥其抗纤维化的作用,从而延缓STZ糖尿病大鼠肾脏纤维化的发展。     

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏VEGF mRNA的影响

目的：探讨丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏病理结构和血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤维素连接蛋白（FN）表达的影响。方法：雄性SD大鼠24只随机分成4组,分别为正常对照组（C组）、糖尿病组（D组）、依那普利治疗组（E组）以及丹芪合剂治疗组（Y组）。尾静脉注射链脲菌素（STZ）复制糖尿病大鼠模型,12周处死大鼠,生化方法测血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂及24h尿蛋白量,计算肾脏指数（KI）;HE染色光镜观察肾组织形态;免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN的表达;RT-PCR检测肾组织VEGF mRNA表达情况。结果：与C组相比,糖尿病大鼠KI、血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂、24h尿蛋白量均显著增高并出现蛋白尿,E组和Y组大鼠除血糖、KI外均显著低于D组。免疫组织化学结果显示正常。肾组织中TGF—β1几乎没有阳性染色,FN有少量表达,而DN时,TGF-β1和FN表达都显著增加（P〈0．01）,E组和Y组大鼠,FN和TGF—β1表达下调（P〈0．01）。RT—PCR结果提示,与C组相比,D组VEGF mRNA明显上调（P〈0．05）,而E组和Y组大鼠较D组表达减少。结论：依那普利和丹芪合剂对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与其下调肾组织中VEGF mRNA有关。     

通脉口服液对实验性糖尿病肾病模型大鼠肾脏病理及转化生长因子β_1的影响

[目的]观察通脉口服液对实验性糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏病理及转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.[方法]选用SD雄性大鼠40例,随机分为正常对照组(8只)和造模组(32只).正常对照组给予腹腔注射55 mg/kg无茵柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,饲普通饲料;造模组给予链脲佐菌素(STZ,剂量为55 mg/kg)单次腹腔注射,隔日饲高脂饲料,4周后筛选造模成功DN大鼠共21只,随机分为模型组(11只)和通脉组(10只).通脉组给予通脉口服液(剂量为2.5 g·kg-1·d-1),正常对照组及模型组给予生理盐水灌胃,饲料同前.6周后处死大鼠取肾组织,光学显微镜及电子显微镜下观察肾脏组织形态及超微结构变化,测量肾小球截面积(AMG)、细胞外基质截面积(AMM)、肾小球基底膜(GBM)厚度,计算AMM/AMG比值;同时采用免疫组化法测定肾组织TGF-β1蛋白表达.[结果]肾组织病理形态学:通脉组系膜区增宽、基底膜增厚及肾小管上皮细胞空泡变性等均较模型组明显减轻;通脉组AMM/AMG值较模型组降低;GBM厚度较模型组变薄(均P＜0.001);TGF-β1主要定位在肾小管及间质处,肾小球表达较弱,通脉组免疫组化染色面密度及积分光密度均较模型组降低(P＜0.001).[结论]益气活血中药复方通脉口服液可能通过抑制肾组织TGF-β1表达,减轻肾脏病理损害,发挥对DN的肾脏保护作用.     

肾宁胶囊对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的：探讨肾宁胶囊对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制．方法：以高糖高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素（STZ）注射方法制作2型糖尿病动物模型．将SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组,治疗组将肾宁胶囊给大鼠灌胃;对照组及模型组给予同等剂量的纯化水．6mo后进行肾脏形态学和生化指标的检测,用放免法检测血清血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）、血清和肾组织内皮素（ET）的水平;用免疫组织化学方法测量肾组织局部转化生长因子β1（TGF—β1）的表达．结果：与模型组比较,治疗组大鼠的血糖、24h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐明显改善（P〈0．05）;肾脏肥大指数（右肾质量／体质量）下降,肾小球直径缩短,系膜增生及基底膜增厚减轻,肾小管空泡及间质细胞浸润减少（P〈0．05）;血清Ang-Ⅱ降低（P〈0．01）、血清和肾组织ET水平降低（P〈0．05）;肾组织局部TGF-β1,的表达减少（P〈0．05）．结论：肾宁胶囊对2型糖尿病大鼠的肾脏有保护作用,其机制可能与降低血清Ang-Ⅱ,ET肾组织ET和TGF-β1．水平有关．     

氯沙坦钾对1型糖尿病大鼠肾组织转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的研究氯沙坦钾对1型糖尿病大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）、氯沙坦钾治疗组（c组）,每组18只。4周、8周、12周后观察大鼠血糖、尿白蛋白排泄率的变化和肾组织TGF-β1、CTGF的表达水平以及TGF-β1、CTGFmRNA的表达;光镜下观察12周后肾组织的形态变化。结果①各组大鼠血糖、尿白蛋白排泄率、TGF-β1、CTGF的表达水平和TGF-β1、CTGFmRNA的表达除了血糖以外的指标,与A组比较,B组和C组明显增高（P〈0．05）,与B组相比,C组有所下降（P〈0．05）;②光镜下观察12周后B组肾小球肥大,肾小管扩张明显,C组肾小球肥大和肾小管扩张程度较轻。结论氯沙坦钾可下调TGF-β1、CTGF的表达,可减少肾组织的损害。     

阿托伐他汀对肾大部切除大鼠残肾的影响

目的 观察阿托伐他汀在肾大部切除大鼠模型中对残肾的保护作用并探讨其可能的机制.方法 将32只大鼠随机分为4组,每组8只:假手术组、肾大部切除组、肾大部切除加小剂量阿托伐他汀组及大剂量阿托伐他汀组.8周后检测大鼠尿蛋白、肾功能和血脂;观察肾脏病理的改变;免疫组化检测FN在肾组织中的表达;并用KT-PCK测定肾组织中TGF-β1、CTGF和PAI-1mRNA的表达.结果 治疗组大鼠尿蛋白定量、血BUN、Scr降低,FN表达下降,肾组织TGF-β1、CTGF和PAI-1mRNA的表达也下降,与肾大部切除组比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05).各组血脂水平无明显差异(P>0.05).治疗组呈剂量依赖性使肾大部切除大鼠肾小球系膜细胞增生受抑制,肾组织胶原纤维沉积减少.结论 阿托伐他汀可降低肾大部切除大鼠血BUN、Scr、尿蛋白,可抑制肾小球系膜细胞增生,减少系膜基质蓄积,且与血脂水平的改变无关,其肾脏保护作用可能与抑制肾组织 CTGF、TGF-β1和PAI-1的表达有关.     

复方山菊对自发性高血压大鼠肾脏的保护作用及机制

目的:观察复方山菊对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏损伤的保护作用并分析其可能机制。方法:SHR大鼠35只,随机分5组,每组7只,分别灌服复方山菊[0.05、0.15、0.45 g/(kg.d)]和卡托普利(0.03 g/kg),WKY大鼠正常对照组7只、SHR模型组灌服等容积蒸馏水(5 ml/kg),每日1次,连续16周。尾袖法每两周测定大鼠无创尾动脉血压,16周后,HE染色观察肾小球病理组织学变化,MASSON染色肾小球胶原纤维,免疫组化法表达肾小球诱导型一氧化氮合成酶(iNOS),RT-PCR法表达肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA。结果:复方山菊组随着剂量的增加肾小球系膜细胞和基质增生逐渐减轻,肾小管颗粒变性逐渐改善,肾间质内炎细胞浸润逐渐减少,纤维化逐渐减轻;肾小球系膜区胶原沉积逐渐减少;肾小球iNOS及TGF-β1 mRNA的表达逐渐减少。结论:复方山菊可明显减轻SHR肾小球损伤,减少其系膜区胶原沉积,下调iNOS及TGF-β1 mRNA的表达,对肾脏具有一定的保护作用。     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7信号通路的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病(DM)模型,模型成功后随机分为3组:模型对照组、开搏通组、肾康丸组,另设正常对照组。治疗8周后,取大鼠肾脏,采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad 7蛋白表达的情况。结果8周后,DN模型组大鼠与正常大鼠比较,肾脏组织中FN和TGF-β1蛋白表达明显增加,Smad 7蛋白表达明显减少。肾康丸和开搏通都可以减少FN和TGF-β1蛋白的表达,增加Smad 7蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1/Smad信号传导通路的激活,减少ECM的沉积,从而延缓DN进程。     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织内皮素-1蛋白及mRNA表达的影响。方法将45只大鼠随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和三七总皂苷组,手术切除大鼠右侧肾脏并腹腔注射阿霉素建立模型,10周末处死大鼠,无菌取肾脏,进行肾组织HE染色及masson染色,观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组织化学及原位杂交方法分析肾组织内皮素-1蛋白及mRNA的表达。结果模型组大鼠肾组织肾小管上皮细胞(TEC)、肾小球系膜细胞(GMC)及肾小球上皮细胞(GEC)胞浆中ET-1蛋白及mRNA表达强阳性,三七总皂苷组大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达较模型组显著减少,有统计学意义(P<0.05)。结论三七总皂苷能够减少阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞及肾小球上皮细胞胞浆中内皮素-1蛋白及mRNA的表达,进而起到保护肾功能、延缓慢性肾衰竭的病程进展。     

螺旋藻对阿霉素肾硬化大鼠肾脏的保护作用

目的研究螺旋藻对阿霉素肾硬化大鼠肾脏的保护作用及相关机制。方法将32只SD大鼠随机分为4组：假手术组（S组）,阿霉素肾硬化对照组（M组）,螺旋藻组（SP组）,贝那普利治疗组（B组）。8周后观察各组大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）及肾脏病理改变,免疫组化观察肾脏组织纤连蛋白（FN）、IV型胶原（Col IV）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。RT-PCR测定肾皮质TGF-β1mRNA的表达。结果螺旋藻能减少尿蛋白、降低BUN和Scr,减轻基质增生和肾小球硬化,且能减少FN、Col IV、TGF-β1的表达。下调肾皮质TGF-β1mRNA的表达。结论螺旋藻能减轻阿霉素肾硬化大鼠肾脏损害,对肾脏有保护作用。     

茵陈提取物对糖尿病大鼠肾组织中PTEN蛋白表达的影响及其肾脏保护作用

目的：探讨茵陈提取物（HACE）对糖尿病大鼠肾组织中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）表达的影响,阐明HACE对糖尿病大鼠肾脏保护作用的药理学机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠模型。30只Wistar大鼠随机分为对照组（6只）、模型组（12只）和HACE组（12只）,HACE组大鼠每天1次灌胃给予HACE（5 g·kg^-1）,对照组和模型组大鼠每天1次灌胃给予等量生理盐水。给药4个月后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率和尿总蛋白排泄率,HE染色观察大鼠肾组织病理形态表现,PAS和Masson染色检测肾小球细胞外基质（ECM）分布情况,免疫组织化学染色法检测大鼠肾组织中PTEN蛋白表达分布情况,Western blotting法检测各组大鼠肾脏组织中PTEN蛋白表达水平。结果：与模型组比较,HACE组大鼠肾小球系膜区扩大、PAS及Masson阳性染色物质聚集和基底膜增厚等现象明显减轻,24h尿白蛋白排泄率明显降低（P<0.05）,尿总蛋白排泄率差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学染色检测,对照组大鼠肾组织PTEN蛋白表达量较高,模型组大鼠肾组织中PTEN蛋白表达量降低,HACE组大鼠肾组织中PTEN蛋白表达量趋向正常。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组大鼠肾皮质中PTEN蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,HACE组大鼠肾皮质组织中PTEN蛋白表达水平明显升高（F=5.06,P<0.05）。结论：HACE提高大鼠肾脏组织中PTEN蛋白的表达可能是其对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制之一。     

TGF-β/Smad/RUNX3信号通路在糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞EMT过程中的作用

【摘要】 目的 探讨TGF-β/Smad/RUNX3信号通路在糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管上皮细胞 间充质转化（EMT）过程中的作用。 方法 将45只Wistar雄性大鼠随机分成三组：对照组、模型组和实验组,每组各15只,实验组和模型组制备DN大鼠模型。按照实验分组进行给药。末次给药后,用血糖仪检测各组大鼠血糖含量,全自动生化分析仪检测各组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮及血肌酐含量,过碘酸希夫（PAS）、天狼星红（SR）染色观察各组大鼠肾脏组织病理变化,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测各组大鼠血清白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）表达水平,蛋白免疫印迹（Western blot）检测各组大鼠肾脏组织α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、Smad3、Smad4、RUNX3蛋白表达情况。 结果 与对照组相比,模型组大鼠肾小管肥大增生,肾间质有炎症细胞浸润现象,肾间质胶原纤维沉积、24 h尿量、24 h尿蛋白、血糖、血尿素氮、血肌酐浓度、血清IL-1β、IL-6表达量、肾脏α-SMA、TGF-β1、Smad3、Smad4蛋白表达显著升高 (P＜0.05),肾脏E-cadherin、RUNX3蛋白表达显著降低 (P＜0.05);与模型组相比,实验组大鼠肾小管肥大减轻,炎症细胞减少,肾间质胶原纤维沉积、24 h尿量、24 h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐浓度、血清IL-1β、IL-6、肾脏α-SMA、TGF-β1、Smad3、Smad4蛋白表达显著降低 (P＜0.05),肾脏E-cadherin、RUNX3蛋白表达显著升高 (P＜0.05)。 结论 β抑制剂可通过抑制TGF-β/Smad通路激活促进RUNX3表达,减少糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化及促炎因子分泌,抑制肾小管上皮细胞EMT的发展。