褪黑素调控Nrf2/ARE信号通路延缓髓核间充质干细胞退变的实验研究

  目的  探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)的影响及调节机制。  方法  使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态,鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物;采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组;免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平;免疫印迹分析外基质标志蛋白(Ⅱ型胶原、糖胺聚糖)和通路核心蛋白(Nrf2、HO-1)表达情况。  结果  褪黑素在氧化应激下保护了NPMSCs的活性,且1 μmol/L浓度保护效应最为明显(0.717±0.018,t=7.102, P＜0.01)。褪黑素可抑制NPMSCs在H₂O₂诱导后的活性氧水平(阳性率70.0% vs. 32.7%)。此外,褪黑素还能显著提高Nrf2/ARE信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子(1.925±0.024,t=13.150,P＜0.01)和血红素氧合酶-1(1.605±0.019,t=12.940, P＜0.01)的活性,改善NPMSCs的功能。褪黑素治疗后,细胞基质蛋白Ⅱ型胶原(0.850±0.010,t=25.200,P＜0.01)和糖胺聚糖(0.335±0.013,t=10.640,P＜0.01)表达增加。  结论  褪黑素通过调控Nrf2/ARE信号通路可以影响NPMSCs退变的生物学特性。      

MMP-8在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达

目的 研究基质金属蛋白酶8-（MMP-8）在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达，探讨MMP-8在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法 用免疫组化SABC法检测67例妊娠期高血压疾病患者及21例正常妊娠者胎盘组织中MMP-8的表达。结果 正常妊娠组胎盘MMP-8表达阳性率为80．9％，明显高于妊娠期高血压疾病组（26．9％）P〈0．05，随妊妊娠期高血压疾病病情的加重，MMP-8的表达有下降趋势。结论 妊娠期高血压疾病患者胎盘组织MMP-8的表达明显减少，且随其病情加重有下降趋势，表明MMP-8与妊娠期高血压疾病的发生有密切关系。     

大鼠实验性糖尿病对异丙肾上腺素所致心肌坏死的影响

异丙肾上腺素(ISP)是一种强有力的心脏毒性物质。给动物注射一定剂量可引起明显心肌坏死。糖尿病时可发生心肌病改变,为探讨糖尿病心肌对致损伤因素的反应特点,本实验研究了糖尿病状态对ISP所致心肌坏死的影响。由于甲状腺功能状态可影响儿茶酚胺的反应性,故同时也探讨了糖尿病大鼠血清甲状腺激素水平对这种心肌坏死的影响。     

127例经胸微创房间隔缺损封堵术的临床应用研究

目的：探讨经胸微创封堵术在房间隔缺损（ASD）中的应用效果及安全性,并与传统的外科体外循环下心内修补术进行对比。方法将2010年4月至2013年4月入住该院的236例ASD患者分为对照组与观察组,对照组（n＝109）给予外科体外循环修补术,观察组（n＝127）给予经胸微创封堵术。比较两组手术时间、ICU住院时间、使用呼吸机时间、引流量、术后住院时间：及VAS评分、手术成功率、并发症发生率及治疗前后心脏功能指标变化。结果（1）观察组手术时间、入住ICU时间、住院天数、住院费用、术后气管插管时间、VAS评分及并发症发生率均显著小于对照组（P＜0．05）,但输血量、引流量显著大于对照组（P＜0．01）,手术成功率稍大于对照组（P＞0．05）;（2）两组治疗前后各心脏功能指标差异均具有统计学意义（P＜0．05）,且观察组治疗后与对照组治疗后相比,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论经胸微创房间隔缺损封堵术临床效果显著,对患者创伤小,操作简便,明显优于传统外科体外循环下心内修补术,应在临床上加以推广应用。     

尾加压素Ⅱ及其受体在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏中的表达及意义

目的 探讨尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)及其受体(GPR14)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质中的表达及意义.方法 将24只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)及模型组(UUO组),采用左侧输尿管结扎术复制UUO模型.术后第14和28天分别处死两组大鼠,取左肾进行HE和Masson染色,并用免疫组化检测肾间质中UⅡ和GPR14的表达,RT-PCR检测UⅡ和GPR14 mRNA表达.结果 HE和Masson染色显示模型组大鼠肾小管间质增宽,炎细胞浸润,纤维组织增多,随时间进展病变更加明显(P＜0.01);免疫组化显示UUO组2 w时肾间质UⅡ及GPR14表达明显增多,与Sham组比较差异显著(P＜0.01);UUO组4 w时UⅡ及GPR14持续高表达(P＜0.01).RT-PCR显示2 w后,与Sham组比较,UUO组大鼠肾组织中UⅡmRNA表达明显增加(P＜0.01),GPR14表达也有增加趋势,但无显著差异性;4 w后UUO组UⅡmRNA表达仍明显高于Sham组(P＜0.01),GPR14表达也明显升高(P＜0.01).结论 UⅡ及GPR14 的蛋白表达和mRNA水平在UUO大鼠肾间质中明显增加,提示UⅡ的表达与肾纤维化有关,可能参与了肾纤维化的过程.     

单宁酸对糖尿病大鼠抗氧化能力及体外蛋白质非酶糖基化作用的影响

目的观察单宁酸（tannic acid,TA）对糖尿病（DM）大鼠抗氧化能力及体外蛋白质非酶糖基化作用的影响。方法 70只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、氨基胍（AG）组和TA低高剂量组,给药10周后处死大鼠。化学比色法检测各组大鼠血清及肾皮质MDA含量及GSH-Px、SOD、CAT活性。将单宁酸加入到体外建立的非酶糖基化体系,孵育2个月,荧光法进行AGEs测定并计算蛋白质糖基化抑制率。结果单宁酸可降低DM大鼠血清及肾皮质MDA含量,提高GSH-Px、SOD、CAT活性并呈浓度依赖性抑制体外蛋白质非酶糖基化反应。结论单宁酸可提升糖尿病大鼠的抗氧化能力,并具有抑制体外蛋白质非酶糖基化的作用。     

单宁酸对糖尿病大鼠肾组织炎症因子表达的抑制作用

目的:观察单宁酸(TA)对链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠肾脏组织炎症因子表达的抑制作用,探讨其作用机制.方法:70只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM组、氨基胍(AG)组、TA低剂量组和TA高剂量组.处理10周后检测各组大鼠肾脏功能指标[血清肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白排泄量],P...     

亚硝酸盐对培养心肌细胞的直接作用

应用亚硝酸钠作用于培养的心肌细胞，观察到心肌细胞发生了超微形态结构改变；细胞内α－羟丁酸脱氢酶漏出增加（Ｐ＜０．０５～０．０１），３Ｈ—ＴｄＲ掺入变化呈双向性：小剂量组（０．００１～０．１×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）呈现促进作用（Ｐ＜０．０５～０．０１）；大剂量组（１．０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）则表现为抑制效应（Ｐ＜０．０５）。细胞周期分析结果：小剂量组（０．０１×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）Ｇ０Ｇ１期细胞减少４．１３％，Ｓ期增长３．９５％，Ｇ２＋Ｍ期增长０．３３％，与对照组比较，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。大剂量组（１、０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）Ｇ０Ｇ１期细胞增加９．１４％，Ｓ期减少１２．４６％，Ｇ２＋Ｍ期增加４．０６％，其中Ｓ期的改变达到显著差异（Ｐ＜０．０５）；细胞及培养液中脂质过氧化物含量增加（Ｐ＜０．０１）。表明亚硝酸盐能引起培养心肌细胞的直接损伤，其机理与脂质过氧化作用有关。     

胡芦巴多糖A2对大鼠肾小球系膜细胞CTGF表达的影响

目的 探讨胡芦巴多糖A2含药血清对大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质(ECM)沉积及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 制备胡芦巴多糖A2含药血清,体外培养大鼠肾小球系膜细胞,观察胡芦巴多糖A2血清对大鼠肾小球系膜细胞分泌纤维连接蛋白(FN)、胶原(Col)Ⅳ、TGF-β1和CTGF的影响.结果 与高糖培养基组比较,A2组FN、ColⅣ含量明显下降;TGF-β1和CTGFmRNA表达明显下调.结论 胡芦巴多糖A2可通过下调CTGF表达,减少高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞FN、ColⅣ的分泌,从而抑制ECM积聚.     

PPAR-γ激活对糖基化终末产物引起的大鼠肾系膜细胞TGF-β及CTGF mRNA表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖体激活受体-γ(PPAR-γ)激活对糖基化终末产物(AGEs)引起的大鼠肾系膜细胞TGF-β及CTGF mRNA表达的影响.方法 体外培养正常大鼠肾系膜细胞,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测不同浓度AGEs(0～400 μg/ml-1)及不同浓度PPAP-γ)激活剂(罗格列酮)和PPAR-γ阻断剂(GW9662)对AGEs(100 μg/ml-1)引起的TGF-β及CTGF mRNA表达的影响.结果 给予PPAR-γ激活剂可明显减轻AGEs引起的大鼠系膜细胞TGF-β、CTGF mRNA的表达.结论 PPAR-γ激活剂可以明显减轻AGEs对系膜细胞TGF-β、CTGF mRNA的表达影响,从而改善肾小球细胞外基质积聚,在糖尿病时起到肾脏保护作用.