凋亡相关蛋白BCL-2与白血病化疗药物敏感性的研究

目的 :研究急性白血病 (AL)细胞BCL 2表达及其与体外化疗药物敏感性的关系。方法 :采用Westernblotting技术和四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 ) ,分别检测HL 60、U93 7细胞株和 6例急性髓性细胞白血病 (AML)细胞BCL 2表达水平及体外对柔红霉素 (DNR)的敏感性。结果 :( 1)BCL 2表达水平HL 60细胞高于U93 7细胞 ,而 6例AML细胞BCL 2表达水平不同 ;( 2 )MTT检测结果显示 ,DNR对HL 60抑制率低于U93 7;BCL 2高表达的AML细胞 ,DNR抑制率低。结论 :细胞系和白血病原代细胞的BCL 2高表达伴低药敏与AML疗效有关。     

BAG-1蛋白在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达及意义。方法:用免疫细胞化学SP染色法分别检测初治AML患者(76例)、急性髓系白血病完全缓解(AML-CR)患者(49例)、急性髓系白血病难治复发(RRAML)患者(17例)及正常对照者(15例)的骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达。结果:四组BAG-1蛋白阳性表达率差异有统计学意义(字2=47.857,P0.001);初治AML组和RRAML组中BAG-1蛋白阳性表达率均高于AML-CR组和正常对照组(P0.001);AML各分型患者的BAG-1蛋白阳性表达率差异无统计学意义(字2=1.920,P0.05);初治AML患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白阳性表达率与白细胞计数及髓外浸润有关(字2=9.248,13.689,P0.01)。结论:BAG-1可能参与了急性髓系白血病的发生发展。     

鬼臼乙叉甙治疗32例急性白血病疗效分析

鬼臼乙叉甙(简称VP-16)近年来已成为治疗急性白血病的主要新药之一。我们以VP-16联合Ara-C治疗急性白血病(AL)32例,报告如下。1 资料与方法 32例患者,男20例,女12例。年龄19～61岁。初治AL20例,FAB分型均为急性粒单细胞白血病(AML,M_4)或急性单核细胞白血病(AML,M_5)。复发病例12例,其中急性粒细胞白血病(AML,M_2)4例,急性早幼粒细胞(AML,M_3)、急性淋巴细胞白血病(ALL)各1例,M_4、M_5各3例。     

无染色体异常的急性白血病自体造血干细胞移植的疗效

目的 评价自体外周血造血干细胞移植(PBSCT)治疗无染色体异常的急性白血病(AL)的疗效。方法 12例急性淋巴细胞性白血病(ALL)和10例急性髓细胞性白血病(AML)病人,在诱导治疗获得第一次缓解后(CR1)分为自体PBSCT组和继续常规化疗组对照研究。结果 自体移植组中5例CR1的AML,2年以上无病生存率(DFS)为80％;6例CR1的ALL,2年以上DFS为60％,而且自体移植后存活的病人均无生活质量问题。采用常规化疗的病人,5例CR1的AML,2年以上DFS仅为40％;6例CR1的ALL,2年以上DFS为40％,提示自体移植疗效好于常规化疗。结论 对于无染色体异常核型的中危和低危急性白血病病人,若无HLA相合供体,应首选自体PBSCT作为巩固治疗。     

流式细胞术在人急性白血病免疫分型中的应用

目的 :研究流式细胞仪 (Flowcytometry,FCM)检测急性白血病 (AL)细胞表面抗原的方法及临床意义。方法 :以FCM为基础 ,应用一组三色荧光标记单克隆抗体 (Monocolonalantibody,MoAb)对 14例AL患者进行免疫分型。结果 :5例为双表型 ,即同时表达二系抗原 (急性髓细胞白血病 (AML) 3例 ,急性淋巴细胞白血病 (ALL) 2例 ) ;9例为系列专一性 (即仅表达一系抗原 ,AML 6例 ,ALL 3例 )。结论 :双表型较系列专一型预后差 ;FCM法具有测定细胞量大 ,快速和准确的优点 ,值得推广应用     

急性髓细胞白血病免疫分型和FAB分型的关系

目的:探讨急性髓细胞白血病(AML)免疫分型和FAB分型的关系。方法:对93例初治AML进行细胞形态学检查和免疫分型检查,免疫分型采用流式细胞术(FCM),并对2种检查结果进行分析。结果:93例AML中M1亚型1例,M2亚型68例,M3亚型13例,M4亚型3例,M5亚型4例,未分类4例;单表型74例,伴淋系抗原表达12例,双表型5例,未表型2例;细胞形态学确诊AML72例,诊断准确率为77.4%;免疫分型确诊AML91例,FAB分型结合免疫分型使诊断的准确率达到97.8%。结论:免疫分型在鉴别AML各亚型和杂合性白血病(HAL)方面具有重要作用,细胞形态学结合免疫分型可提高诊断准确率,弥补FAB分型的不足之处。     

儿童急性白血病免疫分型及其临床意义

目的 探讨儿童急性白血病(AL)抗原表达规律及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测46例儿童AL的免疫表型.结果 46例AL中,急性淋巴细胞白血病(ALL)30例,急性髓细胞白血病(AML)10例,杂合型6例.30例ALL中,T系ALL 4例(13.3%),B系ALL 26例(86.7%).ALL中3例(10%)有髓系抗原表达,以CD33阳性最常见;AML中4例(40%)有淋系抗原表达,以CD7阳性率最高.儿童AML淋系抗原表达阳性率高于儿童ALL髓系抗原表达(X2=4.32,P＜0.05).B系ALL中CD34阳性率为56.5%.AML中CD34的表达频率为40.0%,其中M2的CD34阳性率为66.6%,高于其他AML病儿的CD34阳性率(X2=5.42,P＜0.05).结论 应用免疫分型可以较好地分析每例白血病病儿,尤其是对于混合型白血病及抗原交叉表达者更有意义.     

无染色体异常的急性白血病自体造血干细胞移植的疗效

目的评价自体外周血造血干细胞移植(PBSCT)治疗无染色体异常的急性白血病(AL)的疗效.方法12例急性淋巴细胞性白血病(ALL)和10例急性髓细胞性白血病(AML) 病人,在诱导治疗获得第一次缓解后(CR1)分为自体PBSCT组和继续常规化疗组对照研究.结果自体移植组中5例CR1的AML,2年以上无病生存率(DFS)为 80%;6例CR1的ALL,2年以上DFS为60%,而且自体移植后存活的病人均无生活质量问题.采用常规化疗的病人,5例CR1的AML,2年以上DFS仅为 40%;6例CR1的ALL,2年以上DFS为40%,提示自体移植疗效好于常规化疗.结论对于无染色体异常核型的中危和低危急性白血病病人,若无HLA相合供体,应首选自体PBSCT作为巩固治疗.     

SYBR Green实时定量PCR检测急性髓系白血病患者BAALC基因表达

目的:观察SYBR Green相对定量逆转录聚合酶链反应(RQ-PCR)方法检测急性髓系白血病(AML)患者外周血单个核细胞(PBMC)中脑和急性白血病细胞胞质(BAALC)基因mRNA的表达水平。方法:分离12例初发AML患者和5名健康成年人PBMC,以白血病细胞株K562为阳性对照,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,SYBR Green相对定量RQ-PCR检测BAALC基因表达水平。结果:健康成年人PBMC中检测不到BAALC mRNA的表达,12例AML患者中,有8例BAALC mRNA高表达,与K562比较,其相对值为K562的0.8~5.6倍。结论:用SYBR Green相对定量RQ-PCR可以检测到AML患者PBMC中BAALC基因的表达,该方法稳定、敏感、可靠。     

miR-221和miR-222在急性髓细胞白血病初发患者中的表达研究

目的探讨miR-221和miR-222在急性髓细胞白血病(AML)骨髓有核细胞中的表达及意义。方法选择16例AML初发患者和44例非白血病患者骨髓标本,分离有核细胞,抽提总RNA,以U6为内参,采用茎环Realtime RT-PCR法检测并比较AML和非白血病患者骨髓有核细胞中miR-221和miR-222的表达,同时比较这两种miRNAs在AML中M3、M4和M5三种亚型间的表达水平。结果 miR-221和miR-222在AML初诊患者骨髓中相对表达量(N=2-ΔCt)明显高于非白血病患者组(P<0.05);这两种miRNAs在M5型AML患者表达最高,但在AML三种亚型间表达水平未见显著的统计学意义(P>0.05)。结论 miR-221和miR-222有可能在为AML的诊断、治疗和预后上,提供一个新的标准和靶点指标。     

慢性粒细胞白血病加速期及急变期的形态学与免疫学分型的相关研究

目的 探讨慢性粒细胞白血病(CML)加速期及急变期的细胞形态学和免疫学分型特征.方法 对73例慢性粒细胞白血病急变期(CML-BP)患者的骨髓标本分别进行光镜细胞形态学及相关细胞化学染色观察,确定其FAB类型;应用流式细胞仪检测免疫学一系列相关抗原.结果 73例CML-BP患者的FAB分型为慢性粒细胞白血病急髓变(CML-AML) 44例,急性淋巴细胞白血病(ALL)21例,急性混合细胞白血病(HAL)8例.流式细胞术行免疫表型分析,21例CML向急性淋巴细胞白血病转变(CML-ALL)患者中,其免疫表型B-ALL 19例,T-ALL 2例;且12例含髓系标志.8例CML向急性混合细胞白血病(HAL)转变(CML-HAL)患者中,免疫表型为B+My 6例;T+My 2例.44例CML-AML患者中,15例含T细胞标志,2例含B细胞标志,其他未见跨系表达.73例CML-BP患者中有29例在CML加速期行流式检查,其中16例急变为急性髓细胞白血病(AML),13例急变为非AML(ALL 9例,HAL 4例).非AML中2例加速期查见髓系原始细胞和前体淋巴细胞同时存在,余9例为髓系原始细胞或伴淋巴细胞标志.结论 流式细胞术对CML-BP的方向及鉴别诊断有一定的提示作用.     

miR-133a在急性髓系细胞白血病中的表达及意义

目的:探讨miR-133a在急性髓系细胞白血病(AML)骨髓有核细胞中的表达及意义。方法:收集37例AML初诊患者及25例化疗后完全缓解患者、12例急性淋巴细胞白血病(ALL)初诊患者和22例骨髓象正常的发热患者的骨髓标本。分离有核细胞,抽提总RNA,以U6为内参,采用实时荧光定量茎环RT-PCR检测并比较AML、ALL及骨髓象正常的非白血病患者骨髓有核细胞中miR-133a的表达,同时比较miR-133a在AML常见亚型及化疗缓解前后的表达水平。结果:miR-133a在AML初诊患者骨髓中相对表达量(N=2-△Ct)明显高于ALL和非白血病患者(P<0.05);M3、M4及M5三种常见AML类型中,M5患者的骨髓标本miR-133a表达明显高于M3患者(P<0.05);AML化疗完全缓解后骨髓有核细胞中miR-133a的表达较化疗前明显下降(P<0.05)。结论:miR-133a可能参与AML的发生发展进程,其骨髓表达水平可为化疗敏感性评价提供一个新的指标。     

Evi1基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的　探讨急性髓系白血病 (AML)中Evi1基因的表达及意义。方法　应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系 (Evi1阳性细胞株 )、94例AML(初治 49例 ,复发 2 3例 ,缓解 2 2例 )患者及 10名正常对照Evi1基因的表达。结果　① 10名正常人骨髓单个核细胞中无Evi1mRNA的表达 (阴性 ) ,HEL细胞系Evi1阳性。②AML患者Evi1基因总的阳性表达率为 18.1% (17/94) ,M5型未见表达 ,M1～M4各型的阳性率无差异 (P >0 .0 5)。AML初治、复发、完全缓解的Evi1基因阳性率分别为 2 6.5%、17.4%、4.5% ,各组间无明显差异 (P >0 0 5)。③AML初治患者中Evi1阳性表达者首次完全缓解 (CR1)后缓解持续时间短于Evi1阴性表达者 (P <0 0 1) ,早期病死率 (确诊后 3个月内死亡 )明显升高 (P <0 .0 1)。结论　Evi1基因在AML的发病中可能起一定作用 ,可作为判断AML预后不良的一个指标     

急性髓系白血病细胞P170表达与白血病集落生长关系的研究

为研究急性髓系白血病 (AML)细胞 P170表达与白血病细胞体外集落生长之间的关系及其预后意义 ,对 31例 AML 住院患者骨髓细胞用 Dicke法进行 AML 白血病集落 (AML- CFU)体外培养 ,并用单抗免疫组化法对骨髓细胞和 AML- CFU细胞 P170表达进行检测。 2 8例 AML 患者采用蒽环类药 Ara- c治疗 ,2个疗程后评定疗效。结果显示 :初发、复发 AML、慢粒急粒变及 CR期 AML 患者 AML- CFU集落分别为 172 .9± 72 .1/ 2×10 5 ,176 .0± 76 .6 / 2× 10 5 ,2 2 4.5± 5 4.7/ 2× 10 5和 9.7± 5 .0 / 2× 10 5 ,初、复发 AML 及 CML 急粒变患者 AML-CFU明显高于 CR期 AML 患者 (P<0 .0 1) ,而初、复发 AML 及慢粒急粒变患者 AML- CFU无差异。 AML 患者AML- CFU细胞和 BM细胞 P170阳性表达和 P170阴性表达均为 16例。两种细胞 P170阳性表达一致者 13例 ,P170阴性表达一致者 12例 ,P170阳性和 P170阴性表达不一致者各 3例 (P=0 .114)。 P170阴性者 CR10例 (10 /13,76 .9% ) ,P170阳性者 11例 CR2例 (2 / 11,18.2 % ) ,P=0 .0 0 48。多元回归及逐步回归分析 AML 患者 CR率与P170表达及疾病状态有关 ,其相关系数分别为 - 0 .9786和 - 0 .40 5 5 (P值分别为 0 .0 0 94和 0 .0 10 5 )。以上可见 ,AML- CFU数量与疾病活跃     

MEIS1基因在急性白血病中的表达及其意义

目的 研究MEISI基因在急性白血病(AL)中的表达及其意义。方法 采用半定量RT-PCR方法分别检测HEL细胞系(HOX阳性细胞株)、20名健康对照者及92例AL患者MEISI基因的表达。结果 20名正常人骨髓单个核细胞(MNC)中无MEISI基因表达(阴性),HEL细胞系阳性。在92例AL中,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者MEISI基因表达阳性率为5．26％(2／38);急性髓细胞白血病(AML)患者阳性率为42．59％(23／54);表达阳性者完全缓解(CR)率(39．13％)明显低于阴性者(74．19％)。结论 MEISI基因表达与AML有一定的相关性;MEISI基因表达阳性者CR率低,提示MEISI基因有一定的预后意义。     

急性髓细胞白血病免疫分型特点及临床意义

目的: 探讨急性髓细胞白血病(AML)免疫分型特点及其临床意义。方法: 采用流式细胞术(FCM)对145例AML患者进行白血病免疫分型检测。结果: 145例AML患者中MPO、CD13、HLA-DR、CD33、CD34表达率分别为93.1%、90.3%、77.2%、71.7%、70.3%。CD14仅表达于急性粒单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)。AML伴淋系抗原表达者以CD7(34.5%)最为多见,其中以预后较差的M5型表达率为最高,其次为CD19(10.3%),且在急性粒细胞白血病部分分化型(M₂)中表达率最高。CD2仅表达于部分急性早幼粒细胞白血病(M3),共发现2例急性混合细胞白血病,同时有淋系和髓系抗原表达。结论: MPO、CD13、CD33为髓系最敏感的抗原,CD7、CD19、CD2淋系抗原在AML诊断及预后判断上有重要指导意义,FCM免疫分型对白血病的准确分型诊断,预后判断有重要的指导意义。     

成人急性白血病患者骨髓细胞NG2表达的检测

目的 :检测成人急性白血病细胞中NG2的表达 ,了解其与临床表现、免疫表型及疗效的关系。方法 :用流式细胞仪 间接免疫荧光标记法检测 6 2例成人急性髓细胞白血病 (adultacutemyeloidleukemia ,AML)和 2 4例急性淋巴细胞白血病 (acutelymphoblasticleukemia,ALL)患者骨髓细胞膜表面人类小鼠硫酸透明质酸糖蛋白NG2同源物的表达。结果 :在 19.35 %的AML和 4.17%的ALL中此抗原表达阳性。阳性者与对照在临床特征和血象方面无差异。但在AML中与FAB分型有一定的相关性 ,以M0 、M1为多。NG2阳性者更易表达CD9和CD13,而CD14、CD15的阳性率较低 (P <0 .0 5 ) ,CD34、CD38等干 /祖细胞标志的表达率也较高 (P =0 .1)。NG2阳性患者的缓解率较低 (P =0 .0 8)。结论 :NG2多表达于早期的造血干 /祖细胞 ,与预后似乎有一定的关系     

流式细胞术在急性白血病细胞免疫表型分析中的价值

目的研究应用流式细胞技术对急性白血病进行免疫表型分析,为临床治疗和预后提供有价值的信息。方法运用双色免疫荧光抗体标记患者骨髓或外周血单个核细胞,用流式细胞仪分析白血病细胞膜免疫表型。结果分析75例急性白血病患者中,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者12例,占16.0%;急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者24例,占32.0%;急性髓细胞白血病(AML)患者37例,占49.3%。混合型急性HALL/B有2例,占2.6%。ALL患者除均表达淋系抗原外,同时伴有髓系统抗原的表达;AML患者除均表达髓系抗原外,少部分同时伴有淋系抗原的表达。AML细胞表面抗原表达百分率成人明显高于儿童(73%/27%)。结论流式细胞技术能准确地分析并鉴别出急性白血病各型别,是白血病诊断分型的重要手段之一。     

地西他滨对AML1-ETO阳性急性髓系白血病细胞中PD-L2分子表达的影响

背景 复发难治性AML1-ETO融合基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者预后差。程序性细胞死亡蛋白-配体2 (programmed cell death-ligand 2,PD-L2)是参与白血病免疫逃逸的重要分子,研究去甲基化药物对白血病细胞中PD-L2分子表达的影响,对于优化用药方案具重要意义。目的 分析AML1-ETO融合基因阳性的AML细胞中PD-L2分子启动子区甲基化水平及DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(decitabine,DAC)对其表达的影响。方法 以AML1-ETO融合基因阳性AML细胞系Kasumi-1以及两对AML1-ETO沉默(SKNO-1-PGK,SKNO-1-siA/E)或诱导细胞系(U937-MT,U937A/E,U937A/E+ZnSO₄)为模型,采用终浓度为2.5μmol/L的DAC或0.1%二甲基亚砜(对照)处理细胞72 h,其中Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系设置0.25μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L 3个浓度梯度。采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测...     

急性白血病CDX2基因启动子甲基化状态与其mRNA表达关系

目的研究急性白血病尾型同源盒-2(CDX2)基因启动子甲基化与其mRNA表达的关系,探讨CDX2基因表达上调机制。方法分别用甲基化特异性PCR(MSP)、实时定量PCR方法检测55例初诊急性髓细胞白血病(AML)、18例初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)、17例对照CDX2基因启动子甲基化状态和CDX2 mRNA表达。结果 AML、ALL及对照组甲基化率均为100.0%,各组间差异无统计学意义(P0.05)。AML、ALL组CDX2 m RNA表达显著高于对照组,差异有统计学意义(Z=-5.437、-3.862,P均=0.000),AML、ALL两组间差异无统计学意义(Z=-0.794,P=0.427)。结论急性白血病患者CDX2 mRNA表达上调与其启动子甲基化状态无明显相关性。