逆转录病毒介导的人卵巢癌 p53基因治疗体外及小鼠体内实验研究

目的 :评价人卵巢癌的 p5 3基因治疗效果。 方法 :用携带人野生型 p5 3的逆转录病毒转导 p5 3蛋白表达缺如的人卵巢癌细胞系SK OV 3,通过体外及小鼠体内实验研究转基因的表达及对肿瘤的抑制作用。结果 :逆转录病毒介导的 p5 3基因能够在体外及小鼠体内人卵巢癌细胞SK OV 3中表达 ,并对人卵巢癌生长有抑制作用。体外抑制率为 5 7%～ 88% ;对体内肿瘤抑制率为 40 %。结论 :逆转录病毒介导的外源野生型p5 3能够抑制人卵巢癌生长 ,增加病毒滴度将进一步提高体内治疗效果     

流行性出血热患者血浆血栓素B_2和6—酮—前列腺素F_(1α)的测定

测定了37例流行性出血热患者血浆血栓素B_2(TXB_2)和6-酮-前列腺素F_(1α)水平,发现发热期和少尿期患者及有重度出血者血浆TXB_2/6-酮-PGF_(1α)(T/6)比值较正常对照明显降低,多尿、恢复期逐渐恢复正常。随病情加重,比值渐降低。上述改变有统计学意义。     

再生障碍性贫血外周血出现有核红细胞的临床意义探讨

观察396例再生障碍性贫血（AA）,28例外周血出现有核红细胞（Eb1）,重型再障（SAA）11例,慢性再障（CAA）17例。作者将Eb1（＋）AA与Eb1（－）AA病人临床特点和实验室指标进行比较,发现Eb1（＋）SAA较Eb1（－）SAA有更低的Hb值。腔道出血、败血症的发生率及死亡率较高,Eb1（＋）CAA较Eb1（－）CAA有更高的网织红计数（Ret）,骨髓多为增生活跃,红系比例偏高,治愈率亦高。并对Eb1在AA中出现的机理作了探讨。     

慢病毒载体介导不同内部启动子驱动绿色荧光蛋白表达效率

目的在人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)慢病毒载体中引入三种不同的内部启动子来驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)的表达,初步比较内部启动子的效率。方法慢病毒载体三质粒系统中,转移质粒的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接方法和内切酶酶切鉴定。磷酸钙沉淀法将三质粒共转染293T包装细胞。病毒滴度的测定采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数GFP阳性细胞。通过荧光显微镜观察绿色荧光的表达情况判断启动子的效率。结果构建了含PPT元件和含不同内部启动子和GFP的质粒。转染293T细胞后均观察到较强的绿色荧光。表达荧光的293T细胞数以巨细胞病毒(CMV)启动子最多,肝细胞特异性启动子(LSP)较少,泛醌启动子(PUB)介于两者之间。CMV为内部启动子的慢病毒载体滴度5×106I U/ml,其他二种启动子的滴度(1~2)×105I U/ml。结论在所选择的三种内部启动子中,CMV启动子的效率最高,LSP较强,PUB介于两者之间。     

褐家鼠传播的流行性出血热393例临床分析

本文报导了1982年11月～1983年4月沛县暴发流行的由褐家鼠传播的出血热393例临床分型、临床特征、治疗效果及转归。临床上以轻型多见,越期病例较多(约占半数以上),预后良好,病死率低。     

重组狗凝血因子Ⅷ的慢病毒介导体外表达的研究

本研究的目的是制备携带狗凝血因子Ⅷ（cFⅧ）基因的慢病毒载体,探讨慢病毒载体能否介导cFⅧ在体外的有效表达。用构建携带cFⅧ基因的慢病毒载体pTK161（含PUB启动子）和pTK162（含2OH1启动子）,同时构建含绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒载体pTK161′（含PUB启动子）和pTK162′（含2OH1启动子）的方法,分别与包装质粒ΔNRF、包膜蛋白质粒VSV-G共转染293T包装细胞,将包装好的病毒颗粒再感染293T细胞,检测病毒滴度和培养细胞上清中cFⅧ活性。结果显示：经限制性酶切鉴定,成功构建了pTK161、pTK162、pTK161′和pTK162′正向连接载体;pTK161′和pTK162′的病毒滴度分别为1.54×10^6U/ml和2.83×106U/ml;pTK161、pTK162感染靶细胞后24小时细胞上清中即可检测到cFⅧ的表达,72小时表达量达高峰。pTK162载体cFⅧ表达活性接近正常狗血浆FⅧ活性,而且明显高于pTK161（p〈0.05）,6周后cFⅧ表达活性仍达最高值的1/4。结论：构建的自身失活慢病毒载体可携带较大片段的cFⅧ基因,并在体外可获得有效表达;本研究为慢病毒载体介导的血友病A的基因治疗研究提供实验依据。     

不同启动子指导的HSV1-sr39TK/GCV系统对小鼠淋巴细胞的敏感性研究

目的观察慢病毒载体中不同启动子指导的突变型单纯疱疹病毒1型胸苷激酶(HSV1-sr39TK)基因在小鼠T淋巴细胞内的表达差异,并进一步比较对丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)的敏感性。方法用亚克隆技术将PCR扩增的HSV1-sr39TK基因分别连接至慢病毒载体不同启动子后,然后在HSV1-sr39TK基因后以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry sites,IRES)连接绿色荧光蛋白(green fluorescent pro-tein,GFP)报告基因;采用三质粒包装系统包装病毒,将病毒感染刀豆蛋白A(concanavalin,ConA)激活的小鼠淋巴细胞,分别用流式细胞术、RT-PCR法鉴定HSV1-sr39TK和GFP基因在小鼠淋巴细胞的表达,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察感染不同病毒的淋巴细胞对前体药物GCV的敏感性。结果不同启动子指导的HSV1-sr39TK及GFP基因均可在小鼠淋巴细胞表达,巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)启动子驱动表达能力最强,磷酸甘油激酶(phosphoglycerokinase,PGK)启动子最弱。感染含CMV启动子病毒的淋巴细胞对GCV的IC50值最小。结论在小鼠淋巴细胞内CMV启动子驱动的慢病毒载体HSV1-sr39TK基因表达最强,对前体药物GCV敏感性最高。     

苏北某县留守群体健康及其影响因素探析

对苏北某县留守群体的身体健康状况及其影响因素进行分析,发现留守群体慢性病患病率更高,经济困难是影响其健康的主要因素。为了提高农村留守群体健康水平,提出建立专项资助资金,对留守群体进行系统化管理;提供优惠政策,加强预防保健等对策措施。     

肾综合征出血热患者血小板功能、肝素样物质、AT-Ⅲ∶α的变化及相互关系

测定了５５例肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者血小板计数、血小板粘附功能、血小板聚集功能、血浆肝素样物质含量及抗凝血酶－Ⅲ活性（ＡＴ－Ⅲ∶α）。结果表明，ＨＦＲＳ患者有显著的血小板计数降低，血小板粘附、聚集功能减弱，血肝素样物质含量增高与ＡＴ－Ⅲ∶α下降（Ｐ＜０．０５），在病程的极期与危重型患者，上述改变更为显著。相关分析表明，在ＡＴ－Ⅲ∶α＞８０％的患者，血肝素样物质含量与血小板计数、血小板粘附率及血小板聚集率之间的相关系数分别为－０．４３４４，－０．７１５７，－０．５５４７（Ｐ值均＜０．０１）。提示，ＨＦＲＳ患者血肝素样物质含量的增高可能是血小板数量减少与粘附、聚集功能减弱的原因之一，而这一影响作用在ＡＴ－Ⅲ∶α＞８０％的患者尤为显著。     

BP1基因在成人急性白血病中的表达

目的　研究 β蛋白 1(BP1)基因在成人急性白血病中的表达并分析与急性白血病的关系。方法　用RT PCR方法分别检测 70例急性白血病患者、10名健康对照者及HEL细胞系中BP1基因的表达。结果　在正常人外周血、骨髓和完全缓解的患者骨髓中均没有检测到BP1基因的表达 ;在急性髓系白血病 (AML)中BP1表达阳性率为 5 7% (35例中 2 0例 ) ,在AML M5中阳性率高达 80 % (10例中 8例 ) ;在急性淋巴细胞白血病中无表达。结论　BP1与AML有一定的相关性 ,可作为AML的一种分子标志。