气不摄血证免疫性血小板减少症患者血管活性物质及相关炎症因子变化与临床意义

目的 本研究旨在探讨气不摄血证免疫性血小板减少症(ITP)患者血管活性物质及相关炎症因子在ITP发病中的作用及其临床意义。方法 气不摄血证ITP患者30例（ITP组），根据2016版ITP出血评分量表,分为未出血组、低危组（≤2分）及高危组（＞2分），健康正常人20例（对照组）。酶联免疫吸附（ELISA）法检测外周血血管活性物质一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶（NOS）及内皮素-1（ET-1）含量，AimPlex流式高通量技术检测外周血血管活性物质VEGF-A,VEGF-D及相关炎症因子IL-8,IL-10,IL-17A以及TNF-α含量。结果 与对照组相比较，气不摄血证ITP患者NOS、VEGF-A及IL-10含量显著降低（P＜0.05)，ET-1、IL-8、IL-17A以及TNF-α含量显著升高（P＜0.05)。同时，气不摄血证ITP患者中，高危组ET-1含量显著高于未出血组（P＜0.05），ET-1、VEGF-A含量与气不摄血证ITP患者出血显著相关（OR=1.012,95%CI:0.92-1.31；OR=1.065, CI:0.98-1.22,P＜0.05)。结论 血管活性物质及相关炎症因子在气不摄血证ITP患者的发病过程中具有重要作用，ET-1、VEGF-A可能是反应气不摄血证ITP患者出血风险的重要客观指标。     

长链非编码RNA HOTAIR 靶向miR-138 对脓毒症诱导的大鼠心肌炎症 反应和氧化应激的影响及作用机制研究

目的:探究同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)与miR-138对脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激的影响及作用机制。方法:将大鼠分为Control组、CLP组、siRNA+CLP组、si-HOTAIR+CLP组,构建大鼠CLP模型, PanoView b1500检测大鼠左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压(LVEDP),RT-PCR检测HOTAIR和miR-138表达水平,HE染色检测心肌病理损伤,试剂盒检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平,Western blot检测NF-κB信号通路蛋白表达水平;将心肌细胞分为Control组、LPS组、siRNA+LPS组、si-HOTAIR+LPS组、si-HOTAIR+LPS+inhibitor组,RT-PCR检测HOTAIR和miR-138表达水平,荧光素酶报告检测HOTAIR与miR-138靶向关系, MTT检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测MDA和SOD的水平,Western blot检测NF-κB信号通路蛋白表达水平。结果:在动物实验中,与Control组比较,CLP组LVSP、细胞活性、miR-138、SOD水平显著降低,LVEDP、病理性改变、细胞凋亡率、HOTAIR、cTnⅠ、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA及NF-κB通路蛋白表达水平显著升高;与CLP组比较,si-HOTAIR+CLP组LVSP、细胞活性、miR-138、SOD水平显著升高,LVEDP、病理性改变、细胞凋亡率、HOTAIR、cTnⅠ、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA及NF-κB通路蛋白表达水平显著降低。在细胞实验中,与Control组比较,LPS组细胞活性、miR-138、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、HOTAIR、MDA、NF-κB通路蛋白表达水平显著升高;与LPS组比较,si-HOTAIR+LPS组细胞活性、miR-138、SOD水平显著升高,细胞凋亡率、HOTAIR、MDA、NF-κB通路蛋白显著降低;与si-HOTAIR+LPS组比较,si-HOTAIR+LPS+inhibitor组细胞活性、SOD水平降低,细胞凋亡率、MDA、NF-κB通路蛋白表达水平升高。在荧光素酶报告实验中,与HOTAIR wt组比较,HOTAIR wt+miR-138 mimic组荧光素酶活性显著降低。结论:HOTAIR可以通过沉默miR-138,促进脓毒症诱导的大鼠心肌炎症反应和氧化应激,其作用机制与NF-κB信号通路激活有关。     

中国南海圆盘肉芝软珊瑚萜类成分研究

目的研究采自中国南海的圆盘肉芝软珊瑚的萜类成分。方法采用1H-NMR导向分离法,使用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱(HPLC)等方法进行化学成分分离,根据质谱(MS)、核磁共振(NMR)等波谱数据鉴定化合物结构。结果从圆盘肉芝软珊瑚的丙酮提取物的乙醚萃取部位中分离得到9个萜类化合物,分别鉴定为瑞士松烯A(1)、(E,E,E)-7,8-epoxy-1-isopropyl-4,8,12-trimethylcyclotetradeca-1,3,11-triene(2)、sarcophytonolide A(3)、deacetylemblide(4)、4Z,12Z,14E-sarcophytolide(5)、sarcrassin D(6)、emblide(7)、(4Z,8S,9R,12E,14E)-9-hydroxy-1-isopropyl-8,12-dimethyloxabicyclo[9.3.2]-hexadeca-4,12,14-trien-18-one(8)、β-榄香烯(9);其中化合物1~8为二萜类,化合物9为倍半萜类。结论化合物4是1个新的天然产物,并首次报道其13C-NMR数据。化合物1、3、5、8为首次从该种软珊瑚中分离得到。生物活性研究结果表明,化合物5对人蛋白酪氨酸酶(PTP1B)具有中等强度的抑制作用(IC50=15.4μmol/L)。     

口服青黄散与低强度化疗治疗老年人急性髓系白血病生存情况比较

目的 探讨口服青黄散与低强度化疗治疗老年人急性髓系白血病(AML)的生存情况.方法 对2015年1月至2017年12月在中国中医科学院西苑医院接受治疗的42例老年AML患者临床资料进行回顾性分析,其中20例接受口服青黄散治疗(青黄散组),22例接受低强度化疗(低强度化疗组),比较两组患者的生存情况.结果 低强度化疗组和青黄散组中位生存期(13.0个月比13.5个月,x2=0.096,P=0.757)、1年生存率(59.1％比70.0％,x 2=0.543,P=0.461)、2年生存率(13.6％比15.0％,x 2=0.016,P＞0.05)、3年生存率(4.6％比5.0％,x2=0.005,P＞0.05)比较,差异均无统计学意义.分层分析显示,低强度化疗组和青黄散组年龄≥75岁(12个月比12.5个月,x 2=1.317,P=0.251)、体能状况评分＞2分(12个月比12个月,x2=0.834,P=0.361)、继发AML(10个月比14个月,x2=1.552,P=0.213)、造血干细胞移植合并疾病指数＞2(12个月比13个月,x2=1.726,P=0.189)以及差的遗传学特征(12个月比8个月,x2=0.479,P=0.489)患者中位生存期比较,差异均无统计学意义.结论 口服青黄散与低强度化疗治疗老年AML患者的生存期相似.不愿接受低强度化疗的老年AML患者,尤其75岁以上患者,可以选择口服青黄散治疗.     

基于中医传承辅助平台探索胡晓梅治疗骨髓增殖性肿瘤的用药规律

目的：基于中医传承辅助平台（V2.5）,探讨胡晓梅治疗骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPNs)的用药规律,为MPNs的治疗提供新思路。方法：通过回顾性研究方法,收集胡晓梅治疗MPNs门诊有效处方50首,应用中医传承辅助平台构建胡晓梅治疗MPNs的数据库。结果：对胡晓梅数据库中症状、四气、五味、归经分布、频次统计、组方规律和新方进行分析,得出胡晓梅治疗MPNs的常用药物有柴胡、赤芍、生地黄、红花等15种,核心组合药物中多见红花、赤芍等药物与柴胡关联,并演化得到8首治疗MPNs的新处方。结论：以中医传承辅助系统为平台,利用文本挖掘、关联规则等数据挖掘方法,较好地挖掘了胡晓梅治疗MPNs的用药规律,即从虚、毒、瘀病理因素入手,以益气活血解毒为法,扶正祛邪兼顾。     

气不摄血证免疫性血小板减少症患者细胞免疫功能变化及其临床意义

目的:观察气不摄血证免疫性血小板减少症(ITP)患者细胞免疫功能变化,从细胞层面探究气不摄血证ITP的生物学基础。方法:选取2016年12月至2017年5月在中国中医科学院西苑医院与北京中医药大学东方医院门诊就诊的ITP确诊患者42例,依据中医证候积分分级标准,将患者分为轻度、中度、重度3组,同时纳入26例体检健康者作为对照组,观察各组Th1、Th2、Th17、Treg、Breg细胞的表达比例变化情况,并对上述免疫细胞的表达与中医证候积分的相关性进行分析。结果:与正常对照组比较,气不摄血证ITP患者Breg与Th17细胞的表达比例下降,Th1细胞的表达比例上升(P0.05),Th1/Th2呈Th1型(P0.05),Treg与Th2细胞的表达以及Th17/Treg比值无统计学意义。与对照组比较,轻度组(P0.05)、中度组(P0.05)、重度组(P0.05)的Breg细胞的表达显著降低,Th1细胞的表达和Th1/Th2比值显著升高,Treg、Th2以及Th17细胞的表达、Th17/Treg比值差异无统计学意义。中度组与重度组Breg细胞的表达显著低于轻度组(P0.05),其他免疫细胞的表达与轻度组比较差异无统计学意义。重度组上述免疫细胞细胞的表达与中度组比较差异无统计学意义。Bre细胞的表达与中医证候积分具有负相关性(r=-0.488,P=0.001),其余免疫细胞无相关性。结论:气不摄血证ITP患者细胞免疫功能变化表现为Th1细胞表达增加导致Th1/Th2失衡。Th17与Breg细胞表达水平下降。Breg细胞表达水平可能反映了气不摄血证患者的气虚严重程度。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓与循环肿瘤DNA突变位点一致性的分析

目的:分析骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓肿瘤DNA(BM-tDNA)与外周血浆循环肿瘤DNA(PP-ctDNA)突变位点的一致性。方法:用NGS 127-gene panel的骨髓与外周血同期送检者(19例)检测肿瘤DNA,分析BM-tDNA与PP-ctDNA突变位点VAF的一致性。随机加测其中5例患者外周血细胞的肿瘤DNA(PC-t DNA),并分析PC-tDNA与PP-ctDNA以及BM-tDNA突变位点VAF的一致性。另外检测和分析13例非同期送检患者PP-ctDNA与BM-tDNA的VAF差值,并与同期患者PP-ctDNA与BM-tDNA VAF差值进行比较。结果:同期(19例)与非同期(13例)患者人均PP-ctDNA浓度分别为0.59 ng/μl和0.604 ng/μl,其中位数浓度分别为0.330 ng/μl和0.338 ng/μl。19例同期送检患者BM-tDNA与PP-ctDNA交集位点的VAF有较好的一致性(R~2=0.9693;P0.05),其中单碱基置换(SNP)位点VAF的一致性(R~2=0.9712)较插入缺失(Indel)位点为好(R~2=0.6813),BM-tDNA与PP-ctDNA中有临床意义的位点的检出率和VAF均有较好的一致性(R~2=0.9203,P0.05)。19例同期送检患者中,12例初诊(R~2=0.9325,P0.05)和5例治疗后(R~2=0.9875,P0.05)患者BM-tDNA与PP-ctDNA的VAF均有较好的一致性。随机加测其中5例患者的PC-tDNA结果显示,PC-tDNA与PP-ctDNA(R~2=0.8783)以及BM-tDNA(R~2=0.9633)突变位点的VAF均有较好的一致性(P0.05)。与19例同期送检患者相比,13例非同期送检BM-tDNA与PP-ctDNA VAF差值显著增大(P0.05)。结论:PP-ctDNA浓度稳定,临床有意义位点与BM-tDNA一致性高,样本容易采集,可代替骨髓作为基因检测的生物样本。     

胡晓梅中西医结合治疗骨髓增殖性肿瘤的经验

胡晓梅,主任医师,博士生导师,中国中医科学院中青年名中医,从事中医血液病临床工作30余年,积累了丰富的临床经验,形成自己的思辨特色。胡晓梅在治疗骨髓增殖性肿瘤方面,中西医结合,将西药减低剂量甚至停用,中医以益气解毒化瘀为法,效果显著。     

口服含砷中药复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征患者生存期分析

目的分析接受口服含砷中药复方青黄散治疗的骨髓增生异常综合征患者生存期,并探讨影响患者生存期的因素。 方法对2015年1月至2016年12月在中国中医科学院西苑医院接受复方青黄散治疗的170例骨髓增生异常综合征患者进行电话和门诊随访,随访截至2018年4月1日,终极指标为生存期。生存资料的描述采用Kaplan-Meier分析。影响服用复方青黄散患者生存的预后因素采用单变量分析,不同预后因素的组间生存分布采用Log-rank检验,组间中位生存期比较采用非参数检验,组间生存分布采用Log-rank检验,年生存率的比较采用χ²检验。 结果170例骨髓增生异常综合征患者中位生存期为54个月,1、3、5以及10年生存率分别为100%、85.88%、38.23%以及5.88%。44例伴原始细胞增多患者中,13例患者治疗后原始细胞比例下降。所有170例患者中,仅2例原始细胞增多患者进展为急性髓细胞白血病。分析各因素对位生存期的影响,结果显示,年龄≤60岁患者位生存期（55个月）显著长于年龄>60岁患者（47个月）,差异具有统计学意义（χ²=4.576,P=0.032）;女性患者中位生存期（55个月）显著长于男性患者（47个月）,差异具有统计学意义（χ²=6.166,P=0.013）;染色体核型预后很好/好患者中位生存期（57个月）显著长于预后中等患者（43个月）,差异具有统计学意义（χ²=4.133,P=0.042）。分析各因素对年生存率的影响,结果显示,≤60岁患者3年生存率显著高于>60岁患者,差异具有统计学意义（χ²=6.98,P=0.01）,女性患者5年生存率显著高于男性患者,差异具有统计学意义（χ²=6.98,P=0.01）,预后很好/好核型患者3年和5年生存率最高,预后差/很差核型患者次之,差异具有统计学意义（χ²=6.952,P=0.031）,预后中等患者最低,差异具有统计学意义（χ²=6.239,P=0.044）,IPSS-R危度对患者1、3、5以及10年生存率均无显著影响（P>0.05）。 结论复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征,可使患者获得长期生存,高危/极高危MDS患者仍可以从复方青黄散治疗中获益。     

免疫性血小板减少症患者促炎因子与抑炎因子分泌失衡

目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)患者促炎因子与抑炎因子的分泌状态。方法:纳入研究的ITP患者35例,健康对照组28例。应用Aim Plex流式高通量多细胞因子检测技术检测IL-8、IL-17A、IL-22、TNF-α、IFN-γ、IL-4、CD40、CD40L、TGF-β和IL-10的表达水平。结果:与健康对照组相比,促炎因子IL-8、IL-17A、IL-22、TNF-α和IFN-γ在ITP组表达均显著升高(P0.05);而抑炎因子IL-4、CD40L、TGF-β和IL-10在ITP组的表达均显著降低(P0.05);ITP组CD40水平与对照组比较无显著差异(P0.05)。ITP组和对照组细胞因子TNF-α表达水平均与血小板计数显著相关(ITP组r=0.64,P=0.04;对照组r=-0.41,P=0.02),两组CD40、TGF-β、CD40L、IL-8、IL-17A、IL-22、IL-10、IL-1β、IFN-γ和IL-4的表达水平均与血小板计数无明显相关性。结论:ITP患者存在有促炎因子和抑炎因子的失衡现象。血小板计数减少可能受到细胞因子TNF-α表达的调控。