重症监护病房患者金黄色葡萄球菌感染的分子流行病学研究

目的通过对重症监护病房患者金黄色葡萄球菌(SA)感染的分子流行病学研究,为临床预防和研究SA感染提供科学依据。方法收集重症监护病房近3年SA培养阳性病例52例,(去除同一患者相同和不同部位标本)采用多重PCR扩增SA的毒素基因tst和sec,分析毒素基因的存在与发热的关系,通过PCR扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)基因组稀有限制区旁的DNA序列,对MRSA进行基因分型。结果 52例患者中,19例为对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA),33例为MRSA,其中有22例MRSA携带tst和sec基因(66.7%),显著高于MSSA 7例携带tst和sec基因(P0.05);37例伴有发热,其中29例含有tst和sec基因,15例不伴发热,其中5例含tst和sec基因,发热组携带两种基因比率显著高于不发热组(P0.05);稀有限制区PCR(IRS-PCR)分型表明,2012~2014年感染MRSA的33例患者有22例为同种基因型。结论 tst和sec基因的存在可能与SA引起的发热有关,近3年该病房存在MRSA暴发流行可能。     

中国14家教学医院2005-2008年临床分离肺炎链球菌耐药性分析

目的 监测2005-2008年我国不同地区14家教学医院临床分离肺炎链球菌的耐药性,为临床经验用药提供科学建议.方法 2005-2008年从14家教学医院收集非重复的1 317株临床分离肺炎链球菌,其中2005年271株、2006年391株、2007年363株、2008年292株.菌株主要为社区呼吸道感染病原菌,即以呼吸道感染收治的门诊和急诊患者或入院48 h内发生呼吸道感染的患者中分离的肺炎链球菌.菌株分离地区包括华北地区、东北地区、华南地区、华中及西北地区以及华东地区.患者按年龄分为成人组(≥18岁)、青少年组(6～17岁)和儿童组(≤5岁).菌株经中心实验室复核后,采用Etest法、琼脂稀释法或纸片扩散法测定8类17种抗菌药物的MIC或抑菌圈直径,数据输入WHONET5.5软件分析敏感率、中介率、耐药率、MIC50、MIC90.结果 肺炎链球菌对利奈唑胺(100%)和氟喹诺酮类药物(95.2%～99.7%)保持了高的敏感率.对于β内酰胺类药物,菌株对阿莫西林-克拉维酸敏感率为73.8%～92.1%,对青霉素、头孢曲松和头孢吡肟也有较高的敏感率,但逐年降低.3种二代头孢菌素的敏感率较低(2008年为36.3%～38.4%).对于红霉素、阿奇霉素、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲 唑和四环素,菌株的敏感率均较低且逐年下降.PISP的比例在逐年增大,从2005年的4.4%上升至2008年的20.2%.华北地区的PNSP发生率较低(6.0%),而华中及西北地区和华东地区的PNSP发生率较高(30.1%和38.7%).成人组的PNSP发生率(15.7%)明显低于儿童组(33.0%),也低于青少年组(38.2%).结论 肺炎链球菌对利奈唑胺和氟喹诺酮类药物在2005-2008年间保持了较高的敏感性,而对青霉素类和头孢菌素类的敏感性逐年降低,临床需慎用对肺炎链球菌活性较低的药物,包括大环内酯类、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲 唑和四环素.

Abstract：

Objective To investigate antimicrobial resistance among Streptococcus pneumoniae clinically isolated from 14 teaching hospitals located at different areas in China in 2005-2008 and to give logical guidance for clinical empirical therapy.Methods A total of 1 317 non-repetitive S.pneumoniae isolates in 14 teaching hospitals from 2005-2008 were collected and sent to the central lab for reidentification and susceptibility testing, including 271 isolates collected in 2005, 391 isolates collected in 2006, 363 isolates collected in 2007 and 292 isolates collected in 2008. Most of the isolates were from community-acquired respiratory tract infections, which were isolated from outpatient or emergency department patients with respiratory tract infections or those patients with respiratory tract infections within ≤48 hours hospitalization.The districts where the organisms were isolated include North China, Northeast China, South China, Central and Northwest China and East China.The patients included adults, teenagers and children.The minimum inhibitory concentrations (MICs) or inhibitory zone diameter of 17 antimicrobial agents were determined by Etest method, agar dilution method or disk diffusion method.WHONET5.5 software was used to analyze susceptibility rate, intermediate rate, resistance rate, MIC50 and MIC90.Results Linezolid (100%) and fluoroquinolones (95.2%-99.7%) showed excellent activities against S.pneumoniae.Among β-lactams, amoxicillin-clavulanic acid remained high activities (73.8%-92.1%),followed by penicillin, ceftriaxone and cefepime with year-over-year decrease in activities.The activities of three second-generation cephalosporins were low (36.3%-38.4% in 2008).The activities of erythromycin, azithromycin, clindamycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracycline against S.pneumoniae were poor and decreased year over year.The incidence of penicillin non-susceptible S.pneumoniae (PNSP) was increasing especially for PISP (from 4.4% in 2005 to 20.2% in 2008).The incidence of PNSP in North China was low (6.0%), while this value were high in central China and East China (30.1% and 38.7%, separately).The incidence of PNSP in adults (15.7%) was obviously lower than that in children(≤5 years:33.0%) and teenagers (6-17 years:38.2%).Conclusions linezolid and fluoroquinolones showed excellent in vitro activity against S.pneumoniae, followed by penicillin and cephalosporins with year-over-year decrease of activity. Clinicians should pay more attention when using those antimicrobial agents with poor activity against S.pneumoniae, which include macrolides, clindamycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracycline.     

大肠埃希菌中质粒AmpC型β内酰胺酶基因型的检测

目的 :研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC型 β内酰胺酶的基因型。 方法 :收集对头孢西丁不敏感的 4 2株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,用酶提取物三维试验检测AmpC酶 ;用等电聚焦电泳、接合试验、聚合酶链反应 (PCR)确定AmpC型酶的表型和基因型。结果 :16株菌高产AmpC酶 ,其中 11株同时产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ;这 16株菌对亚胺培南敏感 ,5株只产AmpC酶的菌对头孢吡肟敏感 ;等电聚焦电泳发现这 16株菌产生 2～ 5种酶 ,且都有一个能为氯唑西林抑制的、等电点>7.8的酶带 ;1株大肠埃希菌通过接合试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌 ;PCR扩增和测序证实其为质粒介导的ACT 1型AmpC酶。 结论 :2 0 0 0年我院分离的对头孢西丁不敏感的 4 2株革兰阴性杆菌中证实有 15株大肠埃希菌和 1株肺炎克雷伯菌产AmpC酶 ,并在国内首次发现 1株大肠埃希菌产ACT 1型质粒AmpC酶。     

甲氧西林耐药溶血葡萄球菌糖肽类耐药突变株体外筛选

目的：调查在体外糖肽类选择性压力下,溶血葡萄球菌对糖肽类敏感性的变化。方法：琼脂稀释法检测万古霉素、替考拉宁和苯唑西林对6株溶血葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）,连续浓度梯度法体外筛选万古霉素和替考拉宁耐药突变株。结果：6株甲氧西林耐药溶血葡萄球菌（MRSH）均筛选出替考拉宁耐药突变株（MIC=32～128μg／mL）．未筛选出万古霉素耐药突变株。万古霉素对6株替考拉宁耐药突变株仍保持较好的抗菌活性（MIC=2～4μg／mL）。结论：万古霉素对MRSH抗菌活性稳定,在抗生素压力下不易筛选出耐药株突变株,替考拉宁对MRSH抗菌活性很不稳定,在抗生素压力下极易筛选出耐药株突变株     

结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变快速检测方法的建立

目的建立结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变的快速检测方法。方法根据结核分枝杆菌标准株H37Rv序列，自行设计覆盖rpoB、katG、inhA基因突变区的系列寡核苷酸探针，并检测临床样品中结核分枝杆菌的基因突变情况，以此来判断耐药结果。结果在56个利福平耐药菌株中，有50个菌株都在rpoB基因上榆出有突变，利福平耐药突变检出率为89．3％（50／56）；有30个利福平敏感菌株rpoB基因上都未检出突变。有58个异烟肼培养的耐药菌株中有47个在katG或inhA基因上检出有突变，异烟肼耐药突变检出率为81．0％（47／58）；有30个异烟肼敏感菌株katG或inhA基因上未检出突变。结论用膜芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性，具有较高的特异性和敏感性，可用于临床结核分枝杆菌耐药性的检测。     

2008年中国15所教学医院医院感染患者分离的肠杆菌科细菌耐药性分析

目的监测2008年我国不同地区15所教学医院医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1 357株医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.6软件进行统计分析。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌敏感率较高的药物有美罗培南(97.6%～100%)、帕尼培南(79.8%～98.4%)、亚胺培南(64.9%～98.1%)、厄他培南(91.3%～97.4%)、哌拉西林-他唑巴坦(87.2%～97.4%)、头孢美唑(82.1%～97.0%)和阿米卡星(89.9%～93.8%)。肠杆菌属细菌敏感率较高的抗菌药物有美罗培南(98.7%)、帕尼培南(96.4%)、亚胺培南(95.4%)和阿米卡星(85.7%)。弗劳地枸橼酸杆菌和黏质沙雷菌敏感率较高的药物有碳青霉烯类抗生素(92.0%～100%)、哌拉西林-他唑巴坦(93.1%～99.1%)、阿米卡星(89.0%～94.3%)和头孢吡肟(86.2%～93.1%)。结论碳青霉烯类抗生素、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星对医院分离的肠杆菌科细菌保持了较高的抗菌活性,头孢美唑对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌表现出良好的抗菌活性。     

G试验对深部真菌感染的早期诊断价值分析

目的 探讨G试验在深部真菌感染(DFI)早期诊断中的临床价值.方法 1 995例患者G试验检测结果,计算阳性率,分析阳性患者临床科室分布情况;比较356例患者G试验和体液标本真菌培养检测结果.结果 在1 995例患者中G试验阳性率为16.46%(328/1 995).356例患者G试验阳性66例、阴性290例,真菌培养阳性24例、阴性332例,二者阳性、阴性符合率分别为30.43%和85.67%.结论 G试验在深部真菌感染早期诊断中具有重要临床价值.     

阴沟肠杆菌6株中产超广谱β内酰胺酶的基因型

目的：研究阴沟肠杆菌6株的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的基因型。方法：分别使用对TEM型、SHV型和CTX-M型基因特异的引物,PCR扩增6株阴沟肠杆菌接合子Esbl基因,对PCR产物直接测序分析其基因型。结果：3株阴沟肠杆菌的接合子均含有CTX—M-3型酶,同时含有TEM型酶。另3株阴沟肠杆菌接合子均含有一种等电点为8．3未知的β内酰胺酶,同时含有一种pI为5．4或5．5未知的β内酰胺酶。结论：临床分离的阴沟肠杆菌可产CTX-M-3型酶,对头孢菌素类产生耐药性。     

医院细菌耐药监测研究

目的 了解深圳地区医院临床分离菌的耐药情况。方法 2001年1--2002年6月，本院临床分离菌用Kirby-Bauer法进行药敏试验。结果 1734株细菌中革兰阳性菌占40．6％，革兰阴性菌占59．4％。最常见的临床分离菌是凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等；MRSA和MRCNS分别为37．8％和78．8％；粪肠球菌耐万古霉素株7．6％；大肠埃希菌中产ESBLs株占34．9％，肺炎克雷伯菌占34．2％；产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率(除碳青酶烯类外)均显著高于非产ESBLs株。结论 细菌耐药性仍是目前临床上的难题，需采取积极措施，减缓细菌耐药性的增长。     

2327例血液及体液快速培养结果分析

目的：提高血培养及体液培养阳性率，快速准确作出病原学诊断。方法：用BacT/ALERT3D全自动血培养仪对2327份血液和体液标本进行检测，针对不同年龄患者选用标准血培养瓶，并对其检出阳性的时间、阳性率和病区分布、细菌种类及部分细菌耐药性进行评估。结果：培养时间缩短到5d，培养阳性率为20．7％，其中血液为16．9％，各种体液为32．2％，共检出细菌49种，真菌6种，血培养中葡萄球菌的比例高达60．1％，其中凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率高达90％。结论：BacT／ALERT 3D全自动血培养仪提高了血培养及体液培养阳性率，缩短了检出时间。