人血浆凝血酶原和异常凝血酶原的BA-ELISA法检测

应用与凝血酶原及异常凝血酶原有免疫交叉反应的非Ca(Ⅱ)依赖性抗人凝血酶原抗体,建立夹心BA-ELISA法,检测人血浆凝血酶原的最低浓度可达1ng/ml。血浆经皂土和柠檬酸钡吸附处理,除去纤维蛋白原和凝血酶原后,可用本法检出存留于血浆中的微量异常凝血酶原,并测得健康人血浆异常凝血酶原的均值为74.61±19.43ng/ml。本法操作简便,特异性强,重复性好。     

高脂血症患者APOB／CIII／E基因多态性交互作用的研究

目的探讨原发性高脂血症载脂蛋白（Apo）B、CIII、E基因中ApoB MspI、ApoB XbaI、ApoB EcorI、ApoCIII3175、ApoCIII3206、ApoE112／158等7个位点基因多态性间的交互作用。方法采用病例一对照相关性研究策略，选择昆明地区汉族作为研究对象，用基因芯片检测技术，对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行ApoB MspI、ApoB Xbal、ApoB EcorI、ApoCIII3175、ApoCIII3206、ApoE112／158等6个位点基因多态性进行检测。用比值比（odd ratio，OR）估计相对危险度。用MDR分析多基因相互作用。结果用MDR分析法，对昆明地区汉族高脂血症患者上述6个位点基因型多态性的基因-基因交互作用进行了分析，发现两位点MspI—E112／158、三位点MspI—CIIB206-E112／158和四位点MspI—XbaI—CIII3206-E112／158这三种模型均具有统计学意义（P〈0．001），但三位点MspI—CIII3206-E112／15模型的交叉验证一致性系数最大（10／10）为最佳模型，该模型包含了位点ApoBMspI、ApoCIII3206和ApoE112／158位点．提示这三个基因位点之间可能存在基因-基因交互作用。该模型的Odd Ratio为14．870（95％CI：1．305—169．43）。结论发现昆明地区汉族人群7个高脂血症候选基因位点中，MspI—CIII3206-E112／158三个基因多态性之间可能存在基因-基因交互作用。     

产ESBLs大肠埃希菌的耐药表型及水平传播研究

目的了解昆明市第一人民医院临床分离的大肠埃希菌超广谱p内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases，ESBLs）的耐药表型和水平传播情况。方法对2005年1月～12月昆明市第一人民医院临床分离的197株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs，用Kirby—Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验；用接合试验了解产ESBLs基因是否定位于质粒，并对接合子进行KB法药敏试验和ESBLs表型确证。结果197株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌104株，检出率52．79％。在各类标本中产ESBLs菌株在纤维支气管镜（bronchofibroscope，BF）刷片中分离率最高（75％），就科别来看内分泌科标本的产ESBLs大肠埃希菌的分离率最高（78.57％）。除亚胺培南和阿米卡星外，产ESBLs菌株对其他15种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P〈0．01）。104株产ESBLs菌株中有91株符合供体菌的标准,64株接合成功，接合子均确证产ESBLs，其接合率为70．33％。64株供体菌及其相应接合子的药敏结果显示除复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、庆大霉索、头孢吡肟和头孢西丁外，供体菌及其接合子对其他12种药物耐药率无显著性差异（P〉0．05）。结论昆明市第一人民医院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，临床应加强对大肠埃希菌耐药性的监测，严格掌握抗生素的使用指征，防止耐药菌株的传播流行。     

产ESBLs大肠埃希菌CTX—M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌中的检出率，并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验；采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M酶基因型，对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株（52．79％）ESBLs表型检测阳性，其中91株符合供体菌标准，64株（70．33％）接合成功，接合子均确证产ESBLS。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株（94．23％）携带CTX-M型基因，其中38株（36．54％）检出blaCTX-M-1组基因，69株（66．35％）检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株（79．69％）携带CTX-M型基因，其中18株（28．13％）检出blaCTX-M-1组基因，35株（54．69％）检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主，同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。     

昆明地区原因不明复发性流产妇女与HLA—G14bp基因多态性相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原G（human leukocyte antigen，HLA）3’非编码区（UTR）14bp基因多态性与原因不明复发性自然流产的相关性。方法对原因不明复发性流产患者26例和正常妊娠妇女51例静脉采血，提取DNA。用PCR方法检测HLA—G 14bp基因多态性。结果-14bp／-14bp缺失纯合子、＋14bp／＋14bp插入纯合子、-14bp／＋14bp缺失／插入杂合子基因型在两组间分布差异无显著意义；一14bp和＋14bp等位基因频率在两组间也无显著型差异。结论昆明地区部分原因不明复发性流产患者的病因与HLA—G 14bp基因多态性可能无直接相关性。     

云南汉族SLE患者临床表型与HLA-Ⅱ类基因的相关性研究

目的 探讨云南汉族系统性红斑狼疮(SLE)患者各种临床表型与HLA-DRB1、DQA1、DQB1等位基因及单体型的相关性.方法 采用多聚酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对73例云南汉族SLE患者进行DRB1、DQA1、DQB1 3个位点的基因分型.结果 云南汉族SLE患者中有蝶形红斑皮损者DR15(DRB1*1501-*1502)等位基因频率增加(80.0%vs 37.5%,x2=6.658,P=0.010,OR=6.667);DR15-DQB1*0501单体型频率增加(同前),排除DQB1的影响后,仍与DR15相关.结论 云南汉族SLE蝶形红斑皮疹的出现与DR15(DRB1*1501-*1502)等位基因及DR15-DQB1*0501单体型相关.其它临床亚型如盘状红斑、光敏感、口腔溃疡、关节炎、浆膜炎、肾脏损害、神经系统损害、血液系统损害、血管炎等未见与特定等位基因及单体型相关.     

大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药耐药机制的研究近况

喹诺酮类药物是一类化学合成药物,由于其具有较强抗菌活性,临床上已广泛用于各种细菌性感染。随着喹诺酮类药物在临床上越来越广泛的应用,喹诺酮类药物的耐药也逐渐上升。已知细菌对喹诺酮类药物的主要耐药机制为:①靶位基因Ⅱ型拓扑异构酶即DNA回旋酶基因(gyrA和gyrB)和拓扑异构酶Ⅳ基因(parC和parE)突变;②细菌膜通透性的降低和膜上药物主动外排泵的激活;③质粒上qnr基因介导细菌对喹诺酮类耐药。     

ABO-HDN“二孩”患儿多项指标的联合检测分析

目的对确诊为ABO新生儿溶血病(ABO-HDN)的"二孩"患儿,对产前与产后多项相关检测指标进行综合分析,做到早预防、早诊断、早治疗。方法选取2013-2016年在该院检查并确诊为ABO-HDN患儿92例,产前微柱凝集法检测父亲、母亲血型及母亲不规则抗体筛选,母亲血清IgG抗A(B)抗体效价,产后微柱凝集法进行新生儿溶血3项试验,根据新生儿溶血3项试验结果,分成5组。A组:直抗试验(+)、游离试验(+)、释放试验(+);B组:直抗试验(-)、游离试验(+)、释放试验(+);C组:直抗试验(+)、游离试验(-)、释放试验(+);D组:直抗试验(-)、游离试验(-)、释放试验(+);E组:直抗试验(+)、游离试验(-)、释放试验(-);全自动分析仪检测患儿总胆红素、非结合胆红素、血红蛋白、网织红细胞百分比、乳酸脱氢酶水平。结果92例ABO-HDN患儿经溶血3项试验,发现5组母亲IgG抗A(B)抗体效价越高,患儿病情越严重,差异具有统计学意义(P0.05);网织红细胞百分比与乳酸脱氢酶在5组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论产前产后多项实验室指标联合检测,对诊断"二孩"ABO-HDN更为准确,同时有助于掌握患儿病情发展状态,降低并发症和后遗症的出现。     

用BA-ELISA法测定载脂蛋白A-I

介绍一种高灵敏度的裁脂蛋白A-I(Apo A-I)的测定方法——生物素-亲和素酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。本法的工作范围为0.25～4ng Apo A-I,灵敏度约0.1ngAp0 A-I,较已报道的放射免疫法(RIA)和ELISA高3～5倍以上。热处理或加入变性剂均不影响人血清Apo A-I的免疫测定结果。组内和组间变异系数分别为4.55和8.04。经本法测定77名正常成年人血清Apo A-I为1.34±0.23g/L((?)±SD),而且正常成年人血清ApoA-I浓度与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的浓度呈高度相关(r=0.83,p<0.001)。     

一株少见耐药表型产酸克雷伯菌致感染一例

患者女，62岁，自2003年9月25日以来因尿路感染和肺部感染，曾用氨苄西林、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物治疗。患者因肺部感染于2003年10月31日～11月8日期间共送6份下呼吸道痰标本做细菌培养和药敏试验。