2006年版CLSI/NCCLS有关抗生素敏感试验操作标准的更新要点

2006年1月美国临床和实验室标准化协会(the Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI,原名NCCLS)公布的第16版抗生素敏感试验操作标准(M100-S16)对15版进行了更新,以取代2005年及以前版本的内容。其主要变化源于2005年召开的抗生素药物敏感试验的专业会议。第16版的更新要点如下:(1)再次阐明奇异变形杆菌ESBLs检测的筛选与确认试验;(2)新增铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食假单胞菌的纸片扩散和MIC解释标准的4个独立表格;(3)删除达托霉素(daptomycin)纸片扩散法的解释标准,修改了葡萄球菌属和链球菌属(除肺炎链球菌外)关于达托霉素琼脂稀释法药敏试验的建议,指出肠球菌属达托霉素琼脂稀释试验尚未被确认; (4)增加了万古霉素敏感性降低之金黄色葡萄菌的万古霉素BHI琼脂筛选试验;(5)修正了万古霉素对葡萄球菌属的     

ABX Pentra 120血液分析仪性能评估

目的评估法国ABX Pentra 120全自动血液分析仪的性能.方法按照国际血液学标准化委员会(ICSH)的有关规定对常用血液指标进行检测.结果 ABX Pentra120血液分析仪的日内精度、日间精度在规定范围之内;准确性良好;与手工分类结果吻合;线性良好;交叉污染率2%;与Coulter STKS对照分析,两者具有高度相关性,无统计学差异;异常样品测定与正常样品比较 大的不成熟细胞(LIC)、异常淋巴细胞有显著性差别(P＜0.05 ).结论 ABX Pentra120血液分析仪结果准确、可靠,可供国内大中型医院使用.     

大蒜素对MRSA和白念珠菌后效应的研究

目的 测定大蒜素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和白念珠菌(C.alb)的最低抑菌浓度(MIC)、抗菌药后效应(PAE)和抗菌后亚抑菌浓度效应(PASME).方法 取临床分离的MRSA和C.alb各1株,以肉汤稀释法测定大蒜素MIC;以菌落计数法测定菌落形成单位(CFU),根据CFU做生长曲线,计算PAE和PAS...     

中国14家教学医院2005-2008年临床分离肺炎链球菌耐药性分析

目的 监测2005-2008年我国不同地区14家教学医院临床分离肺炎链球菌的耐药性,为临床经验用药提供科学建议.方法 2005-2008年从14家教学医院收集非重复的1 317株临床分离肺炎链球菌,其中2005年271株、2006年391株、2007年363株、2008年292株.菌株主要为社区呼吸道感染病原菌,即以呼吸道感染收治的门诊和急诊患者或入院48 h内发生呼吸道感染的患者中分离的肺炎链球菌.菌株分离地区包括华北地区、东北地区、华南地区、华中及西北地区以及华东地区.患者按年龄分为成人组(≥18岁)、青少年组(6～17岁)和儿童组(≤5岁).菌株经中心实验室复核后,采用Etest法、琼脂稀释法或纸片扩散法测定8类17种抗菌药物的MIC或抑菌圈直径,数据输入WHONET5.5软件分析敏感率、中介率、耐药率、MIC50、MIC90.结果 肺炎链球菌对利奈唑胺(100%)和氟喹诺酮类药物(95.2%～99.7%)保持了高的敏感率.对于β内酰胺类药物,菌株对阿莫西林-克拉维酸敏感率为73.8%～92.1%,对青霉素、头孢曲松和头孢吡肟也有较高的敏感率,但逐年降低.3种二代头孢菌素的敏感率较低(2008年为36.3%～38.4%).对于红霉素、阿奇霉素、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲 唑和四环素,菌株的敏感率均较低且逐年下降.PISP的比例在逐年增大,从2005年的4.4%上升至2008年的20.2%.华北地区的PNSP发生率较低(6.0%),而华中及西北地区和华东地区的PNSP发生率较高(30.1%和38.7%).成人组的PNSP发生率(15.7%)明显低于儿童组(33.0%),也低于青少年组(38.2%).结论 肺炎链球菌对利奈唑胺和氟喹诺酮类药物在2005-2008年间保持了较高的敏感性,而对青霉素类和头孢菌素类的敏感性逐年降低,临床需慎用对肺炎链球菌活性较低的药物,包括大环内酯类、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲 唑和四环素.

Abstract：

Objective To investigate antimicrobial resistance among Streptococcus pneumoniae clinically isolated from 14 teaching hospitals located at different areas in China in 2005-2008 and to give logical guidance for clinical empirical therapy.Methods A total of 1 317 non-repetitive S.pneumoniae isolates in 14 teaching hospitals from 2005-2008 were collected and sent to the central lab for reidentification and susceptibility testing, including 271 isolates collected in 2005, 391 isolates collected in 2006, 363 isolates collected in 2007 and 292 isolates collected in 2008. Most of the isolates were from community-acquired respiratory tract infections, which were isolated from outpatient or emergency department patients with respiratory tract infections or those patients with respiratory tract infections within ≤48 hours hospitalization.The districts where the organisms were isolated include North China, Northeast China, South China, Central and Northwest China and East China.The patients included adults, teenagers and children.The minimum inhibitory concentrations (MICs) or inhibitory zone diameter of 17 antimicrobial agents were determined by Etest method, agar dilution method or disk diffusion method.WHONET5.5 software was used to analyze susceptibility rate, intermediate rate, resistance rate, MIC50 and MIC90.Results Linezolid (100%) and fluoroquinolones (95.2%-99.7%) showed excellent activities against S.pneumoniae.Among β-lactams, amoxicillin-clavulanic acid remained high activities (73.8%-92.1%),followed by penicillin, ceftriaxone and cefepime with year-over-year decrease in activities.The activities of three second-generation cephalosporins were low (36.3%-38.4% in 2008).The activities of erythromycin, azithromycin, clindamycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracycline against S.pneumoniae were poor and decreased year over year.The incidence of penicillin non-susceptible S.pneumoniae (PNSP) was increasing especially for PISP (from 4.4% in 2005 to 20.2% in 2008).The incidence of PNSP in North China was low (6.0%), while this value were high in central China and East China (30.1% and 38.7%, separately).The incidence of PNSP in adults (15.7%) was obviously lower than that in children(≤5 years:33.0%) and teenagers (6-17 years:38.2%).Conclusions linezolid and fluoroquinolones showed excellent in vitro activity against S.pneumoniae, followed by penicillin and cephalosporins with year-over-year decrease of activity. Clinicians should pay more attention when using those antimicrobial agents with poor activity against S.pneumoniae, which include macrolides, clindamycin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracycline.     

慢性乙型肝炎患者血浆补体C3d的检测

慢性乙型肝炎患者血浆补体Ｃ３ｄ的检测童明庆丁洁张旭孙志坚黄湘虎我们以聚乙二醇（ＰＥＧ）作沉淀剂，沉淀血浆中的Ｃ３及其大分子裂解片段（Ｃ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ３ｂｉ和Ｃ３ｃ），建立了检测上清中Ｃ３ｄ的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，并以此法对部分慢性乙型肝炎患者和正...     

降压治疗对血清C-反应蛋白和动脉顺应性影响的研究

目的　探讨降压治疗对血清C -反应蛋白 (CRP)和动脉顺应性的影响及其临床意义。方法　分别选取正常对照组 6 4例、高血压控制组 36例和高血压未控制组 4 2例 ,使用美国产HDI- 2 0 2 0动脉测试仪同步记录血压和动脉顺应性 (大动脉弹性C1,小动脉弹性C2 ) ,用日本产AU2 70 0全自动生化分析仪检测血脂全项、血糖。用德国产BNprospec免疫比浊仪检测超敏CRP(hsCRP)。用放免法检测血清胰岛素 (Insulin ,INS)水平。结果　高血压未控制组CRP水平明显增高 ,与高血压控制组和正常对照组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,后二组间无统计学意义 (P >0 0 5 )。三组间收缩压(SBP)、舒张压 (DBP)和脉压 (PP)比较均有差异 (P <0 0 1) ,高血压未控制组C1和C2均低于对照组和高血压控制组 (P <0 0 1) ,后二组间无差异 (P >0 0 5 )。三组间相关分析 :高血压未控制组的C1和C2均与胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白 (LDL)和CRP分别呈负相关 (r =- 0 4 4 0 ,P <0 0 1;r =- 0 4 4 9,P <0 0 1;r =- 0 35 8,P <0 0 5 ;r =- 0 36 3,P <0 0 5 ;r =-0 4 73,P <0 0 1;r=- 0 2 99,P <0 0 5 )。对照组和高血压控制组的各指标均无相关性。结论　CRP可作为反映降压疗效的指标之一 ,动脉顺应性与TC、LDL和CRP的相关性优于其他指标     

检出3株携带新型基因盒组合形式Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌

目的 研究整合子介导铜绿假单胞菌耐药及多重耐药的机制。方法 整合子PCR法扩增整合子的可变区;联合限制性片段长度多态性分析（RFLP）和DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因。结果 98株南京地区铜绿假单胞菌中有35株（35．7％）整合子可变区扩增阳性,扩增片段大小1．0-4．0kb。共检出6种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类、β-内酰胺类和磺胺类抗菌药耐药的基因,其中有3例为新型基因盒组合形式,包括aadA6-orfD、aadB-blaP1和aadB-aac（6′）-Ⅱa-blaCARB-8,Genbank基因号分别为DQ 091179、DQ 141316和DQ 288251。结论 整合子参与了铜绿假单胞菌的耐药和多重耐药,主要携带氨基糖苷类耐药基因,首次报道了3种携带新型基因盒组合形式的Ⅰ类整合子。     

时间分辨免疫荧光定量检测乙型肝炎病毒前S1抗原的研究

目的 建立时间分辨免疫荧光定量分析乙型肝炎病毒PreS1抗原的方法.方法 以基因重组的带有PreS1抗原的乙型肝炎表面抗原作标准品,应用双抗体夹心免疫荧光分析方法,用抗PreS1单克隆抗体和抗-HBs分别作为固相抗体和铕标记抗体,若样本中含有PreS1抗原,则形成抗体-抗原-铕标记抗体复合物,加增强液解离铕离子,采用时间分辨荧光测量技术,对乙型肝炎病毒PreS1抗原进行检测.结果 自制TRFIA试剂检测PreS1抗原,单侧95%参考范围为0～0.26 ng/ml;自制TRFIA试剂与ELISA试剂对乙型肝炎患者血清标本中PreS1抗原的检测,TRFIA方法灵敏度高于ELISA方法,250份乙型肝炎患者血清标本中有3例标本ELISA方法结果为阴性,而用TRFIA方法可检测到PreS1抗原;对于弱阳性标本用ELISA方法检测不到时,TRFIA方法仍可检出.ELISA方法在一阳性标本1：4 096倍稀释时结果为阴性,而TRFIA方法在1：16 384倍稀释时仍为阳性;高、中、低三个浓度,批内和批间精密度测试变异系数（CV,%）均小于10%,平均回收率为103.3%;TRFIA方法检测PreS1抗原与HBsAg及HBeAg无交叉反应;50份我院正常体检者血清标本进行PreS1抗原的检测,结果均正常,特异性100%.结论 TRFIA方法定量检测PreS1抗原,灵敏度高,特异性强,能够准确及时敏感地反映患者体内乙型肝炎病毒的复制情况.     

肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究

目的 探寻结肠多发性腺瘤样息肉（APC）基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法 用甲基化序列特异性引物，对阳性控制样品（CB＋）、阴性控制样品（CB-）、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增（MSP），其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果 在19份肺癌组织中，APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化，甲基化率分别为95％（18／19）、74％（14／19）、74％（14／19）和74％（14／19），与正常肺组织比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。而679和687位点甲基化发生率均为11％（2／19），与正常肺组织甲基化发生率（0／13）接近（P〉0．05）。结论 在APC基因启动子1A序列中存在CpG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式，其对肺癌早期诊断可能有重要意义。     

缺糖基转铁蛋白对酒精性肝病的诊断

目的 检测酒精性肝病(ALD)患者血清中的缺糖基转铁蛋白(CDT)与总TI的比值％CDT,并与GGT、MCV、ALT、AST等指标比较,评价其对ALD的诊断价值。方法 选择健康不饮酒对照组、非酒精性肝病的其他肝病组(NALD组)、ALD组(3组均为男性),分别检测％CDT、GGT、MCV、ALT、AST等指标,各指标在不同组间的比较用F检验;各项目之间的关系研究用直线相关,计算相关系数;同时绘制各指标的ROC曲线。结果 ALD组中的％CDT显著高于对照组、NAID组。％CDT诊断ALD的ROC曲线下面积为0．857,敏感度0．75,特异度0．88,而GGT这三者分别为0．751、0．75、0．76,MCV分别为0．669、0．30、0．78,ALT分别为0．512、0．25、0．72,AST分别为0．426、0．25、0．68。％CDT、与GGT不相关,但两者联合检测敏感度提高到90％。结论 对于ALD的诊断,％CDT、GGT、MCV均具有一定的诊断价值,尤其％CDT是一个很好的辅助诊断指标。％CDT与GGT联用可提高敏感度。