补阳还五汤对高脂血症模型大鼠FAK-PI3K-AKT信号通路的作用影响

目的 基于黏附斑激酶(FAK)-磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路探讨补阳还五汤对高脂血症模型大鼠血小板异常的调控机制.方法 选取清洁级健康SD大鼠50只,其中40只采用高脂饲料(基础饲料+15％猪油+20％蔗糖+1.2％胆固醇+0.2％胆酸钠)喂养4周建立高脂血症模型,并将其分为补阳还五汤高剂量组(高剂量组,14.0 g/kg)、补阳还五汤低剂量组(低剂量组,3.5 g/kg)、辛伐他汀对照组(对照组,0.004 g/kg)、模型组,每组10只;另10只大鼠作为空白组,空白组继续伺以普通饲料,其他组继续高脂饲料喂养.各给药组灌服相应药物,空白组和模型组灌服等体积蒸馏水,每天1次,连续4周.末次给药后,检测各组大鼠血浆中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;Western blot法检测FAK、4-磷酸-磷脂酰肌醇-5-激酶(PIP5K)、磷脂酰肌醇激酶β抗体(PI3Kp110β)、磷酸化蛋白激酶B[p-AKT(Ser473)]、磷酸化蛋白激酶1/2/3抗体[p-AKT1/2/3(Thr308)]、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)相关蛋白的表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠血浆TC、TG和LDL-C水平均明显升高(P<0.01),且蛋白FAK、PI3Kp110β、PIP5K、p-AKT(Ser473)和p-AKT1/2/3(Thr308)水平均上调;与模型组比较,各给药组大鼠血浆TC、TG和LDL-C水平均明显降低(P<0.05);对照组和低剂量组均抑制了该信号通路的蛋白表达.结论 补阳还五汤能降低高脂血症模型大鼠血脂异常状态,其作用机制可能与抑制FAK-PI3 K-AKT信号通路的激活有关.     

欣通胶囊对麻醉犬血栓素B2/6-酮-前列腺素及心肌梗死范围的影响

目的研究欣通胶囊对急性心肌梗死模型犬心肌的保护作用和机制,从而研究中药复方对冠心病的治疗方法,为临床开发新药提供依据。方法通过结扎犬冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死模型,通过十二指肠给予受试药物,观察不同剂量组对模型犬血栓素、前列腺素、心脏定量组织学的影响。结果与假手术组比较,模型组TXB2/6-K-PG升高,4、6h差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,欣通胶囊中剂量组6h的TXB2/6-K-PG降低（P〈0.05）;欣通胶囊高剂量组、地奥心血康组在4、6hTXB2/6-K-PG降低,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。欣通胶囊高剂量组及地奥心血康组能够缩小心肌梗死范围。结论欣通胶囊对急性心肌梗死犬具有一定的保护作用,其机制可能是通过缩小心肌梗死面积,维持血栓素与前列腺素平衡等途径实现的。     

欣通胶囊对犬急性心肌梗死心肌酶的影响

目的研究欣通胶囊对冠状动脉结扎诱发犬急性心肌梗死的心肌酶的影响,为开发新药提供实验依据。方法采用结扎犬冠状动脉的造模方法,建立急性心肌缺血模型,观察欣通胶囊对模型犬血浆中谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)的影响,观察欣通胶囊对急性心肌缺血的保护作用。结果欣通胶囊可以降低急性心肌梗死模型犬血浆中AST、CK、CK-MB、LDH水平。结论欣通胶囊对犬急性心肌梗死模型有一定的保护作用。     

丹参注射液对老龄大鼠红细胞膜组分的影响

目的:从血液流变学和红细胞膜组分的变化探讨丹参注射液改善老龄大鼠血瘀证的作用机制.方法:70 ～72周龄Wistar大鼠30只,雌雄各半,随机分为丹参注射液(按生药量计)高剂量组(4.4 g·kg-1)、低剂量组(1.1 g·kg-1)和模型组.另外10只青龄大鼠作为青龄对照组,ip给药14 d后,取血测定全血黏度、血浆黏度、红细胞变形指数以及红细胞膜各组分等指标.结果:与青龄对照组比较,模型组全血黏度显著升高(P＜0.05),血浆黏度升高极显著(P＜0.01);在200 s-1,500 s-1切变率下红细胞变形指数均降低极显著(P＜0.01),1000s-1切变率下红细胞变形指数显著降低(P＜0.05).与模型组相比丹参注射液组能够显著降低老龄大鼠的全血黏度(P＜0.01)和血浆黏度(P＜0.05),明显提高红细胞变形能力(P＜0.01);并且能显著增加老龄大鼠红细胞膜唾液酸含量和巯基含量(P＜0.05),显著提高红细胞膜Na+-K+-ATP酶和SOD(超氧化物歧化酶)活性(P＜0.01,P＜0.01),降低MDA(丙二醛)水平(P＜0.01).结论:丹参注射液可能是通过增加红细胞膜表面唾液酸含量、影响膜上脂质代谢、提高机体抗氧化能力,以及改变膜上负电荷荷电量等方面来改善老龄大鼠的血液流变学特性.     

基于蛋白质组学探讨丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制

目的：通过长期高脂饲料喂养复制高脂血症动物模型,采用蛋白质组学、分子生物学等方法阐释丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制。方法：Wistar大鼠,按血脂水平随机分正常组、模型组、丹参饮组,每组10只。正常组动物喂食基础饲料,模型组和丹参饮组动物喂食高脂饲料造模,3组动物均自由饮水、自由进食。于第9周开始治疗干预,丹参饮组实验动物给予丹参饮灌胃给药,剂量为3.6 g·kg-1生药;模型组和正常组实验动物根据体质量给予等体积生理盐水。第12周后取材并进行相关指标检测,利用生化分析仪来检测血清中血脂4项水平,利用血液流变仪来检测全血黏度和血浆黏度,利用液质联用色谱仪来检测血小板蛋白质组,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血小板膜糖蛋白4(CD36)、黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(PIP5K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达。结果：与模型组比较,丹参饮组高脂血症模型大鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平能够明显降低(P<0.05),高密...     

丹参饮对气虚血瘀模型大鼠的血小板生物学

目的:观察丹参饮对气虚血瘀模型大鼠血小板生物学的影响,从血小板动态变化上探讨丹参饮作用机制。方法:选取SD大鼠40只为研究对象,一次性向气管内注射博莱霉素生理盐水溶液复制气虚血瘀模型,将40只SD大鼠随机分为空白对照组、气虚血瘀模型组、丹参饮高剂量组(3. 6 g/kg)、低剂量组(0. 9 g/kg),每组10只。造模后第2天开始灌胃给药,连续21 d,末次给药1 h后5%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,检测全血黏度、血浆黏度、血小板参数、血小板活化黏附、聚集、释放以及纤溶相关指标。结果:丹参饮可显著降低模型大鼠中低切变率下的全血黏度和血浆黏度,差异有统计学意义(P 0. 05),可显著降低PDW和MPV血小板相关参数,差异有统计学意义(P 0. 05);可显著升高环磷酸腺苷(cAMP)水平,差异有统计学意义(P 0. 05),降低环磷酸鸟苷(cGMP)、β-血小板球蛋白(β-TG)血小板第4因子(PF_4)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平,差异有统计学意义(P 0. 05),延长凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT),差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:丹参饮可能主要通过改善血小板聚集、抑制凝血及血小板释放亢进的状态方面达到降低全血黏度,改善气虚血瘀状态。     

活骨丹胶囊对大鼠血液流变学及部分生化指标的影响

目的: 研究活骨丹胶囊对实验大鼠激素性股骨头坏死模型的血液流变学、血脂、血钙、骨代谢等指标的影响。 方法: 取清洁级健康SD大鼠60只,雌雄各30只,按体重随机分成空白组,模型组,阳性对照药仙灵骨葆胶囊组(0.28 g·kg^-1),活骨丹胶囊高、中、低剂量组(1.80,0.90,0.45 g·kg^-1)。除空白组外,各组每周1次大腿内侧im醋酸泼尼松龙(24.5 mg·kg^-1),连续8周造模,在造模的同时,各给药组均灌胃给药,模型组和空白组给予等量蒸馏水,预防性灌胃给药8周后取血测定大鼠全血黏度,血浆黏度,血沉K值,血清总胆固醇(CHO),甘油三酯(TG)的含量,血清碱性磷酸酶(ALP),酸性磷酸酶(ACP),血钙(Ca),血磷(P)的含量。 结果: 与空白组比较,模型组中高、中、低各组切变率下的全血黏度均显著升高(P<0.01),血沉K值及血浆黏度均显著升高(P<0.01),血清中CHO,TG,ALP的含量均显著升高(P<0.01),血清Ca含量升高(P<0.05)。与模型组比较,活骨丹胶囊各剂量组可明显增加血清中的Ca,P含量,同时降低ALP和ACP的活性,降低全血黏度,血浆黏度及血脂,差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。 结论: 活骨丹对于骨质破坏所引起的ALP,ACP升高有一定的拮抗作用,同时能降低血脂,调节血清中的Ca,P沉积,增加骨密度。     

寒凝血瘀模型大鼠红细胞膜生物学研究

目的: 从血液流变学和红细胞膜生物学变化探讨寒凝血瘀证在红细胞膜上的生物学差异。方法: 20只Wistar大鼠,随机分为空白组及寒凝血瘀组,每组10只。寒凝血瘀组大鼠置于0~1℃冰水中8~10 min,待大鼠全身僵直后取出,连续造模14 d,第15天大鼠皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mL·kg^-1(0.8 mg·kg^-1),共2次,间隔4 h,2次之间将大鼠置于冰水中浸泡5 min,末次造模后禁食不禁水12 h。次日以乌拉坦1 g·kg^-1麻醉,固定,取血测定血液流变学指标以及红细胞膜组分相关指标。结果: 与空白组比较,寒凝血瘀组大鼠体重显著降低;全血黏度显著增高(P<0.05);血浆黏度及血脂无显著变化;红细胞变形指数在600,800,1 000 s^-1切变率下均显著降低(P<0.05);血沉K值显著升高(P<0.05);APTT(活化部分凝血活酶时间)降低极显著(P<0.01);FIB(纤维蛋白原)含量显著升高(P<0.05);TT(凝血酶时间)、PT(凝血酶原时间)无显著影响,但有降低趋势;Na⁺-K⁺-ATP酶活力、唾液酸含量及SOD(超氧化物歧化酶)活力均显著降低(P<0.05);MDA(丙二醛)含量及膜胆固醇含量有升高趋势但无显著差异;巯基含量有降低趋势,但无显著差异。结论: 寒凝血瘀模型可能由于红细胞膜上Na⁺-K⁺-ATP酶、唾液酸及SOD的减少导致全血黏度及红细胞变形性发生改变。     

补阳还五汤对高脂血症模型大鼠血液流变学和血小板相关生物学指标的影响

目的:探讨补阳还五汤对于高脂血症模型大鼠血液流变学和血小板相关生物学指标的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(10只)和造模组(40只)。空白对照组大鼠给予普通饲料,造模组大鼠给予高脂饲料,分组喂养至少6周以复制高脂血症模型。将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(辛伐他汀,0.004 g/kg)和补阳还五汤低、高剂量组(3.5、14.0g/kg,以生药量计),每组10只。空白对照组和模型对照组大鼠灌胃生理盐水,各药物组大鼠灌胃相应药液,0.01 mL/g,每日1次,连续4周。末次给药30 min后,检测大鼠的血液流变学指标(全血黏度、血浆黏度)、血小板黏附作用相关指标[黏附率、血管性血友病因子(vWF)、纤维连接蛋白(FN)]、血小板释放作用相关指标[β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板第4因子(PF4)]、血小板纤溶系统相关指标[组织型纤溶酶原活化剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)]、血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)、大型血小板比率(PLCR)]和凝血4项指标[活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)]。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠全血黏度(低、中、高切变率)、血浆黏度、血小板黏附率以及vWF、FN、β-TG、PAI-1、PLT、MPV、PCT、PLCR、FIB含量或水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),t-PA含量显著降低(P<0.05)。与模型对照组比较,各药物组大鼠全血黏度(除补阳还五汤高剂量组高切变率全血黏度外)、血浆黏度、血小板黏附率以及v WF、FN、β-TG、PAI-1、PLT、PDW(除补阳还五汤低、高剂量组外)、MPV、PCT、PLCR(除补阳还五汤低剂量组外)、FIB含量或水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),t-PA含量(除阳性对照组外)均显著升高(P<0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过降低血液黏度和FN含量、改善血小板黏附性、增强纤溶活性、改善血小板聚集状态、抑制凝血及血小板释放亢进等途径,来发挥对高脂血症模型大鼠病理状态的改善作用。     

复方三金胶囊对人乳腺癌荷瘤裸鼠瘤组织中线粒体凋亡通路蛋白表达的影响

目的:通过研究复方三金胶囊对乳腺癌荷瘤裸鼠瘤组织中Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨复方三金胶囊促肿瘤细胞凋亡的作用,深入研究其抗肿瘤作用机制。方法:将30只裸鼠接种人乳腺癌MCF-7细胞,待瘤体积超过5 mm时,将30只裸鼠随机分为模型组、复方三金胶囊高、中、低剂量组及环磷酰胺对照组,每组6只,连续给药两周后,取瘤组织进行各项指标测定。指标测定选用免疫组化法,分别从瘤组织染色情况和平均光密度值进行数据分析。结果:与模型组比较,复方三金胶囊各组瘤组织中Caspase-3、Caspase-9、Bax阳性细胞数均显著增加;免疫组化测各组蛋白的平均光密度值结果显示,与模型组比较,复方三金胶囊高剂量组中Caspase-9、Bcl-2的表达呈极显著差异(P0.01),Caspase-3、Bax的表达呈显著差异(P0.05);复方三金胶囊中剂量组中Bax的表达呈极显著差异(P0.01),Caspase-9、Bcl-2的表达呈显著差异(P0.05);复方三金胶囊低剂量组中Caspase-9的表达呈极显著差异(P0.01)。结论:复方三金胶囊能够显著抑制乳腺癌细胞的增殖作用与促细胞凋亡作用相关。