方剂药理研究的方法与思路

方剂是中医临床用药的主要形式、中医经验的载体,其配伍规、组方原则是中医药理论的精华。方剂药理研究是现代中医药研究的重点也是难点。由于病因、病机、中药药味及其组合方式的多样性,使得方剂的研究难度很大。结合现代科学技术对其加以研究对推进中医药理论现代化、科学化、创新发展具有重要意义。在运用现代药理学技术对方剂加以研究分析时应注重,坚持以中医理论为指导,结合运用现代系统论思想,采用现代科学手段,由简到繁,由宏观到微观,促使药理学与中医理论科学结合,从而全面揭示中药方剂防病治病的理论基础与作用机制。近年来对于方剂药理研究的方法主要集中在以下几个方面:全方研究、拆方研究、同类方剂对比研究、方剂剂型研究、煎服法研究、药代动力学研究。同时将方剂药理研究与生物化学、药物化学、分子生物学、中药血清药物化学、复方代谢组学、基因组学及蛋白质组学等现代科学技术相结合,有效的推进了方剂学发展。各种研究方法各有其适用范围及优势,但有时也存在一些不足,如中医整体观念、现代技术研究脱离中医理论存在局限性,整体与局部脱节,宏观与微观脱节,体内过程与活性评价脱节等,因此通过对以上实验研究方法加以探讨总结,明确中药方剂现代化研究的思路以期促进方剂研究更加合理有效的与现代科学技术相融合,避免局限性,促进方剂药理研究创新性发展。     

基于Nrf2/ARE信号通路探讨少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠血管内皮损伤的保护作用及机制

目的 通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2（Nrf2）/抗氧化反应元件（ARE）信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法 将50只SPF级大鼠随机分为少腹逐瘀汤高、中、低剂量组（4.8,2.4,1.2 g·kg^-1）,模型组和空白组,每组10只。采用冰水浴联合皮下注射盐酸肾上腺素的方法建立寒凝血瘀证大鼠模型。造模的同时开始灌胃给药,连续给药28 d后,采用全自动血液流变仪检测血液流变学指标;酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清中一氧化氮（NO）,内皮素-1（ET-1）,超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,细胞间黏附分子-1（ICAM-1）,血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）,血管性血友病因子（vWF）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察胸主动脉血管损伤情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胸主动脉血管组织Nrf2,血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠全血黏度及血浆黏度均明显升高（P<0.05,P<0.01）,vWF,ICAM-1,VCAM-1含量显著升高（P<0.01）,NO,SOD,GSH-Px含量显著降低（P<0.01）,ET-1的含量显著升高（P<0.01）,胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA表达显著升高（P<0.01）,细胞核内的Nrf2蛋白表达明显升高（P<0.05）,细胞浆中Nrf2的蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,HO-1的蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,少腹逐瘀汤高、中剂量组全血黏度（高、中切）,血浆黏度均明显降低（P<0.05）;vWF,ICAM-1,VCAM-1,ET-1含量明显降低（P<0.05,P<0.01）;NO,SOD,GSH-Px含量明显升高（P<0.05,P<0.01）;胸主动脉血管内皮细胞增生、肿胀、脱落,内弹力膜断裂、平滑肌排列紊乱等病理变化有所改善;Nrf2,HO-1蛋白及mRNA表达水平显著升高（P<0.01）。结论 少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管内皮损伤有保护作用,作用机制与激活Nrf2/ARE信号通路增加抗氧化酶的表达,抑制黏附因子的表达有关。     

三七皂苷类成分的神经保护机制研究进展

三七皂苷类成分是从五加科植物三七中提取分离得到的一类化合物,具有抗炎、抗氧化、保护神经系统、保护心血管系统、抗肿瘤、降糖降脂等多种药理作用。目前,三七皂苷类成分在临床上广泛应用于中风、中风后遗症、高血压病、冠心病和阿尔兹海默病等多种疾病的治疗,尤其对于中风、中风后遗症等神经系统疾病的治疗具有明显的临床疗效。近年来,关于三七皂苷类成分保护神经系统的机制不断被发掘,为了推进三七皂苷类成分在防治中枢神经系统疾病方面的研究,本文结合国内外最新报道,对近年来三七皂苷类成分发挥神经保护作用及其机制进行总结,主要包括调控电压门控离子通道、保护神经细胞、抑制氧化应激、抑制炎症反应、促进血管新生、降低兴奋性神经毒性、保护神经血管单元等几个方面。虽然三七皂苷类成分对神经系统的保护机制主要涉及以上几个方面,但是对于其某些部分的研究还不够深入,需要借助分子生物学、代谢组学、蛋白质组学等技术,为三七皂苷类成分发挥神经系统的保护作用进行更深入的探索。     

头风宁镇痛镇静作用的实验研究

通过热板法、扭体法、电刺激法证实了头风宁的镇痛作用，又通过对自发活动数的抑制实验证实其镇静作用。     

地龙成分及含药血清对人正常肾小球系膜细胞增殖的影响

目的研究地龙成分EFE及含药血清对体外培养的人正常肾小球系膜细胞(HMC)增殖的影响,并从血清药物化学角度探讨其药理药效和防治糖尿病肾病的可能作用机制。方法将常规培养的HMC分为地龙成分EFE直接给药和含药血清给药两种方式,分别设空白对照组、低、中、高剂量组和福辛普利组,各组分别于相应处理后24 h、48 h和72 h采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖。结果直接给药组中各药物组与空白对照组(直)比较,均不同程度的抑制了正常HMC的增殖,中剂量药物组(直)对HMC细胞的增殖抑制作用最为显著;含药血清组中各药物组与空白对照组(血)比较,也不同程度的抑制了正常HMC的增殖,高剂量药物组(血)对HMC细胞的增殖抑制作用最为显著,并且高剂量药物组(血)对细胞增殖的抑制率高于中剂量药物组(直)。结论地龙成分能够抑制HMC的增殖,其含药血清对正常HMC增殖的抑制作用优于地龙成分直接给药。     

糖尿病肾病的中医治疗

糖尿病肾病（DN）是糖尿病常见的并发症之一,也是导致终末期肾病的常见原因之一。临床研究显示,DN一旦进展至临床蛋白尿阶段便难以逆转,全面代谢控制是防治DN的基础,但目前临床尚乏十分有效的防治方法。笔者查阅了近年中医治疗该病的有关文献,对DN的治疗从辨证论治、专方专药及单味药、提取物等方面以综述,以期更好地指导DN的防治。     

藿香正气类制剂的临床应用研究概况

正藿香正气散最早见于《太平惠民合剂局方》:"治伤寒头疼,憎寒壮热,上喘咳嗽,五劳七伤,八般风痰,五般膈气,心腹冷痛,反胃呕恶,气泻霍乱,脏腑虚鸣,山岚瘴疟,遍身虚肿;妇人产前、产后,血气刺痛;小儿疳伤,并宜治之",是解表化湿、理气和中的经典方剂,其组成药物有:大腹皮、白芷、紫苏、茯苓、半夏曲、白术、陈皮、厚朴、苦桔梗、藿香、甘草。自宋代之后就已经被广泛应用于各类外感内伤疾病中,随着实验技术的进步,关于藿香正气散的药理作用得到     

马钱子中毒机制及与配伍甘草减毒作用的研究进展

马钱子是传统的通络止痛中药,对风湿痹痛、麻木瘫痪等症具有明显的治疗效果。然而由于其毒性较大,使其临床应用受到限制。多项研究表明,马钱子与甘草配伍其毒性大大降低。从马钱子的毒性反应、毒理学特征、影响毒性因素3个方面分别介绍了马钱子的中毒机制,并总结甘草配伍马钱子减毒作用,以期为马钱子的合理应用提供参考。     

同时包载人参3种成分的透明质酸修饰的纳米脂质载体的制备及表征

目的制备包载人参3种成分的透明质酸(hyaluronic acid,HA)修饰的纳米脂质载体(HA-OUR-NLC),并对其进行表征。方法采用纳米脂质体(nanostructured lipid,NLC)包载人参中3种难溶性有效成分齐墩果酸(oleanolic acid,OA)、熊果酸(ursolic acid,UA)、人参皂苷Rg3(ginsenoside Rg3,Rg3)制备纳米脂质载体(OUR-NLC);然后采用HA作为靶向因子,经电荷吸附作用进行修饰。采用动态透析法进行释放度实验。通过流式细胞仪及MTT法考察HA-OUR-NLC对SMMC-7721细胞的细胞摄取及细胞毒性情况。结果采用溶剂超声分散法制备的OUR-NLC外观呈现淡蓝色乳光。并通过电荷吸附法成功制备了HA-OUR-NLC。其形态圆整,分布均匀。体外释放表明其具有一定的缓释作用。摄取实验表明HA-OUR-NLC能被SMMC-7721细胞所摄取。MTT实验结果表明,HA-OUR-NLC对SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用。结论采用溶剂超声分散法制备的HA-OUR-NLC具有较好的理化性质和稳定性,且具备一定的缓释长效作用。     

基于蛋白质组学探讨丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制

目的：通过长期高脂饲料喂养复制高脂血症动物模型,采用蛋白质组学、分子生物学等方法阐释丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制。方法：Wistar大鼠,按血脂水平随机分正常组、模型组、丹参饮组,每组10只。正常组动物喂食基础饲料,模型组和丹参饮组动物喂食高脂饲料造模,3组动物均自由饮水、自由进食。于第9周开始治疗干预,丹参饮组实验动物给予丹参饮灌胃给药,剂量为3.6 g·kg-1生药;模型组和正常组实验动物根据体质量给予等体积生理盐水。第12周后取材并进行相关指标检测,利用生化分析仪来检测血清中血脂4项水平,利用血液流变仪来检测全血黏度和血浆黏度,利用液质联用色谱仪来检测血小板蛋白质组,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血小板膜糖蛋白4(CD36)、黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(PIP5K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达。结果：与模型组比较,丹参饮组高脂血症模型大鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平能够明显降低(P<0.05),高密...