lncRNA AK126393通过PI3K/Akt通路调节结直肠癌细胞的增值与凋亡

目的 探索长链非编码 RNA (long non-coding RNA,lncRNA)AK126393在人结直肠癌细胞中的作用机制。方法荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常结肠组织细胞系与结直肠癌细胞系中lncRNA AK126393表达,选取最低表达细胞系进行转染lncRNA AK126393过表达质粒和阴性对照(NC),采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,Western blot法检测Bcl2、Bax、PI₃K、P-PI₃K、Akt、P-Akt和LC3蛋白表达。结果 lncRNA AK126393在结直肠癌细胞系中呈现低表达,其中SW480细胞表达最低;过表达质粒转染SW480细胞后lncRNA AK126393相对表达水平显著升高;细胞增值能力显著降低,细胞凋亡水平增加;Western blot法检测结果显示Bcl2、LC3-Ⅱ、P-PI₃K、P-Akt蛋白表达明显升高,Bax和LC3-Ⅰ蛋白表达明显降低,PI₃K和Akt蛋白表达无明显变化。结论 lncRNA AK126393可以通过抑制PI₃K/Akt信号通路激活实现抑制结直肠癌细胞增殖、促进细胞凋亡以及引起细胞自噬的作用。     

无功能性甲状旁腺囊肿的外科诊治

目的:探讨无功能性甲状旁腺囊肿的临床特征、诊断及治疗方法 ,提高对无功能性甲状旁腺囊肿的诊治水平。方法:回顾性分析1995年4月至2014年8月期间我院收治的无功能性甲状旁腺囊肿8例病人的临床资料。结果:共有8例病人,中位年龄56(26~73)岁。肿瘤平均直径(3.4±0.4)(2.1~5.6)cm。术前甲状腺功能、血清钙检测均在正常范围。术前B超检查8例病人均提示囊性占位。术中行冷冻检查,7例提示囊肿为甲状旁腺来源。所有8例术后病理均证实为甲状旁腺囊肿。所有病例均完整切除囊肿。其中1例伴有结节性甲状腺肿行甲状腺大部切除术,1例因同时伴有甲状腺乳头状癌,行根治性切除手术。术后1例病人出现声音嘶哑,在术后3个月时恢复正常。中位随访时间8.4年,随访期间无囊肿复发。结论:术前超声和CT检查可初步诊断无功能性甲状旁腺囊肿,确诊需待病理检查。完整的囊肿切除是无功能性甲状旁腺囊肿的有效治疗方法。     

基层医院开展中低位直肠肿瘤腹腔镜手术的初期经验

目的:探讨基层医院开展腹腔镜中、低位直肠肿瘤手术的可行性和安全性。方法:回顾性分析从2010年6月至2012年6月开展的腹腔镜中、低位直肠肿瘤切除术19例以及同期开展的21例开腹手术病人的资料,比较两组病人在手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后肛门排气时间、术后并发症、淋巴结清扫数量等方面的差异。结果:两组在年龄、性别、肿瘤位置、Dukes分期等方面无差异。腹腔镜组无一例中转开腹。在术中出血量、术后住院时间、术后肛门排气时间等方面,腹腔镜组明显优于开腹组;而在手术时间、术后并发症发生率、淋巴结清扫数量上两组无统计学差异。结论:专业团队、术中遵循直肠全系膜切除原则以及掌握适应证是基层医院安全、有效开展腹腔镜中、低位直肠肿瘤手术的基础和重要条件。     

抑制FoxM1基因表达对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞糖酵解途径的影响

 目的 探讨抑制FoxM1基因表达对甲状腺乳头状癌（PTC）细胞葡萄糖摄取和乳酸产量的影响及FoxM1与PTC细胞糖酵解途径的相关性。方法 用慢病毒rLv-hFoxM1转染PTC TPC-1细胞，检测转染后的TPC-1细胞中FoxM1 mRNA及蛋白表达水平的变化；应用噻唑蓝（MTT）比色法检测抑制FoxM1基因对TPC-1细胞活性的影响；检测转染慢病毒rLv-hFoxM1后的TPC-1细胞在葡萄糖摄取量和乳酸产量方面的变化以及糖酵解途径关键酶己糖激酶1（HK1）、己糖激酶2（HK2），葡萄糖转运体蛋白1（Glut1）含量的变化。结果 在TPC-1细胞中，慢病毒rLv-hFoxM1转染可明显抑制TPC-1细胞中FoxM1基因mRNA及蛋白水平的表达，且转染慢病毒rLv-hFoxM1后TPC-1细胞的活性明显下降（P<0.05），随着FoxM1基因表达降低，TPC-1细胞的葡萄糖摄取量及乳酸产量均明显下降（P<0.01），抑制FoxM1基因后，其葡萄糖转运蛋白（Glut1）、己糖激酶1（HK1）和己糖激酶（HK2）含量明显降低。结论 抑制FoxM1基因的表达能降低PTC细胞的糖酵解水平。     

上海市外科住院医师规范化培训10年实践与经验

目的 总结上海市开展外科住院医师规范化培训10年的实践与经验，为今后进一步提高外科住院医师规培化培训质量提供理论依据。 方法 统计2010—2021年上海市32家外科住院医师规范化培训基地的基本情况、外科床位数、带教师资人数、研究生导师人数，招录及出站人数、性别、年龄、学历背景、培训年限，结业综合考合格率、申请课题及发表论文情况、就业情况等信息。结果 上海市共有32家外科专业基地，以三级甲等综合性医院为主，目前累计招录了住培医师4597名，已结业3162名，绝大多数外科住培医师达到培训要求并通过考核结业。上海市外科住院医师规范化培训工作在建立健全制度建设，开展教学活动，推广信息化管理，师资培训与督导检查，临床科研培养等方面取得了满意的成效。同时现阶段工作中仍有不足之处，包括规范教学活动、加强医学人文及思政教育、落实外科培训细则、待遇保障等方面。结论 外科住院医师规范化培训已成为培养高水平外科医学人才的重要途径，后续住院医师规范化培训重点应进一步加强各外科基地培训效果的同质化、标准化、规范化，注重内涵建设和质量建设。     

FoxM1基因表达与甲状腺乳头状癌TPC-1细胞活性及侵袭性关系的研究

目的 研究FoxM1基因表达水平对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）细胞活性和侵袭性有无影响,探讨FoxM1与PTC疾病的相关性.方法 分别用hFoxM1-RNA干扰和硫链丝菌素处理PTC TPC-1细胞,观察处理后的癌细胞与未经处理的癌细胞在细胞活性、侵袭能力、迁移能力方面的变化,并使用Real-time PCR检测各组细胞中FoxM1基因的表达水平,观察硫链丝菌素对FoxM1基因表达水平的影响.结果 在TPC-1细胞中,使用hFoxM 1-RNA干扰和硫链丝菌素处理均能使细胞活性明显下降（P＜0.05）,用2种方法处理后,细胞侵袭能力分别降低了约29.2％及38.63％,细胞迁移能力分别降低了约46.0％及47.5％,且PCR结果表明,hFoxM1-RNA干扰和硫链丝菌素处理均明显抑制TPC-1细胞中FoxM1基因mRNA的表达,分别抑制55％及38％.结论 FoxM1能促进PTC细胞的侵袭转移,其作为潜在的肿瘤标志物值得关注,而硫链丝菌素能抑制肿瘤细胞中FoxM1的表达.     

lncRNA AK126393对结肠癌细胞的抑制作用及机制研究

目的:探索长链非编码 RNA（long non-coding RNA,lncRNA）AK126393调控人结肠癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:采用荧光实时定量聚合酶链反应检测人正常结肠上皮细胞和不同结肠癌细胞系中lncRNA AK126393的表达水平,采用pcDNA3.1-AK126393转染HCT116细胞增加AK126393的表达,采用MTT法检测细胞的增殖活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,采用Western blotting检测细胞中目标蛋白的表达水平。结果:与人正常结肠上皮细胞系永生化结肠上皮细胞系NCM460相比,人结肠癌细胞系中AK126393的表达均出现显著下降,其中HCT116细胞中AK126393表达最低;pcDNA3.1-AK126393转染HT116细胞后AK126393的相对表达水平出现显著升高;AK126393 的过表达抑制HCT116细胞的增殖能力,促进其细胞凋亡水平,并且引起细胞自噬的发生;同时AK126393 的过表达显著抑制HCT116细胞内AKT/ERK1/2信号通路的磷酸化水平。结论:LncRNA AK126393具有抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡以及引起细胞自噬的作用,其作用可能是通过抑制AKT/ERK1/2信号通路的激活来实现。     

miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用及其分子机制

目的探讨miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用,并验证其靶点蛋白。方法传代培养人结肠癌细胞株HCT-116,分别采用空病毒载体(pRI-CMV-GFP)转染(阴性对照组)、慢病毒载体(pRI-CMV-GFP-miRNA-34a)转染(慢病毒组),另选未经任何处理的HCT-116细胞作为空白对照组。采用Real-time PCR法检测miR-34a的相对表达量,采用MTT实验、Transwell小室法检测HCT-116细胞增殖和迁移能力,采用细胞免疫荧光试验和Western blotting法验证其靶点蛋白。结果以空白对照组miR-34a表达为1,阴性对照组为1.03±0.09,慢病毒组为6.41±1.56,慢病毒组高于阴性对照组及空白对照组(P均<0.01),证实慢病毒转染成功。与空白对照组、阴性对照组比较,慢病毒组细胞增殖和迁移能力显著下降(P均<0.01)。细胞免疫荧光试验显示,慢病毒组细胞c-Met的荧光强度显著降低,而空白对照组与阴性对照组无明显变化。Western blotting结果显示,慢病毒组c-Met及磷酸化c-Met表达均低于阴性对照组、空白对照组(P均<0.01)。结论过表达miR-34a可抑制结肠癌细胞增殖及迁移,并下调靶点蛋白c-Met及磷酸化c-Met表达,提示miR-34a可作为结肠癌治疗的分子靶点。     

肥胖患者全麻气腹状态下的机械通气策略

 目的 针对腹腔镜术后肺功能损害的高发人群肥胖患者,从预防气压伤角度研究机械通气时多呼吸参数（三因素三水平）的组合选用,以求减小或避免多呼吸参数的不当组合引起的较高气道压,从而获得“较低气道压力同时又能维持良好通气”的肺保护效应,以完善肥胖患者腹腔镜术后呼吸功能障碍的预防措施。方法 按公认的“30≤BMI<40”肥胖指数筛选ASAⅠ~Ⅱ肥胖患者,随机作为样本病例;取麻醉机上最基本的呼吸频率（f）、潮气量（VT）、吸呼比（I∶E）三参数作为三因素A、B、C,取f=15、12、9次/min,VT=8、10、12 mL/kg,I∶E=1∶2.5、1∶2.0、1∶1.5为相应的三水平;选用L9(34)K=3重复正交试验设计表归纳数据,检验、分析各因素及水平变化影响呼末二氧化碳分压（P_ETCO₂）、气道峰压（PIP）、气道平均压（P_mean）和内源性呼末气道压（PEEPi）的统计学意义。采用方差分析方法分析数据。结果 本研究9组试验的（k=3,n=27）腹腔镜手术全麻中,患者生命体征平稳,SpO₂ 100%。整个实验过程中PEEPi监测值为3 cmH₂O。三因素三水平呼吸参数间的不同组合对P_ETCO₂、PIP、Pmean的影响如下：①对P_ETCO₂的影响：f、VT各水平的选用均有显著统计学意义（P<0.01）;I∶E的选用无统计学意义（P>0.05）。②对PIP的影响：f的改变有统计学意义（0.01<P<0.05）;VT、I∶E的改变均有显著统计学意义（P<0.01）。③对P_mean的影响,三因素三水平呼吸参数的选用均有显著统计学意义（P<0.01）。结论 多呼吸参数的最佳组合方式是A3B1C2,即f=9次/min、VT=8 mL/kg、I∶E=1∶2.0,非小潮气量快频率,也非大潮气量慢频率。如此才能获得肥胖患者全麻气腹状态“较低气道压力同时又能维持良好通气”的肺保护效应。值得注意的是：①I∶E对气道压（PIP、P_mean）的影响,即对肺保护的影响有着重要意义;②I∶E对PIP和P_mean的影响具有相向性。