雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达

目的：构建敲减人雄激素受体（AR）基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法：设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液。采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染。RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用。结果：测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低。结论：成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性。     

抑制性神经调节因子与青春期发动

正常青春期发动源于下丘脑促性腺激素释放激素(LHRH)脉冲式分泌的增加。近年来的研究表明,多种兴奋性和抑制性神经调节因子共同参与了此过程。本文对3种抑制性神经调节因子γ-氨基丁酸、神经肽Y及褪黑激素与青春期发动的关系进行了综述,其中γ-氨基丁酸通过对LHRH神经元直接和间接的控制作用,在雌性灵长目动物青春期发动中发挥了重要的抑制作用。另外,褪黑激素、神经肽Y也参与影响了青春期发动过程中下丘脑LHRH神经元的功能活动。     

辛伐他汀诱导肺成纤维细胞凋亡的研究

成纤维细胞过度增殖并产生过量细胞外基质可导致多种肺部疾病 ,如特发性肺间质纤维化、气道重建[1 ] ,目前对此类疾病尚缺乏有效治疗方法 ,羟甲基戊二酸单酰辅酶 Ａ(ＨＭＧ ＣｏＡ)还原酶抑制剂辛伐他汀是目前广泛应用于临床的降脂类药物。近年来 ,很多研究证实 ,ＨＭＧ ＣｏＡ还原酶抑制剂具有诱导多种细胞凋亡的作用[2 ,3] 。本实验在体外研究辛伐他汀对肺成纤维细胞凋亡的诱导作用。材料与方法　 (1 )肺成纤维细胞的原代培养 :取肺组织约 1ｃｍ3,剪成碎块 ,加入 0 2 5 %的胰蛋白酶 ,37℃消化30ｍｉｎ ,1 0 0目钢丝网过滤 ,离心混悬液 ,…     

介入诊疗儿童小肠血管畸形出血一例并文献复习

正病例资料患儿,男,11岁3个月,因呕吐、头晕、乏力2 d入院。呕吐物为胃内容物,未见咖啡样物,胃纳差,无发热,大便2 d未解,小便量偏少。患儿半年前有腹部钝性外伤史,当时就医未见异常,此次入院前无腹痛。无手术、输血史。查体:体温37.2℃,脉搏124次/分,呼吸28次/分,血压114/63 mmHg体重26.5 kg,中-重度贫血貌,面色     

025 成肌纤维细胞与哮喘

成肌纤维细胞(myofibroblast, MF)是一类特殊的成纤维细胞,它与哮喘的发生发展有密切的关系.MF除了能促进细胞外基质的沉积,导致气道重塑,还能延长EOS的生存力,抑制凋亡,同时分泌多种细胞因子参于气道炎症.     

不同年龄小儿肺炎支原体感染诊断及临床特点观察

目的　对不同年龄小儿肺炎支原体感染诊断及其临床特点进行观察。方法　检测 65 6例呼吸道感染患儿咽拭子Mp DNA PCR和血清抗Mp IgM ,并检测部分患儿相关免疫指标。 结果　咽拭子Mp DNA PCR阳性率为3 2 .16% ( 2 11/65 6) ,血清抗Mp IgM阳性率为 17.3 8% ( 114 /65 6) ,两者差异有极显著性 (P <0 .0 0 1)。 4～ 10岁年龄组抗Mp IgM阳性率高于其他年龄组 (P <0 .0 0 5 )。 结论　咽拭子Mp DNA PCR检测结果不受年龄的影响 ,血清抗Mp IgM检测阳性受小儿年龄影响     

盐酸氨溴索支气管肺泡灌洗治疗新生儿胎粪吸入综合征疗效观察

目的 评价盐酸氨溴索支气管肺泡灌洗治疗新生儿胎粪吸入综合征(MAS)的疗效。方法 MAS患儿76例分为盐酸氨溴索灌洗组(灌洗组)40例和常规治疗组36例,灌洗组盐酸氨溴索15 mg注入100 ml生理盐水中摇匀后行支气管肺泡灌洗;常规治疗组予常规治疗。结果 灌洗组均治愈,并发症明显减少,无1例死亡,治愈率100.00％;常规治疗组治愈28例,死亡8例,治愈率77.78％。灌洗组疗效明显优于常规治疗组(P<0.05);在机械通气、氧疗和住院时间灌洗组均明显优于常规治疗组(P均<0.05)。结论 正确处理吸入胎粪污染的羊水对降低围生期死亡率具有重大意义,盐酸氨溴索支气管肺泡灌洗为抢救MAS的有效方法之一。     

小儿肺炎支原体感染诊断及发病机制探讨

目的 探讨小儿肺炎支原体（Ｍｐ）感染的敏感诊断方法与发病机制。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测咽拭于Ｍｐ－ＤＮＡ，同时做血清冷凝集试验（ＣＡＴ），对４９８例呼吸道感染的住院患儿进行配对资料研究，４８例测定了有关免疫指标。结果 ＰＣＲ法阳性率为３７．５５％（１８７／４９８），ＣＡＴ法阳性率为１０．０４％（５０／４９８），二法差异有极显著性意义。３￣１０岁组感染率明显高于３岁以下组与１０岁以上     

多囊蛋白-1的研究进展

多囊蛋白-1（polycystin-1,PC-1）是由多囊肾病基因-1（PKD1）编码的跨膜蛋白，属多囊蛋白家族成员，主要在上皮细胞、内分泌细胞、心肌细胞和骨骼肌细胞上表达。PC-1可与多囊蛋白-2（polycystin-2,PC-2）、踝蛋白、纽蛋白等蛋白结合，参与细胞-细胞、细胞-基质黏附和细胞间信号转导。PC-1可调节肾小管上皮细胞的增殖和分化、介导细胞间的黏附，在肾脏的正常发育和常染色体显性遗传性多囊肾病（ADPKD）发病起重要作用。     

川芎嗪对哮喘大鼠气道壁胶原沉积和转化生长因子-β1表达的影响

目的 观察川芎嗪对哮喘大鼠气道壁胶原沉积和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 SD大鼠40只,随机分为5组,制备大鼠哮喘模型,腹腔注射不同剂量川芎嗪及地塞米松干预。肺组织石蜡切片进行胶原和TGF-β1免疫组织化学染色后计算机图像分析测定其含量。结果模型组气道壁Ⅲ型胶原、TGF-β1含量均显著高于正常对照组(P均<0.001);与模型组比较,不同剂量川芎嗪干预后Ⅲ型胶原、TGF-β1含量均显著降低(P均<0.001) TGF-β1的表达与Ⅲ型胶原的含量呈显著正相关(rs=0.7063 P<0.001);川芎嗪大剂量干预组对TGF-β1表达和Ⅲ型胶原合成的抑制优于小剂量组(P<0.01),大剂量组作用效果接近激素组。结论 川芎嗪可减少气道壁胶原沉积和TGF-β1表达而抑制哮喘气道重建,其部分作用与激素近似。 实用儿科临床杂志,2004,19(12):1028-1029