雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达

目的：构建敲减人雄激素受体（AR）基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法：设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液。采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染。RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用。结果：测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低。结论：成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性。     

联合细胞穿膜肽的肿瘤靶向载体

靶向载体研究是近年来肿瘤靶向治疗中的热点。肿瘤靶向载体具有特异性高、毒副作用小的特点,但其无法穿透细胞膜的缺点限制了其对于许多在细胞内起效的抗肿瘤药物的应用。新近发现的细胞穿膜肽（cell-penetrating peptides,CPPs）具有无可比拟的转导活细胞能力。将CPPs和靶向载体联合应用,可综合两者的优点、克服各自缺陷,从而提高肿瘤靶向治疗疗效。依据两者的作用原理和结合方式,可分为自身具有靶向功能的CPPs载体、融合靶向配基的载体、联结CPPs的纳米载体、对肿瘤微环境敏感的CPPs靶向载体和联结其他特殊功能载体的CPPs等5类。不断提高CPPs靶向载体的细胞内化效率和所载药物的释放率,则是将其过度到临床应用必须解决的技术难点。引入CPPs的肿瘤靶向载体的出现,将为抗瘤药物的研发和临床肿瘤治疗提供一个新的手段。     

分子诊断在非小细胞肺癌治疗中作用

肺癌致死率位居癌症之首,为最大程度降低不良反应、发挥药效,现多采用个体化治疗,通过分子诊断对患者进行分类,采用适合的治疗方案,以期提高治疗效果。本文就分子分型与靶向药物和传统放、化疗方法的关系作一综述。     

乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的影响

〔摘 要〕 目的：探讨乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期患者的影响。方法：选取厦门医学院附 属第二医院 2019 年 5 月至 2020 年 5 月收治的 200 例 COPD 急性加重期患者，将其随机分为观察组与对照组，各 100 例。 观察组给予乙酰半胱氨酸＋常规基础药物治疗，对照组给予常规基础药物治疗，将两组临床结果进行观察比较。结果： 观察组患者咳痰频率及咳痰量均显著高于对照组，喘憋持续时间短于对照组，第 1 秒用力呼吸容积占预计值百分比 （FEV1%pred）及第 1 秒用力呼气量占用力肺活量比值（FEV1/FVC）水平均优于对照组，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 观察组患者住院时长短于对照组，住院总费用少于对照组，治疗满意度高于对照组，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：对 COPD 急性加重期患者应用乙酰半胱氨酸可以明显提高临床疗效、降低患者的风险率。     

建立金线莲原球茎悬浮体系生产次生代谢产物

研究植物激素浓度和培养周期对金线莲原球茎悬浮培养生长及其代谢产物积累的影响,以增加金线莲悬浮培养的生长量,提高次生代谢产物的生产.结果表明,MS培养基添加S- 3307 1.0mg/L,6- BA0.5mg/L和3％的蔗糖适合总生物量的生长(214.45g/L,FW和18.23g/L DW).而MS培养基添加S -33071.0mg/L,6- BA 3.0mg/L和5％的蔗糖,总黄酮,总酚和多糖的干重(5.43mg/g,2.87mg/g和243.23 mg/g)达到最大化.研究原球茎悬浮培养过程,发现经过7个星期培养就能获得最大的生物质总量(225.98 g/L的FW和18.53 g/L的DW)、总黄酮干重(5.09mg/g)和总酚干重(2.04mg/g),而多糖生产达到其峰值(229.36mg/g干重)是在培养后5个星期.     

细胞衰老与慢性肝病及对肝纤维化的调节作用

衰老是生物界的普遍规律，细胞作为生物有机体的基本单位，也在不断地新生和衰老死亡。现在认为细胞衰老是由多种因素刺激，通过信号转导引起生长阻滞的一种稳定形式。目前除了衰老机理和老龄化引起的心脏病，心血管病等的研究外，有报道显示细胞衰老对肝损伤后肝纤维化有调节作用，因而受到人们的关注。     

四倍体鸡蛋参的诱导与鉴定

目的:利用秋水仙素处理和组织培养技术诱导鸡蛋参多倍体,丰富现有遗传资源。方法:通过不同浓度(0.01%~0.2%)的秋水仙素和不同的诱导时间(6~60h)处理已得到的鸡蛋参无菌苗。结果:诱导株经流式细胞术检测,获得秋鸡蛋参四倍体、嵌合体和八倍体。结论:0.2%秋水仙素处理36h,四倍体诱导率在33.3%,诱导效果最佳。     

泽泻泡腾片制备工艺研究

目的:研究泽泻泡腾片的配方和制备工艺。方法:通过单因素试验,以酒石酸和碳酸氢钠为泡腾剂,对泽泻泡腾片进行质量配比、甜味剂和填充剂的筛选。结果:泽泻泡腾片最优配方为酒石酸18.3%、氯化钠11.0%、乳糖21.0%、碳酸氢钠41.1%、蔗糖5.1%、泽泻醇3.5%;最佳制备工艺为酸碱分开湿法制粒压片。结论:该工艺简易,制得的泽泻泡腾片片剂完整,外观呈棕色光洁均匀,崩解快速,溶液澄清,口感良好,崩解时限、硬度及脆碎度均符合《中国药典》规定。