恩度联合腹腔化疗治疗肝癌腹水的护理体会

恶性腹水是肝癌晚期严重的并发症之一.肿瘤浸润或转移至胸腹膜后肿瘤新生血管的生成、血管内皮生长因子（VEGF）水平的升高以及血管通透性的增高等是恶性腹水形成的重要机制之一[1,2].肿瘤动物模型研究表明：腹腔内给予表达血管内皮抑制素的转基因治疗或腹腔内直接给予重组血管内皮抑制素可以抑制腹腔内肿瘤的生长,并能有效防止恶性腹水的形成和再发,与化疗药物之间有协同作用.自2008年1月至今,我们采用腹腔内注射重组人血管内皮抑制素（恩度）联合化疗药物治疗恶性腹水,取得初步疗效,现将护理体会报告如下.     

sp3111RNAi转基因小鼠模型的评价以及sp3111下调表达对受精及早胚发育的影响

目的 评价sp3111 RNAi转基因小鼠模型的应用价值以及探讨SP3111蛋白降低表达对受精及早期胚胎发育的影响.方法 ①采用Real-Time PCR方法分别检测F1代和F4代转基因RNAi小鼠中sp3111 mRNA的表达变化,并比较2代间干扰效率的差异.②将精子分为实验组（F4代小鼠精子组）和对照组（野生小鼠精子组）,进行体外授精实验,观察受精率及碎裂胚胎的发生率.结果 ①F1代和F4代小鼠中干扰效率的差异无统计学意义（P〉0.05）.②实验组的正常胚胎与碎裂胚胎的形成率分别为34.48%和46.21%,与对照组相比均有显著差异（P〈0.05）.结论 ①RNAi转基因小鼠中RNAi诱导的转录沉默可稳定遗传至F4代.②SP3111下调表达对小鼠受精及早期胚胎发育有明显的影响.     

后基因组时代转基因小鼠在生命科学中的研究进展

随着后基因组时代的到来,转基因动物已成为新兴的最有效的动物实验模型,转基因小鼠应用领域越来越广泛。利用转基因小鼠,从生物整体上研究基因组的功能学,又称为后基因组学。活体研究各基因及调控作用,克服了原来此领域研究的局限性和片面性。国内外基因工程小鼠的制备已经形成了技术平台,发展规模化、商业化。现就转基因小鼠的发展、应用及转基因小鼠国内外现状和发展趋势予以综述。     

白细胞介素-4的研究进展

目前,很多免疫学家及生物学家都在致力于淋巴因子的研究.这些淋巴因子有着各种各样的功能,在机体的免疫反应中扮演了重要的角色.白细胞介素-4(interleukin,IL-4)主要是由T细胞产生的一种细胞因子,它不仅刺激B细胞的活化、增殖、分化,还与B细胞以外的淋巴细胞有着密切的关系.因此,有关IL-4的研究正受到人们越来越多的关注.自1982年由Howard等人首次报道以来,人们对其分子结构和体内外生物学活性进行了广泛研究并取得了很大进展.本文主要从IL-4的特性;对B细胞、T细胞的作用、抗肿瘤、与某些疾病的关系等几个方面归纳简述.     

扶正祛邪与RNA干扰(RNAi):一个筛选、发现新型抗病毒方法和药物的新途径

<正>前文已就扶正祛邪治则在设计新型抗病毒药物及预防和治疗细菌或病毒感染性疾病中的研究和应用前景做过探讨[1-2]。本文探讨中医学扶正祛邪治则与RNA干扰(RNA interference,RNAi)的可能联系,并从这一联系出发,提出一个基于RNA干扰机制,从扶正祛邪治则及其方药中筛选、发现新型抗病毒方法和药物的新途径。     

C57-ras致癌性转基因模型杂交1代的脏器及血液学参数测定

目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠杂交F1代的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性鼠和BALB/cJ小鼠交配后的杂交1代CB6F1-Tg小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果血液生理指标中,CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠间比较,MCHC存在极显著性差异(P<0.01);CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雄鼠和阴性(-/-)雄鼠间比较,PLT、PCT、EOS%、NEUT、NEUT%、LYM%存在显著性差异(P<0.05),NEUT%、LYM%存在极显著性差异(P<0.01)。血清生化指标中,CB6F1-Tg阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠比较,ALT、TP、ALB存在显著性差异(P<0.05),TG存在极显著性差异(P<0.01)。主要脏器重量和脏器系数均无显著性差异(P>0.05)。结论测定了新建C57-ras致癌性转基因小鼠模型F1代阳性小鼠和阴性小鼠的主要生物学特性,为该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用中提供参考。     

甘丙肽重构基因GAL(intronⅡ)的克隆及其过表达转基因载体的构建

目的克隆甘丙肽重构基因GAL(intronⅡ),构建小鼠神经系统特异性表达甘丙肽(galanin,GAL)的转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ),为制备GAL转基因小鼠做准备。方法通过常规PCR、RT-PCR及重叠延伸PCR(overlap extension PCR,OE-PCR)扩增出插入GAL第二内含子的GAL全长cDNA的重构基因GAL(intronⅡ),将GAL(intronⅡ)克隆入T载体进行酶切、测序鉴定;同时从psisCAT6α中切下血小板源性生长因子β链(platelet-derived growth factor beta polypeptide,PDGF-β)启动子片段连接到空载体pUC18上构建出重组载体pUC18/PDGF-β-promoter;然后将GAL(intronⅡ)定向克隆于pUC18/PDGF-β-promoter下游,构建转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ)。结果 PCR和限制性内切酶分析鉴定,表明获得转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ)。通过对重构基因GAL(intronⅡ)的GALcDNA和第二内含子序列测序证实其与GenBank中的标准序列一致,GAL(intronⅡ)中第二内含子插入的位置准确,且无移码。结论使用重叠延伸PCR扩增重构基因GAL(intronⅡ)并成功构建转基因载体pUC18/PDGF-β-promoter/GAL(intronⅡ),为转基因小鼠制备奠定一定的实验基础。     

APP695K595N/M596L突变转基因小鼠的建立和病理表型动态分析

目的建立APP695K595N/M596L(Swedish突变)转基因小鼠和评价痴呆表型的发生和发展过程。方法将APP695K595N/M596L突变基因插入到小鼠朊蛋白(mouse prion protein)启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695K595N/M596L突变转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因表型,Western blotting检测APP突变基因表达。Thioflavin-S染色检测不同年龄转基因小鼠大脑病理改变。Morris水迷宫动态观察小鼠行为学改变。结果建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,Thioflavin-S染色显示转基因小鼠9月龄时在脑海马区可检测到老年斑形成,并且在11、12月龄时明显增多。Morris水迷宫结果发现与同月龄野生型小鼠相比,该转基因小鼠5月龄开始出现学习记忆能力缺陷,7、9、11月行为学结果证实转基因小鼠的学习记忆能力缺陷随年龄增加而日趋严重(P<0.05)。结论建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,并能再现人类阿尔茨海默症的行为学及神经病理学特征,为阿尔茨海默病发病机制研究和药物研发提供了有价值的动物模型。     

HBV转基因小鼠暴露ATB-1后肝脏ATB-1-DNA加成物水平的测定

目的探讨ＨＢＶ与ＡＴＢ１协同致肝癌的机理．方法用ＲＩＡ法测定ＨＢＶ转基因小鼠与正常小鼠暴露ＡＴＢ１后０，０５，１，２，４，８，２４ｈ７个不同时相肝脏ＡＴＢ１ＤＮＡ加成物的含量变化．结果暴露ＡＴＢ１后，ＨＢＶ转基因小鼠肝脏ＡＴＢ１ＤＮＡ加成物含量在各时相均高于正常小鼠，尤以１ｈ高峰时相值（５５９２ｐｍｏｌ／ｍｇ±４１５ｐｍｏｌ／ｍｇ比４１３６ｐｍｏｌ／ｍｇ±２８２ｐｍｏｌ／ｍｇＤＮＡ，Ｐ＜００１）及２４ｈ时相值（２４８７±２０３比９８９±８５，Ｐ＜００１）最显著．２４ｈ后，转基因小鼠肝脏ＡＴＢ１ＤＮＡ加成物仍维持高水平，但正常小鼠已基本恢复至暴露前水平．结论ＨＢＶ转基因小鼠暴露ＡＴＢ１后肝脏ＡＴＢ１ＤＮＡ加成物含量增加可能为ＨＢＶ与ＡＴＢ１协同致肝癌的直接原因．     

转基因方法治疗炎症性肠病

使用类固醇药物和抗炎症药物治疗炎症性肠病(IBD)时常产生不良反应或不能达到痊愈,所以IBD的生物治疗,包括基因转移疗法就提到日程上来。文章简要地综述了IBD相关的基因治疗靶向分子,并总结了近期肠道基因治疗临床前研究的结果和讨论了未来的发展方向。