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用Transgreen/PI荧光复染法检测精子的存活率 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨Transgreen/碘化丙锭(PI)荧光复染法用于检测人类精子存活率的可行性。方法以Invitrogen公司的Live/Dead Sperm Viability Kit的存活率结果为参考值,比较Transgreen/PI复染后精子的存活率结果与该试剂盒存活率结果的一致性;研究检测过程中试剂Transgreen和PI的加入顺序对存活率结果的影响;研究2h内Transgreen和PI染料对精子运动的影响。结果用Transgreen/PI复染法和Live/Dead Sperm Viability Kit复染法检测人类精子存活率,其结果无显著差异(P〉0.05);精液中Transgreen和PI的加入顺序对精液存活率的检测结果没有影响(P〉0.05);与空白对照相比,精液中加入Transgreen、PI及Transgreen/PI后2h内,精子的各项运动参数没有明显改变(P〉0.05)。结论Transgreen/PI复染法与Live/Dead Sperm Viability Kit一样,具有灵敏度高、重复性好及快速简便的优点,而且Transgreen/PI复染法价格低廉,可以作为检测精子存活率的常规实验室方法。 相似文献
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目的 评价sp3111 RNAi转基因小鼠模型的应用价值以及探讨SP3111蛋白降低表达对受精及早期胚胎发育的影响.方法 ①采用Real-Time PCR方法分别检测F1代和F4代转基因RNAi小鼠中sp3111 mRNA的表达变化,并比较2代间干扰效率的差异.②将精子分为实验组(F4代小鼠精子组)和对照组(野生小鼠精子组),进行体外授精实验,观察受精率及碎裂胚胎的发生率.结果 ①F1代和F4代小鼠中干扰效率的差异无统计学意义(P〉0.05).②实验组的正常胚胎与碎裂胚胎的形成率分别为34.48%和46.21%,与对照组相比均有显著差异(P〈0.05).结论 ①RNAi转基因小鼠中RNAi诱导的转录沉默可稳定遗传至F4代.②SP3111下调表达对小鼠受精及早期胚胎发育有明显的影响. 相似文献
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目的 探讨新生儿先天性乳糜胸(CC)的临床特点及影响其预后的高危因素。方法 回顾性分析2012年1月至2022年5月在新生儿重症监护室收治的CC患儿的临床资料。结果 最终纳入CC患儿60例,男36例、女24例,胎龄36.7(34.7~38.8)周,出生体重3 160.0(2 755.0~3 645.0)g,早产儿31例,足月儿29例。产前诊断胸腔积液52例,宫内治疗13例,出生时窒息31例,在产房插管27例,复苏时胸腔穿刺8例,双侧胸腔积液30例,胎儿水肿19例,低蛋白血症29例,合并先天性乳糜腹14例,合并先心/染色体异常12例。与足月儿组相比,早产儿组男性比例较低,出生体重较轻,宫内治疗、胎儿水肿、窒息、在产房插管、机械通气、双侧胸腔积液、白蛋白<30 g/L、合并先天性乳糜腹以及死亡比例均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。存活组49例,死亡组11例,死亡患儿均于生后1周内死于呼吸衰竭。二分类logistic回归分析发现,胎儿水肿是CC新生儿早期死亡的独立危险因素(P<0.05)。所有病例行保守治疗,随访存活患儿,3例失访,1例复发,余45例情况良好。结论 ... 相似文献
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目的 为探索精子细胞特异表达的新基因ssp411在受精及早胚发育中的功能,设计并构建了以ssp411基因为靶点的RNA干扰表达载体siRNA-ssp411s,筛选其中对ssp411基因有显著干扰作用的表达质粒.方法 根据已知的ssp411 mRNA序列,选择设计三条带发卡结构的核苷酸序列,克隆到含有U6启动子的载体pRNAT-U6.1中并测序分析.用脂质体转染的方法将干扰质粒与表达质粒ssp411-pDsRed共转染293T细胞,24h后,荧光倒置显微镜观察转染效率,并收集细胞,通过实时定量PCR方法检测不同干扰质粒对ssp411 mRNA的干扰效果.结果 3个ssp411的siRNA片断被成功克隆到pRNAT-U6.1质粒载体中,插入片段测序结果与设计的序列完全一致.实时定量PCR结果表明,针对ssp411基因蛋白编码区3-22序列构建的干扰质粒效果最好,干扰效率可达71%.结论 成功构建了能表达ssp411 shRNA(small hairpin RNA)的重组质粒,同时通过共转染技术,筛选到一个干扰效果达70%以上的干扰片断,为建立转基因RNA干扰小鼠模型,在体内研究ssp411基因及蛋白的生殖生物学功能打好基础. 相似文献
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目的 探讨经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)的极低出生体质量儿(VLBWI)发生导管相关血流感染(CRBSI)的危险因素.方法 选取郑州大学第三附属医院2019年1月—2021年11月入住新生儿重症监护病房(NICU)的PICC置管VLBWI.回顾性分析VLBWI的临床资料,采用病例对照研究的方法,以发生CRBSI... 相似文献
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