幼羊颅骨缺损修复中LncRNA的差异性表达及作用

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)基因在幼羊颅骨缺损修复的差异性表达及改善颅骨缺损的作用.方法 将12只1月龄的小尾寒羊分成2组:原生骨组织组、新生骨组织组,每组6只.通过高通量测序检测两组骨组织内LncRNA的表达变化,通过Real-time PCR验证测序LncRNA表达量的变化.ELISA法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)和钙调蛋白(OCN);Western blot检测Wnt/β-catenin的蛋白表达水平.结果 与原生骨组织组相比,新生骨组织中Ln-cRNA ODSM、LncRNA UCA1表达上调,LncRNA H19、Ln-cRNA MEG3的表达下调;新生骨组织组幼羊血清中ALP、OCN的含量升高;新生骨内的Wnt/β蛋白的表达升高.结论 LncRNA ODSM、UCA1可能调控Wnt/β信号通路参与缺损部位颅骨组织的修复.     

贝复剂喷剂治疗儿童疱疹性口炎的疗效观察

我科使用贝复剂喷剂外用治疗 1～ 3周岁患严重口腔溃疡患儿 ,收到良好的效果 ,现报道如下 :1　材料与方法1 .1　临床资料　共收治 1 2 0例患儿 ,男 70例 ,女 5 0例 ,年龄在 1～ 3岁之间 ,均在口腔损害出现 2d内来诊 ,排除其他疾病。1 .2　方法　贝复剂喷剂选用珠海东大生物制药有限公司产品 (bFGH) ,将患儿随机分为两组。治疗组 6 2例 ,每日外用贝复剂 3～ 4次 ,饭后及睡前使用。对照组 5 8例 ,常规给予洗必泰漱口水外用。两组可同时服用相同种类的抗生素预防感染。1 .3　标准　显效 :3d内溃疡愈合 ,疼痛消失 ;有效 :3d后溃疡明显缩小 ,疼…     

降钙素基因相关肽对人牙髓细胞的矿化影响

目的：分析降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP)对人牙髓细胞促矿化功能的影响，探讨CGRP在牙髓炎症状态下表达量增多的生物学意义。方法：人牙髓细胞分实验组和对照组培养，实验组加入适量的CGRP。分别测定细胞的碱性磷酸酶活性、骨钙素含量、I型胶原mRNA表达量变化。结果：培养3、6、9、12、15d,5个时间点实验组比对照组细胞碱性磷酸酶活性增强、骨钙素含量增加，且有显著性差异（P＜0．01）。培养6d的实验组的细胞I型胶原mRNA表达比对照组明显高。结论：CGRP刺激牙髓细胞分化，促进矿化形成，CGRP表达增高将有助于修复性牙本质形成。     

小鼠釉质发育过程中成釉器中间层细胞增殖、凋亡以及组织非特异性碱性磷酸酶的表达

目的:观察小鼠釉质发育过程中成釉器中间层细胞的增殖、凋亡和其组织非特异性碱性磷酸酶(tissue nonspecific alkaline phosphatase,TNSALP)的表达,探讨中间层在釉质形成过程中的可能作用.方法:取出生后1、3、5、7、9、11、15d的BALB/c小鼠56只,解剖分离含下颌第一磨牙区的下颌骨,脱钙,制片,HE染色进行牙釉质发育情况的组织学观察,分别采用原位末端标记法(TUNEL法)、SP免疫组织化学技术、PV二步法观察中间层细胞的凋亡及检测Bcl-2、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),并对TNSALP进行组织学定位.通过Image-pro plus 6.0图像分析软件.对图像进行半定量分析.采用SPSS13.0软件包进行t检验、单因素方差分析及SNK-q检验.结果:出生后1d.中间层细胞增殖细胞核抗原由比成釉细胞表达高的强阳性表达逐渐降低;至7d时,其表达为阴性,而且中间层细胞随釉质的发育逐渐凋亡.中间层细胞先于成釉细胞表达TNSALP,出生后5d时即呈现强阳性染色,而后其表达又逐步减弱;成釉细胞7d时开始出现阳性,且呈逐渐增强趋势.结论:中间层细胞的增殖和凋亡及其TNSALP的表达与成釉细胞具有相关性,提示中间层细胞有可能参与成釉细胞的分化及釉质形成.     

三氧化矿物凝聚体对人乳牙牙髓细胞增殖和分化影响的实验研究

目的 对比三氧化矿物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)和氢氧化钙对人乳牙牙髓细胞增殖和分化的影响,为MTA应用于乳牙活髓保存治疗提供实验依据.方法 培养原代人乳牙牙髓细胞,采用噻唑蓝比色法检测乳牙牙髓细胞生长增殖的变化;von Kossa染色观察牙髓细胞钙结节形成情况,并计数分析;使用实时荧光定量聚合酶链反应法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因的表达.结果 氢氧化钙组牙髓细胞增殖率显著低于对照组和MTA组(F=1792.301,P<0.01),最大增殖率为89.7%;MTA组牙髓细胞增殖率显著高于氢氧化钙组和对照组(F=1835.065,P<0.01),最大增殖率为118.4%.氢氧化钙组和MTA组牙髓细胞von Kossa染色均呈阳性,两组间钙结节计数分析差异无统计学意义(P>0.05).三组间ALP基因表达量差异有统计学意义(F=349.651,P<0.01),氢氧化钙组显著低于对照组和MTA组,MTA组显著高于氢氧化钙组和对照组;三组间DSPP基因表达量差异也有统计学意义(F=1653.001,P<0.01),氢氧化钙组显著低于对照组和MTA组,MTA组显著高于氢氧化钙组和对照组.结论 从促进乳牙牙髓细胞的增殖和分化来看,MTA比氢氧化钙更适合作为乳牙的盖髓剂.     

快速扩弓前后龈沟液天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶水平的变化

目的：研究快速扩弓前后龈沟液天冬氨酸转氨酶（AST）与碱性磷酸酶（ALP）水平的变化,以及其与快速扩弓牙周组织改建的关系.方法：选择38例快速扩弓的患者（10.5～12.8岁）,随机分为对照组（18例）和加力组（20例）.利用全自动化生化分析仪检测快速扩弓前,快速扩弓24h、7d,及保持7d、14d、28d的龈沟液AST、ALP水平的变化,结果以酶总量/牙表示.采用SAS（r）Proprietary Software Version 9.00对数据进行配对t和两样本t检验.结果：加力组AST水平在快速扩弓24h后开始升高（P＜0.05）,对照组在快速扩弓7d后开始升高（P＜0.01）,2组AST水平至保持28d时一直维持在较高水平（P＜0.01）;扩弓24h至保持28d,加力组与对照组AST水平存在显著差异（P＜0.05）.加力组和对照组ALP水平在快速扩弓7d后开始升高,至保持28d时一直维持在较高水平（P＜0.01）;从扩弓7d至保持28d,加力组与对照组ALP水平存在显著差异（P＜0.01）.结论：龈沟液AST、ALP水平可以在一定程度上反映快速扩弓后牙周组织的改建.     

染料木黄酮对成骨细胞增殖、分化和凋亡影响的实验研究

目的研究染料木黄酮对成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响，以阐明其对骨形成的作用机制。方法酶消化和组织块相结合培养获得原代成骨细胞，并以成骨肉瘤细胞株UMR-106细胞作对照，加入不同浓度的染料木黄酮后，流式细胞仪和噻唑蓝比色法(MTT)检测成骨细胞细胞周期比例的改变以及凋亡情况；生化法检测细胞内碱性磷酸酶含量的改变。结果流式细胞分析和MT观测结果表明：染料木黄酮促进了原代成骨细胞由G0(G1)期向S期、G2期和M期的移行过渡，从而促进了原代成骨细胞的增殖。染料木黄酮对成骨肉瘤细胞株UMR-106细胞周期无影响，但可诱导UMR-106细胞凋亡。碱性磷酸酶检测结果表明：染料木黄酮可促进原代成骨细胞的分化。结论染料木黄酮可在一定程度上促进成骨细胞的增殖和分化，诱导成骨肉瘤细胞凋亡。     

胶原膜治疗Ⅱ～Ⅲ度根分叉区病变的临床观察

目的:对引导组织再生术(GTR)治疗Ⅱ～Ⅲ度根分叉区病变的短期临床疗效进行评价,分析影响其疗效的因素.方法:选取Ⅱ～Ⅲ度根分叉区病变的患牙21颗,胶原膜治疗11颗,翻瓣术治疗10颗,术后3月通过观察牙龈指数、附着水平、根分叉垂直与水平探诊深度的变化;实验室检测龈沟液量(GCF)及龈沟液碱性磷酸酶(GCF-ALP)活性水平的变化;计算机测量分析根尖片,对2种手术方法的临床疗效进行比较.结果:术后3月①自身前后比较,2组的牙龈指数均无显著性差异(P＞0.05),根分叉垂直与水平探诊深度与GTR组的牙周附着水平,均有明显改善,且有显著性差异(P＜0.05),翻瓣组临床附着水平变化则无显著性差异(P＞0.05);胶原膜组与翻瓣组相比较,除牙龈指数外各项临床指标均具有显著性差异(P＜0.05).②实验室观察:自身前后对照比较.2组GCF量均无显著性差异(P＞0.05),GCF-ALP浓度均减少,且有统计学意义(P＜0.05).胶原膜组与翻瓣组相比较,GCF-ALP浓度减小幅度较大,有显著性差异(P＜0.05).③根尖片的测量:2组根分叉区骨密度均增高,GTR组与对照组相比较,垂直向骨高度增加明显,具有显著性差异(P＜0.05).结论:胶原膜治疗Ⅱ～m度根分叉区病变,可获得良好的短期临床疗效.     

胰岛素样生长因子Ⅱ对体外培养成骨细胞辐射效应的影响

目的：检测不同浓度胰岛素样生长因子Ⅱ(Insulin-like growth factorⅡ，IGF-Ⅱ)对电离辐射后成骨细胞增殖、功能和分化方面的影响，探讨不同剂量辐射后IGF-Ⅱ对成骨细胞的效应。方法：成骨细胞通过酶消化法从SD大鼠颅骨中获取传代；将第3代细胞分别进行0、100、400、600和900cGy的γ线辐射，辐射后的细胞在含有不同浓度IGF-Ⅱ的培养液中培养6d，观察及检测成骨细胞的增殖、功能及分化等情况。结果：经电离辐射后，细胞的增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素含量均受到抑制。IGF-Ⅱ可有效降低100cGy辐射对增殖的抑制效应，1，10，和100μg／L的IGF-Ⅱ都改变了400cGy时的辐射效应，其中以10μg／L的浓度时最明显。结论：IGF-Ⅱ能有效促进成骨细胞辐射损伤的恢复，而这种作用有浓度依赖性，并取决于辐射损伤的程度。     

中药双黄补对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和超微结构的影响

目的：探讨中药双黄补对人牙周膜细胞向成骨方向转化的作用。方法：采用组织块法体外培养人牙周膜细胞，取第5代培养细胞随机分为实验组和对照组，实验组加不同浓度的双黄补，对照组只加含10mL／LFBS的DMEM培养液。通过PNPP法测定牙周膜细胞裂解液中的碱性磷酸酶活性，透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果：不同浓度的中药双黄补对人牙周膜细胞的碱性磷酸酶活性均有提高作用，其中以100μg／mL效果最佳。透射电镜下可见牙周膜细胞内质网池普遍扩张，细胞内基质膜泡和髓鞘样结构明显增加，细胞间广泛分布胶原纤维。结论：中药双黄补有诱导人牙周膜细胞向成骨样细胞转化的作用，可使细胞合成胶原的功能增强。