幼羊颅骨缺损修复中LncRNA的差异性表达及作用

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)基因在幼羊颅骨缺损修复的差异性表达及改善颅骨缺损的作用.方法 将12只1月龄的小尾寒羊分成2组:原生骨组织组、新生骨组织组,每组6只.通过高通量测序检测两组骨组织内LncRNA的表达变化,通过Real-time PCR验证测序LncRNA表达量的变化.ELISA法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)和钙调蛋白(OCN);Western blot检测Wnt/β-catenin的蛋白表达水平.结果 与原生骨组织组相比,新生骨组织中Ln-cRNA ODSM、LncRNA UCA1表达上调,LncRNA H19、Ln-cRNA MEG3的表达下调;新生骨组织组幼羊血清中ALP、OCN的含量升高;新生骨内的Wnt/β蛋白的表达升高.结论 LncRNA ODSM、UCA1可能调控Wnt/β信号通路参与缺损部位颅骨组织的修复.     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞DNA甲基转移酶表达和细胞周期的影响

目的:探究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞增殖及其对DNA甲基化转移酶(DNMT)表达的影响。方法:5-Aza-CdR处理HT22细胞,采用Real-time PCR和免疫印迹检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3BmRNA及蛋白的表达;甲基转移酶活性试剂盒检测DNMTs活性;流式细胞仪对其细胞周期及凋亡进行检测。结果:5-Aza-CdR处理HT22细胞24h后,不同浓度5-Aza-CdR均显著抑制HT22细胞增殖,且使胞质空泡化。5-Aza-CdR降低了HT22细胞早期凋亡,但促进晚期凋亡,并诱导细胞周期发生S期阻滞。DNMT1和DNMT3A的mRNA和蛋白表达下降,但DNMT3B表达未发生明显变化。DNMT1和DNMT3B活性降低。结论:5-Aza-CdR可降低DNMT1和DNMT3A mRNA和蛋白表达以及DNMT1和DNMT3B活性,影响HT22细胞周期及凋亡。     

宫颈癌组织中DNA甲基转移酶1、3A和3B mRNA的表达

目的探讨DNA甲基转移酶1、3A和3B在宫颈癌发生发展中的作用。方法应用real-time PCR技术检测10例宫颈癌、10例宫颈上皮内瘤变和10例正常宫颈组织DNMT1、3A和3BmRNA的表达。结果宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 1mRNA对GAPDH mRNA的相对丰度值分别是0.30±0.1、0.26±0.12和0.10±0.04,宫颈癌组织组织中与正常宫颈中DNMT 1表达有显著差异（P〈0.05）;宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT3A mRNA对GAPDH mRNA的相对丰度值分别是0.94±0.27、0.51±0.24和0.13±0.04,三组相比较有显著性差异（P〈0.05）;宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 3B mRNA对GAPDH mR-NA的相对丰度值分别是0.30±0.09、0.28±0.11和0.11±0.04,宫颈癌组织组织中与正常宫颈中DNMT 3B表达有显著差异（P〈0.05）。结论 DNMT1、3A和3B参与了宫颈癌的发生,并在宫颈上皮内瘤变时就已经起了一定作用。     

陈旧血电泳出现快泳红带的原因分析—红细胞释放“高铁血红素”?

[目的]用陈旧血做血红蛋白释放试验时,有些标本出现快泳的红色区带,其他标本没有这种现象。本文的目的就是研究快泳红带的来源、本质和意义。[方法]用淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳,对有快泳红带的标本作进一步分析:血浆蛋白电泳、血红蛋白电泳、红细胞电泳以及全血电泳,分析快泳红带之来源。再用交叉电泳和双向电泳研究它的本质。[结果]此快泳红带的电泳速度与血浆白蛋白相近,丽春红染色阳性、联苯胺显色也是阳性。红带中的联苯胺阳性成分来自红细胞,与血浆白蛋白结合形成快泳红带。[结论]来自红细胞的成分很可能是高铁血红素,快泳红带可能是它与血浆白蛋白的结合产物-高铁血红素白蛋白(MHA)。     

钒化钠抑制人胃癌SGC7901细胞增殖的作用机理

目的通过观察钒化钠对人胃癌SGC7901细胞周期蛋白cyclinD1表达的影响,探讨其对人胃癌SGC7901细胞增殖抑制的作用机理。方法应用MTT法测定钒化钠对人胃癌SGC7901细胞的生长抑制作用;用Western-blot法检测钒化钠对人胃癌SGC7901细胞周期蛋白cyclinD1表达水平的变化。结果一定浓度的钒化钠使人胃癌SGC7901细胞增殖周期密切相关的cyclinD1蛋白表达降低。结论一定浓度的钒化钠能明显抑制人胃癌SGC7901细胞的生长,钒化钠的抗肿瘤机制可能与cyclinD1蛋白表达降低有关。     

肾细胞癌患者组织中RASSF1A、hMLH1及ALU甲基化水平的分析

目的探讨错配修复基因(h MLH1)、RAS相关区域家族1A基因(RASSF1A)启动子区甲基化以及ALU基因甲基化水平与肾细胞癌(肾癌)的关系。方法巢式甲基化特异性PCR(n MSP)检测15例肾癌组织及其相应癌旁组织中h MLH1、RASSF1A基因启动子区的甲基化状态,联合亚硫酸氢钠限制酶分析方法(COBRA)分析ALU基因甲基化水平。结果 h MLH1基因在肾癌组织中的甲基化率(0.41±0.18)%高于癌旁组织(0.32±0.13)%,差异有统计学意义(t=2.52,P0.05);ALU基因在癌组织中的甲基化率(0.11±0.04)%低于癌旁组织(0.12±0.03)%,差异有统计学意义(t=3.82,P0.05)。而RASSF1A基因在肾癌组织和癌旁组织中的甲基化率分别为(0.75±0.11)%和(0.69±0.12)%,差异无统计学意义(t=1.35,P0.05)。结论 h MLH1基因启动子区甲基化以及ALU基因甲基化可能与肾癌的发病有关,RASSF1A基因启动子区甲基化与肾癌发病无关。     

钒化钠对食管癌细胞系EC109 Caspase-3表达的影响

目的：研究钒化钠对食管癌细胞系EC109 Caspase-3激活的影响,探讨钒化钠影响食管癌细胞系EC109细胞生长的机制。方法：以体外培养食管癌细胞系EC109为研究对象,给予0、0．1、1．0、5．0、10．0、50．0、100．0、200．0μmol／L钒化钠,培养1小时后,用Western blot技术检测食管癌细胞系EC109 Caspase-3激活情况。结果：0、0．1、1．0、5．0、10．0μmol／L钒化钠组培养1小时后,各组Caspase-3蛋白激活与对照组比较均无统计学意义;50．0、100．0、200．0μmol／L钒化钠组培养1小时后,各组Caspase-3蛋白表达均升高。结论：高浓度的钒化钠可能激活EC109细胞Caspase-3蛋白。     

外泌体miRNA在心血管疾病中作用的研究进展

<正>心血管疾病有着高患病率和高死亡率,是对成年人特别是中老年人身体健康产生严重威胁的常见疾病。每年因心血管疾病死亡的人口占全球死亡总人数的30%以上,目前已成为临床重点关注研究的领域。有研究表明心血管疾病与微小RNA（microRNA,miRNA）的调节关系紧密。近年来更是有研究证实了miRNA作为外泌体细胞间信息传递过程中重要的信号分子,参与相关信号通路的调节,并涉及心血管疾病的生理病理机制[1,2]。?     

石榴籽油对骨性关节炎大鼠膝关节病理形态及相关细胞因子mRNA水平的影响研究

目的:通过研究不同干预剂量的石榴籽油(pomegranate seed oil, PSO)对骨性关节炎(osteoarthritis, OA)大鼠膝关节Micro CT结构参数的影响以及软骨细胞中II型胶原蛋白(collagen typeⅡ,CoⅡ)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase, MMP-1)mRNA表达的作用关系,明确石榴籽油改善软骨退变及保护软骨的作用机制。方法:将实验动物分成5组,假手术组(Control)、模型对照组(简称模型组,Model)、实验1、2、3组(Experiment1、2、3)。每组20只动物,除假手术组外其余4个组均通过改良Hulth法建立OA动物模型,驱赶4周,每天给予假手术组和模型组动物1.59 g/kg生理盐水灌胃,3个实验组动物分别给予0.95 g/kg、1.27 g/kg和1.59 g/kg纯石榴籽油灌胃,继续喂养12周后处死,收集大鼠膝关节内侧髁软骨标本,Micro CT分析关节骨体积分数[BV/TV(%)]、结构模型指数(SMI),RT-PCR法检测CoⅡ、MMP-1 mRNA在软骨细胞中的表达。结果:与假手术组比较,模型组和实验1、2、3组BV/TV(%)均减小(P<0.05);与模型组比较,实验1、2、3组BV/TV(%)增加(P<0.05)。与假手术组比较,模型组和实验1、2、3组SMI均增加(P<0.05);与模型组比较,实验1、2、3组SMI减小(P<0.05)。与假手术组比较,模型组MMP-1 mRNA表达量增加(P<0.01);实验1、2、3组与模型组比较,MMP-1 mRNA表达量减少(P<0.01)。与假手术组比较,模型组CoⅡmRNA表达量降低(P<0.01);与模型组比较,实验1、2、3组CoⅡmRNA相对表达量增加(P<0.01)。结论:石榴籽油能够增加骨体积分数,降低结构模型指数,改善软骨下骨骨质疏松状况;石榴籽油能够下调软骨细胞中MMP-1的表达,抑制CoⅡ降解,恢复软骨弹性,延缓关节软骨退变。