碱性成纤维生长因子在内窥镜鼻窦炎术后的临床的应用

目的:探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)在慢性鼻窦炎术后临床效果。方法:选择78例慢性鼻窦炎行内窥镜鼻窦手术患者,随机分为治疗组39例和对照组39例,所有患者一般治疗相同,对照组术后常规以油纱条填塞鼻腔,治疗组术后使用含有bFGF的油纱条填塞鼻腔。结果:1周后出院,观察鼻腔出血、分泌物及肿胀情况,治疗组明显好于对照组,随访3个月,治疗组的治愈率较对照组的治愈率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子能安全应用于鼻内镜鼻窦手术后术腔填塞可促进鼻窦黏膜修复,提高治愈率,取得满意的临床效果。     

骨折端微动应力对局部碱性成纤维细胞生长因子的影响

背景:研究表明骨折端一定形式的微动可以促进骨痂的形成,但微动影响骨折愈合的分子生物学机制还不明确。目的:研究骨折端微动时应力对断端碱性成纤维细胞生长因子的影响。设计:随机对照的动物实验。单位:解放军第二炮兵总医院骨科,解放军总医院第一附属医院骨科,解放军总医院第一附属医院药剂科。材料:实验于2003-03/2004-04在解放军总医院第一附属医院动物实验室及解放军军事医学科学院八室完成。选取健康纯种新西兰大耳白兔72只,清洁级,月龄5～6个月,体质量2.5～3.0kg,由军事医学科学院动物中心提供。按随机数字表法分为两组:微动组和固定组,每组36只。两组动物又分别分为术后7,14,21,28,42,56d6个时间点进行观察,每个时间点6只。方法:应用氯胺酮、速眠新肌注麻醉所有动物,于胫骨平台下3,3.5,5.5,6cm分别旋入固定针,安装外固定架,夹具距内侧骨皮质1.5cm,胫骨平台下4.5cm处横行截断胫骨,固定组、微动组骨折间隙分别为2.0,2.5mm。固定组动物应用单臂外固定架固定,解剖复位骨折端。微动组动物截骨固定后使外固定架中间杆有0.5mm的轴向移动。术后动物自由行走,依靠自身体质量使外固定架产生微动。术后7,14,21,28,42,56d处死动物。以骨折端为中心,切取1cm长标本,分割,固定12h。术后7,14,21,28,42,56d采用免疫组织化学染色和JVC图像分析处理系统行碱性成纤维细胞生长因子定量分析和显色强度判定。主要观察指标:①碱性成纤维细胞生长因子显色强度判定;②碱性成纤维细胞生长因子定量分析。结果:纳入72只白兔均进入结果分析。碱性成纤维细胞生长因子存在于间质细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、成软骨细胞、骨细胞胞浆内表达。术后14,21,28d微动组碱性成纤维细胞生长因子蛋白阳性指数分别为1.98±0.14,2.04±0.12,2.13±0.17,明显大于固定组(1.59±0.14,1.68±0.15,1.63±0.27,P<0.05)。结论:微动应力可使骨折端碱性成纤维细胞生长因子增多,促进骨折愈合。     

HMGB1抑制剂对脓毒症小鼠T淋巴细胞和单核细胞的作用机制

目的 探讨高迁移率族蛋白B1（high modility groupbox 1,HMGB1）抑制剂对脓毒症T淋巴细胞和单核细胞的作用机制。 方法 将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为3组,每组10只,依次为假手术组、模型组、抑制剂组。模型组、抑制剂组采用盲肠结扎穿孔手术构建脓毒症小鼠模型,假手术组小鼠仅暴露盲肠后即进行伤口缝合,不结扎。抑制剂组小鼠术后腹腔注射HMGB1特异性抑制剂甘草酸（10 mg/kg）,每6 h注射1次,连续4次,假手术组和模型组腹腔注射等剂量的生理盐水。处死小鼠后,无菌分离小鼠的胸腺组织,常规提取胸腺中的T淋巴细胞和单核细胞。MTT法与流式细胞术测定T淋巴细胞的增殖活性和凋亡情况,Transwell趋化实验与ELISA法测定单核细胞的趋化活性以及分泌炎性因子TNF-α、IL-6及IL-10的情况,Western blot检测胸腺组织中HMGB1和第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白（phosphatase and tensin homolog deleted onchromosometen,PTEN）的表达水平。 结果 与假手术组相比,模型组小鼠胸腺组织T淋巴细胞的增殖活性和凋亡率、单核细胞的趋化活性和TNF-α、IL-6、IL-10蛋白的表达、HMGB1和PTEN的表达明显升高（均P<0.05）;与模型组相比,抑制剂组小鼠胸腺组织T淋巴细胞凋亡率、TNF-α、IL-6蛋白的表达、HMGB1和PTEN的表达明显降低,T淋巴细胞的增殖活性、单核细胞的趋化活性、IL-10蛋白的表达明显升高（均P<0.05）。 结论 HMGB1抑制剂可降低脓毒症小鼠胸腺T细胞的凋亡率,增强T细胞的增殖活性和单核细胞的趋化活性,提高单核细胞抗炎因子IL-10的分泌,抑制促炎因子TNF-α、IL-6的分泌。     

成纤维细胞生长因子和胰岛素促小鼠软骨细胞增殖分化的效应

背景：根据软骨为单一类型细胞组成的无血管组织，对氧和营养的供应要求较低，同种免疫性较低，体内功能较简单，易于在体外构建成可供移植的人工移植细胞系等特点，从建立用于组织工程的通用人类同种软骨细胞系着手，为人工组织和人工器官走向标准化和批量生产奠定基础。目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和胰岛素在原代培养软骨细胞的增殖过程中的效应，为组织工程中细胞因子的应用与作用进行评估。设计：以细胞为研究对象，分组对照重复观察测量。单位：一所大学的组织移植与免疫实验室。材料：实验于2002-11／2003-05在暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室完成，研究对象为随机获取的培养的软骨细胞。方法：在低血清培养基培养条件下进行小鼠原代软骨细胞培养，采用WST1比色法和荧光染色法观察不同浓度bFGF和胰岛素对软骨细胞增殖的影响。主要观察指标：主要结局：①bFGF对小鼠原代软骨细胞增殖影响。②胰岛素对小鼠原代软骨细胞增殖的影响。次要结局：软骨细胞形态学观察。结果：原代软骨细胞在4g／L胎牛血清培养基培养条件下，不同浓度的bFGF和胰岛素对软骨细胞的增殖有剂量相关性。形态学观察表明，bFGF和胰岛素不仅促进细胞增殖，而且可使细胞分泌基质增多。结论：胰岛素和bFGF均能促进软骨细胞的增殖。     

不育男性弓形虫感染与附属性腺功能测定

目的 探讨弓形虫(toxoplasmosis)感染对男性附属性腺功能的影响.方法 应用化学法分别检测38例正常生育男性(正常对照组)和42例弓形虫感染不育男性(弓形虫感染组)的精浆中酸性磷酸酶(ACP)、果糖(Fru)和α-葡糖苷酶(α-Glu)含量.结果 弓形虫感染组中精浆ACP和α-Glu含量明显低于对照组,两组之间存在显著性差异(P＜0.05),而Fru两组之问无显著性差异(P＞0.05).结论 弓形虫感染对前列腺和附睾功能具有干扰作用,测定精浆中ACP,FrU和α-Glu含量可帮助判断弓形虫感染所致男性不育者的状态,指导临床对其进行有效的治疗.     

联用鲑鱼降钙素、阿仑膦酸钠、钙尔奇D治疗老年 骨质疏松症疗效观察

目的评价联合应用鲑鱼降钙素、阿仑膦酸钠、钙尔奇D对老年骨质疏松症患者骨痛症状、骨代谢标记物、骨密度的影 响。方法2011年6月~ 2012年6月间选取原发性骨质疏松症患者45例.随机分为对照组和治疗组.连续治疗24周。所有 患者均每日口服1片钙尔奇D(600 mg);治疗组患者同时每周口服1片阿仑膦酸钠(70 mg).每日经鼻吸人1喷鲑鱼降钙素 (120IU)。各组分别于治疗前、治疗4周后、24周后进行疼痛分级评分。于治疗前、治疗24周后应用双能X线吸收法测定腰 椎L14、左侧股骨颈骨密度,测定血清骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶浓度。结果治疗组接受治疗24周后骨痛症状明显缓 解,治疗组总有效率优于对照组(P <0. 05)。治疗组24周时骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶浓度与治疗前相比差异有统计学意 义(P <0.05)。治疗组治疗前后腰椎L14骨密度均值差异有统计学意义(P <0. 05);两组治疗前后左侧股骨颈骨密度差异无 统计学意义(P >0. 05)。结论联用鲑鱼降钙素、阿仑膦酸钠、钙尔奇D治疗老年骨质疏松症临床疗效确切。     

碱性成纤维细胞生长因子对海马伞切断大鼠海马神经的影响

目的了解碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对海马伞切断造成的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马齿状回神经发生的影响,探讨bFGF治疗AD的前景。方法36只SD大鼠随机分成正常对照组(n=12)、AD对照组(n=12)和AD处理组(n=12)。AD处理组及AD对照组大鼠左侧海马伞切断制造AD模型;正常对照组注射生理盐水。AD处理组造模后每天侧脑室注射bFGF共7d;AD对照组及正常对照组同时间注射生理盐水。BrdU标记增殖细胞。TUNEL方法标记DNA片段,原位检测凋亡细胞。计数海马齿状回BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果AD处理组大鼠与AD对照组大鼠相比,海马齿状回BrdU阳性细胞增加犤两组在颗粒细胞层阳性细胞分别为(163±37),(53±5)个/切片平面;海马门(28.5±5.5),(12.3±2.8)个/切片平面;分子层(10.7±2.2),(6.0±1.4)个/切片平面犦,差异有非常显著性意义(F=103.4,83.4,33.4,P<0.01),而凋亡细胞差异无显著性意义(P>0.05)。AD对照组大鼠与正常对照组大鼠相比,海马齿状回BrdU阳性细胞数及凋亡细胞差异均无显著性意义(P>0.05)。结论bFGF可刺激AD模型大鼠海马神经发生。     

肝癌组织特异性蛋白磷酸酶2A催化性C亚基α亚型显性负性突变体表达载体抑制肝癌移植瘤生长的体内研究

目的 构建腺病毒为载体的肝癌组织特异性启动子驱动的蛋白磷酸酶2A催化性C亚基α亚型显性负性突变体(domina negative form of protein phosphatase 2A catalytic subunit α,DN-PP2Acα)表达载体,研究其对肝癌生长的影响.方法 前期研究已构建了甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)基因增强子和磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,pgk)基因启动子组合形成的肝癌组织特异性AFpg启动子,并将AFpg启动子和DN-PP2Acα编码序列构建成AFpg启动子调控的DN-PP2Acα表达载体.将该载体重组到腺病毒载体中.Western印迹法检测PP2Ac表达水平.MTT法检测细胞生长.用荷瘤裸鼠进行体内研究.结果 AFpg启动子调控的DN-PP2Acα表达载体可特异性地使DN-PP2Acα表达于AFP阳性肝癌细胞HepG2,并抑制细胞及移植瘤的生长,而对AFP阴性肝癌细胞株SK-HEP-1、正常肝细胞株L-02和移植瘤的生长无明显影响.结论 AFpg启动子调控的DN-PP2Acα表达载体能特异性地抑制AFP阳性肝癌细胞的生长,可用于肝癌组织特异性基因治疗.     

血清ALP和LDH两种同工酶在不同组织学类型胃癌时的变化

本文对不同组织学类型的胃癌的血清标本进行了碱性磷酸酶（ALP）同工酶实验研究。结果表明：管状腺癌和乳头状腺癌患者血清有异常的碱性磷酸酶同工酶表达，并发现血清中乳酸脱氢酶（LD）同工酶的LD3和LD5的升高与胃癌的淋巴结转移和肝转移密切相关。     

碱性成纤维细胞生长因子对生长板软骨细胞增殖与分化的影响

背景：体外培养软骨细胞经历多次传代后，其增殖能力将逐渐退化。实验表明，碱性成纤维细胞生长因子可促进软骨细胞增殖，并可能影响软骨细胞的表型与分化。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对生长板软骨细胞增殖和分化的影响，并筛选其用于体外软骨细胞培养的最佳剂量。设计、时间及地点：以细胞为观察对象的观察对比实验，于2004—10／2005—02在暨南大学医学院生化教研室组织工程实验室完成。材料：选用12只新西兰白兔用于分离软骨细胞，碱性成纤维细胞生长因子由英国PeproTech公司生产。方法：分离并在低血清条件下培养兔生长板软骨细胞。根据实验需要加入0，1，2．5，5，10，25，50及100μg／L8个剂量的碱性成纤维细胞生长因子，进行各项指标观察。主要观察指标：应用改良四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖倍数；应用羟脯氨酸法测定软骨细胞胶原产量：应用酶动力学方法测定碱性磷酸酶活性。结果：①碱性成纤维细胞生长因子剂量在5～100μg／L范围内可以促进软骨细胞增殖，并以25μg／L时刺激效果最为显著。②当碱性成纤维细胞生长因子剂量高于25μg／L时，软骨细胞的胶原合成被抑制。③当碱性成纤维细胞生长因子剂量高于1ug／L时，软骨细胞的碱性磷酸酶活性被抑制。结论：碱性成纤维细胞生长因子可以刺激生长板软骨细胞增殖，并在剂量高于25μg／L时抑制生长板软骨细胞的分化。