内源性肿瘤血管形成抑制剂研究进展

肿瘤血管生成(angiogenesis)是指血管内皮细胞从现存的血管系统中分化、迁移而形成新的微血管的复杂生物学过程.成人的血管内皮细胞基本处于静止状态,在伤口愈合、组织修复、妇女生育和月经期、胎儿发育等生理刺激下出现新生血管生成,属于生理性血管生成.此时在血管生成刺激因子和抑制因子的严格控制和协调下,血管生成成为一个发生在有限时间内的有序生理过程,增生的内皮细胞很快恢复到正常的静止状态.只有当血管生成调节机制失控和血管生成过度时,血管生成才成为致病因素,导致风湿性关节炎、糖尿病性或黄斑变性视网膜病变、婴儿血管瘤和恶性肿瘤等血管生成依赖性疾病的发生和发展.内源性肿瘤血管形成抑制剂的研究将为这类疾病的治疗提供理论基础和临床治疗新药.     

人胰岛素突变体基因的融合表达

目的　以 pTXB1作为融合表达载体 ,构建人胰岛素突变体 (M insulin)的基因表达克隆 ,表达及纯化。 方法　基因合成胰岛素突变体的cDNA序列 ,酶切后装入融合表达质粒 pTXB1,基因测序正确后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,诱导表达 ,初步纯化。结果　融合蛋白的分子量约为 330 0 0 ,表达量占菌体总蛋白的 5 0 %以上。融合蛋白主要以包涵体的形式存在 ,洗涤包涵体后融合蛋白的纯度达到 85 %以上。Western blot表明表达蛋白具有胰岛素抗原活性。活性测定显示 ,每升诱导培养后的菌液表达产物中 ,具有的放射免疫活性为 0 .5U。结论　成功地构建了人胰岛素突变体的融合表达体系 ,为进一步的研究奠定了基础。     

β-淀粉样蛋白对体外培养的神经干细胞作用研究

目的：观察β-淀粉样蛋白(Aβ)对体外培养的大鼠神经干细胞的作用。方法：取E13 d的Wistar胚胎大鼠脑组织，体外进行培养、传代、鉴定后，加入β-淀粉样蛋白，利用台盼兰拒染法细胞计数及MTT法观察细胞增殖及细胞活力，利用流式细胞术观察凋亡程度，同时观察加入β-淀粉样蛋白后，分化状态神经干细胞（加入10％胎牛血清）的变化。结果：当Aβ浓度大于25μmol/L时，能明显抑制神经干细胞的增殖及活力，同时引起神经干细胞的明显凋亡。而在12.5 μmol/L时就能抑制分化状态神经干细胞突起的延伸。结论：Aβ抑制神经干细胞的增殖分化并可致神经干细胞凋亡，可能是Alzheimer’s病的发病原因之一。     

TGF-β对原代培养肝细胞及肝癌细胞BEL7401生长作用的影响

目的 研究转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）对正常大鼠肝细胞和肝肿瘤细胞的影响。方法 分离和培养原代大鼠肝细胞,培养ＢＥＬ４０１肝癌细胞,通过测定细胞ＤＮＡ合成、细胞活性（ＭＴＴ）及碱性磷酸酶活性,研究ＴＧＦ－β对正常大鼠肝细胞和肝肿瘤细胞的影响方式及可能的作用途径。结果 实验发现,ＴＧＦ－β可以刺激ＢＥＬ７４０１肝癌细胞的增生,促进其ＤＮＡ合成,并增强其活性ＳＴＧＦ－β对原代培养肝细胞ＤＮＡ合成无明显影响,对其活性有明显的抑制作用。实验还发现,ＴＧＦ－β明显刺激ＢＥＬ７４０１肝癌细胞中的碱性磷酸酶增高,同时抑制原代培养肝细胞的碱性磷酸酶活性。结论ＴＧＦ－β对正常细胞和肝癌细胞ＢＥＬ７４０１的生长有不同的影响作用,这种结果可能是通过不同的细胞信号传导途径实现的。     

血小板因子4及其相关肽段研究进展

血小板因子4(platelet factor 4,PF4)是激活的血小板释放的一种细胞因子,由于它有中和肝素、调节保护造血系统,抑制血管形成及炎症趋化等多种生物学作用[1]而日益受到重视,其作用机制仍处于研究当中[2].在对于PF4的功能和结构关系的研究中发现一系列的肽段,其位于PF4分子内部对PF4活性发挥产生不同的调节作用,并且具有区别于PF4的独特的生物学作用,引起越来越多研究者的重视,本文将就目前关于PF4结构与功能关系及其相关肽段的研究进展作一综述.     

血管生成抑制素和人血纤维蛋白溶酶原K_5环的研究进展

早在20世纪70年代初,Folkman就提出,肿瘤生长是血管依赖性的[1].肿瘤的生长有两个明显的不同阶段,即从无血管的缓慢生长阶段转变为有血管的快速增生阶段.血管生成使肿瘤能够获得足够的营养物质,是促成上述转变的关键环节,如果没有血管生成,原发肿瘤的生长不会超过1～2 mm2.同时,肿瘤侵袭转移是肿瘤治疗失败的主要原因.血管生成的调节主要依赖血管形成的刺激因子和抑制因子.例如:肿瘤中成纤维细胞生长因子(FGFs),血管内皮生长因子常为过量表达的血管生成的刺激因子.肿瘤组织可表达一种或多种血管生成刺激因子的多肽,它们能协同刺激肿瘤血管生成和促进肿瘤生长.     

地塞米松对哮喘患者单核细胞影响的研究

目的探讨地塞米松对哮喘患者单核细胞凋亡状态及其分泌细胞因子的影响作用。方法采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心及贴壁培养法对30例支气管哮喘患者和15名健康对照者单核细胞进行分离、纯化后,以空白组、地塞米松组培养24h,经琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡的发生率,同时以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中粒细胞—巨噬单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果哮喘组单核细胞自然凋亡率明显低于对照组(P<0.01),分泌TNF-α、GM-CSF较对照组明显增高(P<0.01)。地塞米松作用后,哮喘组单核细胞凋亡率明显增加(P<0.05);细胞因子分泌水平下降,两组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论地塞米松促进哮喘患者单核细胞凋亡并抑制其分泌前炎性细胞因子TNF-α、GM-CSF可能是其治疗支气管哮喘的机制之一。     

不同浓度NK4对多种肿瘤细胞侵袭能力的影响

目的研究不同浓度NK4因子对多种肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法采用基底膜侵袭实验观察不同浓度NK4因子对人结肠癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果在浓度为10μg/ml时,NK4因子对人结肠癌细胞、乳腺癌细胞、小鼠黑色素瘤细胞和人卵巢癌细胞侵袭重组基底膜的抑制率为56.4%,56.3%,56.1%和45.0%。结论NK4因子具有抑制人结肠癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞侵袭的能力。     

RGDS四肽对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响

探讨精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸(Arg-Gly-Asp-Ser RGDS)4肽诱导人结肠癌细胞SW480凋亡的作用.采用DAPI染色、DNA琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞技术分析RGDS对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响.结果表明,与对照组相比,RGDS处理细胞后,形态学观察显示DAPI染色的细胞核染色质凝聚、细胞溶解形成凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯状带(DNA ladder);流式细胞分析可见凋亡峰,凋亡率约是对照组的4.5倍.因此,RGDS具有诱导人结肠癌细胞SW480凋亡的作用.     

一种赤子爱胜蚓脱氧核糖核酸酶作用机制的研究

目的研究赤子爱胜蚓组织中脱氧核糖核酸酶1(EWD1)作用于底物的机制。方法采用ZORBAX-Oligo柱-高效液相色谱法(HPLC)、琼脂糖电泳、紫外分光光度法等分析技术,进行了蚯蚓EWD1对环状、线状DNA、单链DNA的降解中间产物和终产物的观察和分析。结果EWD1对所有形式的DNA底物均有降解作用,对单链DNA的降解产物为较均一的、<18bp的寡核苷酸,并显示EWD1无降解RNA的作用。结论蚯蚓组织中发现的EWD1能够分解多种来源的遗传物质,属于脱氧核糖核酸内切酶。