一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶酶学性质的研究

目的研究蚯蚓组织中1种新型脱氧核糖核酸酶(EWD1)的主要酶学性质。方法用SDS-PAGE凝胶电泳、质谱分析、毛细管等点聚焦电泳法和酶活性测定等方法。结果EWD1的相对分子质量约为157000。Mn2+、Ca2+是该酶的抑制剂,Mg2+对酶的活性基本上没有影响。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为5.2,等电点为6.12。以小牛胸腺DNA为底物,测得Km为1.58 mg/mL,Vmax为5.36 mg/(mL.min)。结论蚯蚓组织中发现的此种脱氧核糖核酸酶EWD1具有特殊的酶学性质,明显区别于已知的脱氧核糖核酸酶类。     

蚯蚓提取物中蛋白质含量测定方法的研究

目的寻找能够精确反映蚯蚓提取物中蛋白质含量的测定方法。方法采用改良Lowry法和考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定蚯蚓提取物蛋白质含量;分别使用2法测定标准牛血清白蛋白(BSA)水溶液在碱性蛋白酶水解前后的蛋白质含量。结果改良Lowry法的测定结果明显高于Bradford法。BSA水溶液酶解前,2法测定的蛋白质含量相当;使用改良Lowry法,BSA水溶液酶解前后的蛋白测定值相近;而使用Bradford法测定BSA水溶液蛋白质含量时,酶解后的测定值较酶解前出现大幅下降。结论在测定多肽含量多的供试品中蛋白质含量时,改良Lowry法测定更为精确。蚯蚓提取物中存在大量的多肽成分,所以对其进行蛋白质含量测定时,改良Lowry法能够更加精确、真实地反映蚯蚓提取物的蛋白质含量。     

利用基因芯片筛选大肠癌中细胞增殖相关基因

目的 用基因芯片技术筛选大肠癌中细胞增殖相关基因. 方法 利用HG-U133 Plus2.0基因芯片.对大肠癌组织和正常组织基因表达谱进行检测,并利用生物信息学方法对检测结果进行分析. 结果 ①癌组织与正常组织比较,表达差异2倍以上基因共有1 200个,其中表达上调的474个,表达下调的726个.②在1 200个基因中,共有127个基因与细胞的增殖功能相关,其中表达上调的66个,表达下调的61个. 结论 127个细胞增殖相关基因可为大肠癌的基因治疗提供靶点.     

高效液相色谱法分析转移因子多肽分布

利用高效液相色谱法对两种不同的转移因子类考物产品中多肽组份分子量的分布进行分析。应用岛津ＬＣ－６Ａ高效液相色谱第统,使用Ｃ１８反相色谱柱,对流动相、洗脱方式、洗脱时间、色谱条件进行反复试验,使用ＫＨ２ＰＯ４、１ml/min流速、２５min洗脱时间,得到委好的分离效果。方法简便,结果重现性好,适合作为生物工程产品的质控方法。     

中药复方补益剂对不同细胞生长影响的实验研究

目的观察中药复方补益剂对不同细胞生长作用的影响,为进一步研究其作用机制奠定基础。方法用含不同补益剂(四君子汤、四物汤、八珍汤、十全大补汤)的培养基分组孵育肝细胞、心肌细胞和脑细胞,然后观察细胞生长情况,并用MTT法进行检测,用SPSS软件分析。结果复方补益剂促进细胞生长作用效果显著(P<0.05);在肝细胞2周组中四物汤比四君子汤效果更好(P<0.05);四君子汤与十全大补汤对心肌细胞2周组比1周组效果更明显(P<0.05);八珍汤和十全大补汤对脑细胞1周、2周组作用均显著优于四君子汤、四物汤(P<0.05)。结论补益剂对细胞生长有显著促进作用,而且不同补益剂对细胞促生长作用有明显差异,同种补益剂对不同细胞或同种细胞的不同生长时期作用效果也不相同。     

核转录因子—κB在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究核转录因子NF－κB在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 采用快速提取法提取肝组织中细胞核蛋白,再用凝胶滞留电泳分析测定核转录因子NF－κB与其靶基因特异DNA序列的结合活性。结果 肝脏缺血再灌注时,NF－κB与其特异调节基因序列的结合活性明显升高,且有一定的时间相关性。结论 说明NF－κB与其特异调节基因序列的结合活性与肝脏缺血再灌注时肝损伤程度有直接关系。     

盐析法浓缩鱿鱼鱼油中多烯脂肪酸的研究

目的 浓缩鱼油中多烯脂肪酸。方法 盐析法。结果 皂化液于不同温度放置,可得到含ω（DHA）为20％－28％、ω（EPA）为12％－19％的浓缩鱼油。结论 皂化液放置温度越低,多烯脂肪酸中DHA、EPA含量越高,提取率越低。用本法可得到不同档次的鱼油产品,为工业生产浓缩鱼油提供依据。     

一种合成多肽——PLNG自由穿膜现象初探

目的 研究人工设计合成的多肽PLNG在不同作用环境条件下的跨膜运动现象。方法 体外培养不同组织来源的鼠细胞及CHO细胞、BEL细胞,用免疫荧光观察不同浓度、不同温度、不同反应时间条件下,PLNG的穿膜能力及PLNG对不同类型的细胞（CHO细胞、BEL细胞、成年大鼠肝细胞、幼大鼠肝细胞、成年大鼠心肌细胞、幼大鼠心肌细胞、成年大鼠神经细胞、幼大鼠神经细胞）的穿膜特性。结果 PLNG在不同作用环境条件下对细胞膜都有穿透作用,且进入细胞的量近乎相同。结论 实验观察到PLNG具有广谱的穿膜能力,这种穿膜能力在一定范围内对温度、时间及PLNG浓度不敏感;而且这种穿膜能力不受组织特异性的限制。     

STAT6在哮喘小鼠肺组织的表达及激素的影响作用

目的探讨信号转导和转录激活因子(STAT)-6在支气管哮喘发病机制中的作用及激素的影响作用。方法经腹腔注射与鼻腔滴注卵白蛋白(OVA)制作小鼠哮喘模型,并设对照组和地塞米松干预组,激发后观察各组肺组织病理学改变,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学检测肺组织STAT6mRNA和蛋白表达。结果OVA末次激发24h后,病理组织学显示哮喘组小鼠肺组织可见大量炎细胞浸润,STAT6mRNA(2.46±0.24与1.41±0.26,P<0.01)及蛋白表达水平较对照组明显增加,地塞米松治疗后,小鼠肺组织炎细胞浸润减轻,STAT6mRNA(1.80±0.36与2.46±0.24,P<0.01)及蛋白表达水平下降。结论哮喘气道中STAT6过度表达,地塞米松可通过调控STAT6表达发挥抗炎作用。     

DAPI标记的骨髓间充质干细胞体内外示踪实验研究

<正>骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是成体干细胞的一种,除参与构成造血微环境外,可分化为成骨、成软骨、脂肪、胰岛、骨骼肌、肌腱样组织等结构。在组织工程和细胞治疗方面具有广阔的应用前景。MSCs移植为糖尿病等代谢性疾病治疗带来希望,是目前研究的热点。4,6-联脒