腹腔镜活体供肾切取术的麻醉处理（附2例报告）

同种异体肾移植是目前公认的治疗终末期肾病的最佳治疗方法。由于尸体供肾的缺乏,活体供肾越来越受到重视。经腹腔路径腹腔镜活体供肾切取术具有创伤小、出血少、术后恢复快、术后疼痛轻、手术瘢痕小、符合美观要求,易被供肾者接受。     

异丙酚和依托咪酯全麻诱导对重症颅脑损伤患者脑氧代谢的影响

目的观察异丙酚和依托咪酯在全麻诱导时对重症颅脑损伤患者脑氧代谢的影响。方法30例重症颅脑损伤术前经CT诊断,GCS(glasgowcomascale)评分≤7需急诊手术患者,随机分为两组,异丙酚组15例行咪唑安定0.1mg·kg-1、芬太尼4μg·kg-1、异丙酚1mg·kg-1、维库溴铵0.1mg·kg-1快诱导,依托咪酯组15例在上述基础上由依托咪酯0.2mg·kg-1代替异丙酚,观察两组患者麻醉前(T0)、诱导后2min(T1)、插管后2min(T2)插管后10min(T3)及插管后30min(T4)收缩压、舒张压、心率以及在相应时间抽取桡动脉和颈内静脉球处血液行血气分析,根据各时间的血气分析计算颈内静脉球、桡动脉处血氧含量、脑氧摄取率。结果全麻诱导后氧供明显改善,两组患者脑氧代谢率均降低,但在插管后2min异丙酚组下降更明显(P<0.05),异丙酚组血液动力学波动明显大于依托咪酯组(P<0.05)。结论异丙酚诱导对重症颅脑损伤患者血流动力学波动明显大于依托咪酯,但与依托咪酯相比更能降低患者的脑氧摄取率,可能对重症颅脑损伤患者更为有利。     

小剂量氯胺酮对芬太尼术后静脉自控镇痛的影响

目的 观察添加小剂量氯胺酮对芬太尼术后病人静脉自控镇痛(IPCA)的影响。方法 选50例腹部手术病人随机分为2组 ,F组选芬太尼1mg加生理盐水至100ML,KF组在F组基础上添加100mg氯胺酮 ,分别给两组病人术后静脉镇痛。结果 两组病人术后静脉镇痛芬太尼用量及镇痛效果无显著差异(p>0.05) ,但KF组能明显增加病人IPCA期间睡眠时梦境及幻觉(p<0.05)。结论 添加小剂量氯胺酮只能增加芬太尼术后静脉镇痛期间梦境及幻觉发生比例 ,对镇痛效果无明显改善作用。     

Cyclin D3正、反义表达质粒在淋巴瘤细胞系Raji中的转染与鉴定

目的 :构建人类cyclinD3正义和反义真核表达质粒 ,分别转染到淋巴瘤细胞系Raji细胞中 ,为探讨cyclinD3基因对淋巴瘤细胞生物学行为的影响提供研究基础。方法 :以Raji细胞总RNA为模板 ,通过RT -PCR获取cyclinD3全长cDNA ,克隆入 pGEM -T载体 ,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3 .1中 ,构成含cyclinD3的表达质粒 pcD NA3 -cyclinD3。再运用DNA重组技术将cyclinD3基因反向克隆到pcDNA3 .1中 ,构建成cyclinD3反义表达质粒pcDNA3 -ascyclinD3。用脂质体介导的基因转染方法 ,将cyclinD3正、反义表达质粒和空质粒分别导入Raji细胞 ,经G418筛选建立稳定转染细胞株 ,用WesternBlot方法鉴定cyclinD3基因的表达。结果 :酶切鉴定和测序分析证实 ,实验成功构建了cyclinD3正、反义表达质粒。与转染cyclinD3正义表达质粒和空质粒的细胞相比 ,转染cyclinD3反义表达质粒的Raji细胞中cyclinD3表达水平下降。 结论 :正、反义cyclinD3在淋巴瘤细胞中的转染和表达 ,为进一步研究cyclinD3在淋巴瘤细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡中的作用奠定了基础     

cyclin D3与淋巴瘤细胞增殖相关性的初步研究

目的：初步探讨cyclin D3与淋巴瘤细胞增殖活性的相关性。方法：运用荧光免疫细胞化学法结合激光共聚焦显微镜观察，分析淋巴瘤细胞株Raij细胞内cyclin D3与Ki67表达、定位的关系。通过转染pDsRed-cyclin D3和pSuPER-cyclin D3 siRNA质粒，分析改变eyelin D3表达水平对肿瘤细胞增殖能力的影响。结果：在分裂增殖旺盛的Raji细胞中，Ki67与cyclin D3共定位于细胞核内。导入外源性cyclin D3引起相应细胞核Ki67的表达增加，阻断内源性cyclin D3基因表达，导致同一细胞相同部位Ki67表达水平下降。结论：cyclin D3的表达水平与NHL细胞增殖活性密切相关，提示其可能在淋巴瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。     

胰甘油三酯脂酶在大鼠两型星形胶质细胞中的表达

目的比较胰甘油三酯脂酶在1型星形胶质细胞(T1A)和2型星形胶质细胞(T2A)中的表达情况。方法取新生大鼠脑皮质,体外分离培养纯化的T1A和T2A,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR))技术检测胰甘油三酯脂酶mRNA在两型星形胶质细胞中的表达差异,并且通过激光共焦免疫荧光双标技术从蛋白水平进一步证实。结果胰甘油三酯脂酶在T1A中不表达或低表达,主要定位于细胞核中;而在T2A中表达水平较高,分布广泛,在胞浆、胞核及细胞突起中均有表达。结论胰甘油三酯脂酶在两型星形胶质细胞中的表达存在差异,胰甘油三酯脂酶在T2A中高表达,提示T2A在中枢神经系统脂代谢方面起重要的作用。     

地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ RNA 探针的制备和应用

为了制备小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶I(β-1,4-galactosyltransferase 1,β-1,4-GalT-1)地高辛标记的RNA探针以探讨β-1,4-GalT-I mRNA在坐骨神经组织的表达定位,本研究用提取的小鼠脑总RNA,采用RT-PCR方法,得到β-1,4-GalT-I的DNA片断,将其克隆到pGEM-T载体;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度;最后应用该探针,通过原位杂交的方法,分析β-1,4-GalT-I mRNA在小鼠坐骨神经的表达.结果:构建了β-1,4-GalT-I/pGEM-T质粒,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针,应用该探针发现β-1,4-GalT-J在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达.以上结果表明,制备的地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-GalT-1 mRNA在组织中的表达.本研究为进一步分析β-1,4-GalT-I在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础.     

神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体在大鼠周围神经损伤后的表达变化

目的:探讨周围神经损伤后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(carboxy temlinal PDZ ligand of neuronal nitric oxide synthase,CAPON)的表达变化与定位。方法:利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,FQPCR)、原位杂交与间接免疫荧光相结合的方法,研究大鼠坐骨神经损伤后CAPON mRNA表达变化及其定位。结果:CAPON mRNA主要分布在正常和损伤坐骨神经的雪旺细胞(Schwann cells,SCs)中,损伤后表达增多,分别在神经夹伤后2周以及切断后1周的近、远侧断端中出现表达高峰。原代培养的SCs中也检测到CAPON的表达,其mRNA分布在核周胞质区域。结论:周围神经损伤后引起CAPON mRNA表达上调,增殖的SCs中表达CA- PON可能对神经损伤后冉生修复发挥一定作用。     

正、反义β-1,4半乳糖基转移酶Ⅱ和Ⅴ地高辛标记RNA探针的制备和应用

目的　为了探讨 β1 ,4半乳糖基转移酶 Ⅱ和Ⅴ (β1 ,4 galactosyltransferaseI,β 1 ,4 GalT ⅡandⅤ )表达定位 ,本实验通过分子生物学手段 ,制备正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针。 方法　设计引物 ,提取小鼠脑总RNA ,通过RT PCR方法 ,得到 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ基因序列 ,将其克隆到pGEM T载体。根据其多克隆酶切位点和Sp6及T7位置 ,分别酶切后作为转录模板 ,通过Sp6及T7RNA聚合酶 ,得到正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后 ,最后通过原位杂交分析标记探针的特异性和杂交效果。结果　本实验得到了高效价的正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针 ,并表现出很好的杂交效果。结论　正、反义β 1 ,4 GalT Ⅱ和ⅤRNA原位杂交探针的制备 ,为进一步研究 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ在组织中的表达 ,尤其在神经组织的定位奠定基础