微柱层析检测高分子碱性磷酸酶

本文采用自制小柱Sephacryl S-300凝胶过滤法把血清碱性磷酸酶分为高分子和低分子两个部份,并建立了定量高分子碱性磷酸酶的检测方法。对高分子碱性磷酸酶分离的最适条件、电泳及层析特性、分子量、米氏常数等方面进行了研究。该法检测临床标本发现高分子碱性磷酸酶主要存在于阻塞性黄疸的血清中,该项试验对部份肝病的诊断与鉴别诊断具有较大临床价值。     

肝癌γ—谷氨酰移换酶的研究进展

自从Orlowski 等应用淀粉胶电泳发现原发性肝癌患者血清中存在着肝癌特异性γ-谷氨酰移换酶(GGT,EC2.3.2.2)及Fiala 等首先提出GGT 作为肝癌的重要标志物后,引起了临床研究的极大兴趣.多位学者业已证明:在肝细胞癌的酶学诊断中,以糖蛋白GGT 肝癌特异区带(I',Ⅱ和Ⅱ')的出现最有临     

诱癌过程中鼠肝组织一氧化氮合酶的表达与改变

目的：研究ＮＯ合酶在肝癌发生过程中的表达与改变。方法：以化学致癌剂２－ＦＡＡ喂饲ＳＤ大鼠，对鼠肝细胞在癌变过程中的组织学改变、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的表达和动态变化进行了研究。结果：当肝细胞轻度损伤时，肝组织中ＮＯＳ活性与对照组相比明显下降；当肝细胞表现为癌前病变和肝细胞完全癌变时，肝组织中ＮＯＳ的合成增加其比活性仍低于正常对照鼠；肝组织中ＮＯＳ与ＮＯ水平呈明显正相关（ｒ＝０５７，Ｐ＜００１），而与总ＲＮＡ浓度无相关性。结论：研究资料提示ＮＯＳ在诱癌早期的表达处于抑制状态以对肝细胞起保护作用；而肝癌形成阶段，ＮＯＳ加速表达以杀伤肿瘤细胞     

肝癌组织及外周血端粒酶表达对肝癌的诊断和鉴别价值

目的　探讨肝癌组织端粒酶表达及外周血端粒酶分析对肝癌的诊断价值。方法　从人肝癌的癌灶和癌周组织制备总RNA ,肝组织及外周血单核细胞端粒酶活性 ,采用端粒重复扩增法 酶联免疫吸附试验分析 ,并观察了外周血中端粒酶活性对肝癌的诊断与鉴别诊断价值。结果　肝癌组织中端粒酶活性表达明显高于它的癌周组织 ,而总RNA则是癌周组织明显高于癌灶 ;在外周血单核细胞中 ,未经治疗的肝癌组端粒酶活性明显高于肝硬化组、慢性肝炎组及正常对照组 (P <0 0 1) ,经过TAE治疗后肝癌病人端粒酶活性明显下降 (P <0 0 1) ;外周血AFP浓度与单核细胞端粒酶活性联合分析 ,对肝癌具有互补诊断价值。结论　肝癌发生过程中端粒酶表达异常 ,分析外周血中端粒酶活性有助于肝癌的诊断及预后观察     

肝癌特异性GGT的发生及其定量分析的临床价值

目的探讨肝癌特异性ＧＧＴ的动态变化及其定量分析的临床价值。方法以化学致癌剂２－ＦＡＡ（００５％）制备鼠肝癌模型，观察肝癌ＧＧＴ的产生及其肝组织内分布，并对不同肝病患者血清肝癌特异性ＧＧＴ区带（ＨＳＢ）进行定量分析研究。结果在实验性鼠的诱癌过程中，鼠肝脏癌变组织中ＧＧＴ大量表达，出现早并具有胎肝ＧＧＴ的特点；人血清中ＨＳＢ的定量检测发现：肝癌组明显高于其他肝病组，肝外肿瘤及正常对照组（Ｐ＜０００１）；ＨＳＢ在小肝癌中的阳性率为７５％，在ＡＦＰ阴性肝癌中为７８３％。结论研究资料提示ＨＳＢ的定量检测其临床价值优于ＨＳＢ的定性分析，且有助于小肝癌和ＡＦＰ阴性肝癌的早期诊断。     

癌胚型GPC-3特异诊断原发性肝细胞癌及其靶向治疗进展

原发性肝细胞性肝癌(primary hepatocellular cancer,PHC)的发生、发展是一个多因素、多步骤、多中心的复杂过程,他的早期诊断和有效治疗至关重要.磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC-3)在PHC进展过程中起重要作用.在肝细胞恶性转化过程中G P C-3呈进行性升高表达;人肝癌G P C-3阳性率与乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,Hbs Ag)、TNM分期、门脉癌栓及肝外转移显著相关.GPC-3及m RNA与甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)联合检测,对PHC诊断阳性率可提高至94.3%;沉默GPC-3可改变肝癌细胞迁移、转移和侵袭的生物学行为,伴随β-catenin、p-糖原合成激酶3β(pglycogen synthase kinase 3β,p-GSK3β)和cyclin D1表达明显减少,提示癌胚性GPC-3不仅是PHC特异诊断标志物,而且有可能成为PHC治疗的潜在靶点.     

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3异常表达与肝细胞癌变相关

肝细胞癌(HCC)预后极差,延长患者生存期的关键是早期(小肝癌)诊断和早期(手术)治疗.HCC通过肝癌标记和影像检查建立诊断.甲胎蛋白(AFP)是主要肝癌标记,但有假阳性和假阴性;AFP异质体(AFP.L3)、AFP基因标志(AFP-mRNA)以及GGT-Ⅱ、PIVKA Ⅱ、AFU等其它肝癌标记可与AFP互补诊断,尤其对AFP假阴性肝癌和小肝癌的诊断甚有帮助.磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)在细胞的生长发育中起重要的调控作用,与肝癌密切相关.本文就GPC-3分子构成、表达机制、与多种信号传导途径关系及对肝癌早期诊断价值等作一综述.     

下调GPC-3转录经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌生长的抑制作用

目的研究干预磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3, GPC-3)活化经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的抑制作用。方法将miRNA干扰质粒转染GPC-3高表达的HepG2和Hep3B细胞,以CCK-8法检测细胞增殖,平板法分析克隆形成,以流式细胞术分析细胞周期;以裸鼠移植瘤模型观察成瘤时间、体积、生长曲线;以免疫组化法和免疫印迹法分析GPC-3及Wnt/β-catenin通路关键分子β-catenin、p-GSK3β及Cyclin D1的变化。结果特异性miRNA成功转染HepG2和Hep3B细胞后,体外研究显示HCC细胞增殖受到抑制、克隆形成明显降低和发生G_1期阻滞,差异有显著统计学意义(P0.01),β-catenin及p-GSK3β显著降低(P0.01);体内研究显示,移植瘤成瘤时间延长(t=12.89,P0.01)、瘤体小(t=15.29,P0.01);瘤内GPC-3表达明显下降(t=6.67,P0.01)、相关信号分子β-catenin(t=9.61,P0.01)、p-GSK3β(t=4.81,P0.01)及Cyclin D1(t=5.90,P0.01)表达均显著下调。结论干预GPC-3活化经Wnt/β-catenin通路抑制HCC细胞增殖和生长,提示GPC-3为HCC治疗的潜在靶目标。