用高效液相色谱技术产前快速诊断β-地中海贫血

目的探讨应用高效液相色谱技术(HPLC)在孕中期快速产前诊断β-地中海贫血(β-地贫)的可行性。方法夫妇双方均为β-地贫基因携带者的孕妇73例,在妊娠19~31w通过经母腹脐静脉穿刺的方法抽取胎血。胎血血红蛋白(Hb)各组分比例的测定采用HPLC,胎血β-地贫基因的检测采用PCR-反向点杂交的方法。结果HPLC检出18例胎血只有HbF而无HbA,PCR-RDB证实此18例胎儿基因型均为β-地贫基因突变纯合子或双重杂合子。剩余55例胎血都有不等量的HbA,其中4例HbA值为0.5%~0.7%,均为带有-28基因突变的双重杂合子;51例HbA值范围1.4%~10.4%,其中30例为β-地贫基因突变杂合子,21例基因型正常。结论对于重型β-地贫,用HPLC测定胎血HbA值和胎儿基因型分析进行产前诊断有很好的相符性。HPLC用在孕中期可以作为产前快速诊断重型β-地贫的一种方法。     

靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备具有靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,并对其进行表征,再进一步考察其体外抗肿瘤活性.方法 合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯并用红外光谱和质谱进行表征,采用薄膜分散法制备靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,用透射电镜、激光粒度仪、高速离心法分别测定脂质体的形状、粒径、电位、包封率,MTT法考察脂质体对肿瘤细胞的抑制作用.结果 经红外光谱及质谱分析证实,成功合成了靶向材料叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯;制备的靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体在透射电镜视野中粒径大小均一,约160 nm,Zeta电位约4.0 mV,包封率达90%以上;体外细胞毒性显示,叶酸修饰的蟾酥提取物长循环脂质体的IC50值为0.46μg/mL,普通长循环脂质体的IC50值为0.76μg/mL.结论 成功合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯靶向材料并构建了靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,可靶向性抑制肿瘤细胞生长.     

对比分析传统术式与经阴道网片盆底重建术治疗老年重度盆底器官脱垂的临床效果

目的：对应用传统术式与经阴道网片盆底重建术两种方式对患有重度盆底器官脱垂疾病的老年患者实施治疗的临床效果进行对比研究。方法选择重度盆底器官脱垂疾病的老年患者88例,随机分为对照组和治疗组,每组44例。采用传统术式对对照组患者实施治疗;采用经阴道网片盆底重建术对治疗组患者实施治疗,比较2组治疗效果。结果治疗组患者盆底器官脱垂手术操作时间、术后下床活动时间、术后住院接受治疗总时间明显短于对照组;老年重度盆底器官脱垂疾病的手术治疗效果明显优于对照组;在围手术期内出现的不良反应明显少于对照组。结论应用经阴道网片盆底重建术对患有重度盆底器官脱垂疾病的老年患者实施治疗的临床效果非常明显。     

应用微阵列比较基因组杂交技术产前诊断DiGeorge综合征一例

胎儿孕25+周,B超提示宫内生长发育受限,心脏室间隔缺损(图1),主动脉转位,合并羊水过多.父母非近亲结婚,孕期无不良因素接触史,无家族病史.     

胎儿颈项透明层厚度在早孕期筛查胎儿畸形的研究进展

孕11-13＋6周胎儿颈项透明层（NT）厚度已经成为早孕期筛查唐氏综合征的重要指标。NT增厚除了与染色体病密切相关外,还与先天性心脏病、胎儿畸形、贫血、感染等因素相关。但是,仍有相当一部分NT增厚的胎儿,出生后是完全正常的。因此,如何对胎儿NT增厚的孕妇进行产前诊断？如何对NT增厚但染色体核型正常的产前病例进行产科处理？NT一旦增厚是否不需要进行唐氏筛查而直接进行产前诊断？这些问题都是目前临床亟待解决的主要问题[1]。本文对国内外相关的文献进行综述,旨在从NT增厚的原因、病理基础、产科处理及妊娠结局等多个角度对NT增厚的产前咨询策略作一探讨,以期为NT测量的临床应用提供科学的理论依据。     

早孕期唐氏综合征联合筛查高风险对象的妊娠结局分析

目的对2008-2009年我院早孕期唐氏联合筛查的妊娠对象出生后妊娠结局进行回顾性随访。方法 2008-2009年,我院完成单胎妊娠早孕期唐氏联合筛查共计5218例。对所有病例全部进行随访,随访方式主要以病案追踪及电话随访为主。随访内容主要包括胎儿宫内发育情况及新生儿出生后健康状况。采用切割值1/250,对阳性筛查对象与阴性筛查对象的妊娠结局进行比较分析。结果 5218例筛查对象中,151例(2.9%)孕妇筛查阳性,127例(84.1%)成功随访。127例阳性筛查对象与3700例阴性筛查对象进行比较,阳性对象存在显著的不良妊娠结局高风险(不良妊娠结局16.5%vs 1.6%,P<0.001;染色体异常8.7%vs 0.1%,P<0.001;结构畸形6.3%vs 0.9%,P<0.001;较早期自然流产1.6%vs 0.1%,P<0.001)。结论筛查阳性妊娠对象,除了存在胎儿染色体异常高风险外,胎儿结构畸形和自然流产的风险亦较高。     

抑制素A在妊娠中期唐氏综合征筛查中的价值

目的 建立广东地区正常妊娠人群血清抑制素A在妊娠15～20+6周的参考值范围,评估抑制素A在四联唐氏综合征筛查中的价值. 方法 选择2008年3月至2010年12月在广州市妇女儿童医疗中心接受妊娠中期三联唐氏综合征筛查的单胎妊娠孕妇2802例.采用酶联免疫化学发光分析法检测孕妇血清中抑制素A水平,将检测值转换为中位数的倍数(multiples of the median, MoM),并根据母亲体重和孕周进行校正.采用SURUSS相关参数重新计算风险值并统计不同切割值水平的筛查效果.通过受试者工作特性曲线及曲线下面积评估单项和各标志物组合的筛查效果.结果 (1)正常单胎孕妇(对照组,2790例)妊娠15～20+6周时各孕周血清抑制素A浓度的中位数分别为286.60、267.10、249.10、243.40、242.30和256.60 pg/ml,各孕周浓度相对稳定.12例胎儿为唐氏综合征的孕妇血清中抑制素A的MoM值及平均浓度均显著高于对照组[MoM值:2.82与1;平均浓度:(852.83±370.04)pg/ml与(293.28±149.46)pg/ml,差异有统计学意义(t=5.37,P＜0.05)].(2)假阳性率为5.8％时,游离人绒毛膜促性腺激素-β、甲胎蛋白、未结合雌三醇和抑制素A组成的四联唐氏综合征筛查检出率为83.3％(10/12);当检出率为83.3％时,妊娠中期四联唐氏综合征筛查的假阳性率(5.8％)较游离人绒毛膜促性腺激素-β、甲胎蛋白和未结合雌三醇组成的三联唐氏综合征筛查(7.7％)降低了1.9％.受试者工作特性曲线上,假阳性率为5.0％时,抑制素A、甲胎蛋白、游离人绒毛膜促性腺激素-β和未结合雌三醇的曲线下面积分别为63.7％、20.5％、46.1％和4.8％;传统三联和四联唐氏综合征筛查的曲线下相对面积分别为45.5％和63.1％. 结论 建立了广东地区正常妊娠人群血清抑制素A在妊娠15～20+6周的参考值范围.证实抑制素A是最佳的妊娠中期血清筛查标志物,可结合现有标志物——游离人绒毛膜促性腺激素-β、甲胎蛋白和末结合雌三醇,用于我国人群妊娠中期唐氏综合征的筛查.     

541例妇女人乳头状瘤病毒多重感染检测结果分析

目的:了解广州市妇女生殖道人乳头状瘤病毒多重感染状况和基因亚型分布.方法:采用核酸分子快速导流杂交基因芯片分型技术(HybriMax)对广州地区6 936例女性进行人乳头状瘤病毒多重感染检测,并对HPVDNA亚型、多重感染率和年龄分布进行分析.结果:6936例女性共检出HPV多重感染患者541例,多重阳性率为7.80%.高危混合型、高低危混合型和低危混合型分别是55.45%、41.59%、2.96%.多重阳性感染者中,双重感染最多,为399例,占73.75%.21个亚型中共有20个亚型被检出.在各年龄组中,≤20岁女性多重阳性感染率最高,为22.73%,各年龄组HPv感染差异有统计学意义(x2=65.136,P=0.000<0.05).结论:广州地区女性HPV的多重感染率较低,但以高危混合型为主;用HybriMax法对HPVDNA进行多重感染的检测和分型,对宫颈病变的防治具有重要意义.     

脐带血重建造血潜能的母体及新生儿因素分析

脐带血作为一种备选的移植用造血干细胞,能否成功植入与输入受者体内的总有核细胞（total nucleated cells,TNC）数、CD34＋细胞数及粒-巨噬细胞集落形成单位（colony-forming unit-granulocyte-macrophage,CFU-GM）有关。本研究探讨影响脐带血造血潜能的母体及新生儿因素。按照广州脐血库标准化操作常规（SOP）,对脐带血样本进行筛选、处理、检测及冷冻,回顾性分析已保存的4615份脐带血样本的造血细胞参数及其与母体及新生儿特征的相关性。结果表明：脐带血采集量（Mean±SD：95.23±22.42ml;Median：91.85ml）与处理前TNC[Mean±SD：（1.34±0.49）×109;Median：1.25×109]及处理后TNC[Mean±SD：（1.21±0.42）×109;Median：1.14×109]、CD34＋细胞数[Mean±SD：（5.14±4.55）×106;Median：4.08×106]、CFU-GM[Mean±SD：（9.72±8.66）×105;Median：7.53×105]三者均显著相关（p〈0.001）。在供者因素中,只有婴儿出生体重与脐带血采集量及造血细胞参数均呈显著正相关（p〈0.001）,较大婴儿的脐带血在采集量、TNC、CD34＋细胞数及CFU-GM方面均呈现优势（p〈0.001）。母亲年龄与上述各项参数均无显著相关。孕龄与处理前/后TNC正相关（p〈0.001;p〈0.001）,与CD34＋细胞数呈负相关（p=0.04）,而与采集量及CFU-GM均无显著相关。剖宫产时采集的脐带血量虽然高于阴道分娩（Mean±SD：97.05ml±22.23mlvs.92.53ml±22.43ml;Median：94.08mlvs.88.82ml;p〈0.001）,但各细胞参数均低于阴道分娩（p〈0.001）。男婴脐带血的采集量和CD34＋细胞数高于女婴（Mean±SD：96.41ml±22.31mlvs.93.95ml±22.47ml;Median：93.27mlvs.90.14ml;p〈0.001）;[Mean±SD：（5.28±5.04）×106vs.（5.00±3.94）×106;Median：4.18×106vs.3.94×106;p=0.042]、但处理前TNC及处理后TNC均低于女婴[Mean±SD：（1.31±0.50）×109vs.（1.37±0.47）×109;Median：1.22×109vs.1.28×109;p〈0.001];[Mean±SD：（1.18±0.42）×109vs.（1.24±0.41）×109;Median：1.10×109vs.1.17×109;p〈0.001],二者CFU-GM的差异无统计学意义。结论：本研究数据有助于优化脐带血供者筛选及提高脐血库资源利用率。脐血库应侧重选择体重较大、阴道分娩的新生儿供者,优先处理采集量大、TNC高的脐带血样本。     

供者特征对脐带血造血功能的影响

目的 分析可能影响脐带血造血功能的供者特征.方法 对广州脐带血库1998年6月至2008年12月保存的4 358份脐带血的供者特征(包括母亲年龄、分娩方式、妊娠期、婴儿体重、婴儿性别)和脐带血采集量及造血功能的指标(包括总有核细胞数、CD34+细胞、干细胞集落等)进行相关性分析.结果 婴儿体重、分娩方式及婴儿性别是影响脐带血采集量、总有核细胞数、CD34+细胞数、CFUs及CFU-GM的主要因素.随着婴儿体重的增加,脐带血采集量、总有核细胞数、CD34+细胞数、CFUs、CFU-GM均呈上升趋势(P=0.000).阴道分娩时脐带血的采集量虽然低于刮宫产(P=0.000),但总有核细胞数、CD34+细胞数、CFUs,CFU-GM均高于剖宫产(P=0.000).女婴脐带血中总有核细胞数含量高于男婴(P=0.000),但脐带血采集量(P=0.000)、CD34+细胞数(P=0.002)均低于男婴.随着妊娠期的延长,脐带血中总有核细胞数增加(P=0.000),但CD34+细胞数减少(P=0.001).结论 某些脐带血供者特征对脐带血造血功能指标有积极影响.