脐血干细胞库的建立及其临床应用

目的建立无关供者脐血干细胞库,用于治疗骨髓衰竭、恶性及非恶性血液病、某些遗传病、重型免疫缺陷等疾病的干细胞移植.方法采集足月顺产或剖宫产的新生儿脐血,以羟乙基淀粉分离红细胞,DMSO/LMD冷冻保存.每份脐血常规检测细胞活率、有核细胞计数、祖细胞体外培养、CD34+细胞检测、HLA配型及病原学检测等.结果共采集2318份脐血,合格1240份,合格率为53.5%,合格脐血采集的平均体积(98.3±27.0)ml,分离后脐血有核细胞为(1.2±0.5)×109,回收率为(88.90±9.65)%.脐血细胞存活率为(97.00±2.61)%.CFU-GM数为(5.18±14.35)×105,BFU-E数为(10.35±11.55)×105,CFU-Mix数为(1.03±1.47)×105.脐血分离后CD34+细胞百分率为(0.5±0.32)%,细菌培养阳性4例,4例脐血CMV-IgM阳性.在广州脐血库的172例脐血移植登记患者中,HLA匹配4个位点以上的占91.12%.至2000年5月共提供9份应用于无关供者脐血移植,其中6例植入,植入成功率66.7%.结论脐血库的建立可使脐血能够较好地应用于造血干细胞移植治疗,建立脐血库有良好的应用前景.     

脐血库建立中脐血筛选标准的制定及意义

目的探讨脐血筛选标准的制定及在脐血库建立中的意义.方法按脐血采集量、总有核细胞数、细胞活率、病原学感染、有无凝块等作标准进行脐血采集筛选,分析筛选后库存脐血的质量.结果1998年6月至1999年12月共采脐血1625例,合格899例,占55.3%.其中879例分离冻存,占54.1%;不合格726例,占44.7%,不合格原因主要为脐血采集量少、有凝块、细胞活率低、超时送检、总有核细胞数低等.879例库存脐血总有核细胞数平均为1.236×109,平均有效移植体重为33.4kg,88.9%的库存脐血能满足体重为20kg以上的患者移植.脐血细菌培养共检出4例阳性,巨细胞病毒抗体3例阳性,人类免疫缺陷病毒抗体(HIV-1/2Ab)、EB病毒抗体(EBV-IgA)、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)均为阴性.9例脐血移植中6例获得植入.结论脐血筛选标准的制定可节省建库费用,提高库存脐血质量,使库存脐血均符合临床移植要求,在脐血库的建立中起着重要作用.     

116例脐血PCR-SSP和PCR-SSOP的HLA-DR分型结果分析

脐血中富含造血干细胞。造血干细胞移植是治疗多种危重病患者的有效手段。移植前的ＨＬＡ分型是决定其移植成功的重要环节之一。器官移植供受者间ＨＬＡ ＤＲ不相容可引起急性移植物抗宿主反应 (ＧＶＨＤ)。因此 ,脐血移植中需有精确的ＨＬＡ ＤＲ基因分型。本研究从 1999年 1月至 7月对脐血库的 116例标本分别用ＰＣＲ ＳＳＰ和ＰＣＲ ＳＳＯＰ法检测 ,分析结果如下。材料和方法标本来源 :116例标本来自本院脐血库中的脐血标本。标本的ＤＮＡ提取 :脐血标本为ＡＣＤ Ｂ抗凝血 ,取 2 0 0 μｌ作盐酸胍法抽提ＤＮＡ〔1〕。ＰＣＲ ＳＳＰ方法 …     

采用二甲基亚砜和右旋糖酐冻存脐血造血细胞的研究

脐血移植已被广泛地用于治疗各种血液性疾病和恶性肿瘤 ,临床上主要采用同胞脐血移植和无关供者脐血移植两种形式[1] 。前者往往直接将整份脐血冻存 ,后者供者来源于脐血库 ,多为经羟乙基淀粉 (ＨＥＳ)分离后的有核细胞(ＮＣ) [2 ] 。对于保存方法 ,单用一种冷冻保护剂即使加大剂量也不会增加冷冻效果 ,反而加大毒性[3 ] 。我们采用合用两种冷冻保护剂冻存整份脐血和分离后有核细胞 ,以探讨理想的冻存方法来建立脐血库和保存同胞脐血。材料和方法选取足月健康新生儿采集脐血。冷冻保护剂甲为 2 0 %二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ ,美国Ｓｉｇｍａ公司…     

早孕期颈项透明层增厚胎儿染色体异常的临床研究

目的探讨早孕期颈项透明层(NT)增厚胎儿染色体异常的发生情况。 方法选择2016年1月至2019年1月，于广州市妇女儿童医疗中心进行早孕期胎儿NT检查时，发现NT增厚(NT值≥3.0 mm)的1 261例胎儿为研究对象。回顾性分析其临床病例资料。根据胎儿超声诊断结果，将其分为单纯组(n＝1 017，单纯NT增厚胎儿)和合并组(n＝244，NT增厚合并其他结构畸形胎儿)。其中，1 164例胎儿接受介入性产前诊断，以明确胎儿染色体病发生情况，按照其分属的单纯组与合并组，将其分别纳入单纯亚组(n＝965)与合并亚组(n＝199)。对单纯亚组及合并亚组胎儿染色体病发生率，以及这2个亚组胎儿不同NT值范围的染色体病发生率，采用χ²检验进行统计学比较。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》。 结果①合并组244例胎儿中，合并的其他结构畸形前3位依次为：囊性淋巴管瘤45例(18.4%)、心脏发育畸形44例(18.0%)及脐膨出23例(9.4%)。②接受介入性产前诊断的合并亚组胎儿染色体病发生率为52.8%(105/199)，显著高于单纯亚组的16.9%(163/965)，并且差异有统计学意义(χ²＝123.900，P<0.001)。③接受介入性产前诊断的合并亚组胎儿，NT值范围分别为3.0～3.9 mm、4.0～4.9 mm、5.0～5.9 mm、≥6.0 mm的染色体病发生率分别为34.8%、60.9%、56.3%、67.3%，均分别高于单纯亚组胎儿的10.8%、20.9%、31.4%、42.9%，并且差异均有统计学意义(χ²＝31.400、P<0.001, χ²＝29.453、P<0.001，χ²＝5.676、P＝0.028，χ²＝6.854、P＝0.014)。 结论早孕期NT增厚合并其他结构畸形胎儿，或者NT值≥6.0 mm胎儿，其发生染色体病的风险均较大。早孕期发现胎儿NT增厚时，应进行胎儿心脏结构筛查。     

QF-PCR快速产前诊断染色体非整倍体应用研究

本文归纳了QF-PCR在产前快速诊断染色体非整倍体方面应用的准确性、可行性;指出了此方法在产前诊断中应用的优越性及局限性;讨论了此方法是否能够取代传统的核型分析;在此基础上,提出了QF-PCR在产前诊断方面的应用策略,并对其在我国的应用前景进行了展望。     

广州脐血库3 605脐血供者6个月后随访

本研究回顾分析了脐血库对库存3605份脐血所进行的脐血供者6个月后的随访情况,探讨供者随访制度在脐血库运作过程中的作用。1998年6月至2004年2月间,通过电话、信函方式对捐献脐血满6个月的母亲进行了母婴健康调查随访,对脐血的质量作出了评估结果表明：有3195人接受了电话随访,18人婉拒、对于无法通过电话随访的,则采用信函调查形式．共发信392封,回信15封。电话随访每例平均耗时12分钟随访资料显示婴儿染色体异常2例、先天性甲状腺功能低下1例、粒细胞减少症1例、白化病1例、不明原因死亡5例。所有这些被查明为非正常婴儿供者的脐血均被废弃,总之：脐血库进行脐血供者6个月后的随访工作．能有效地提高库存脐血的质量。     

酶联免疫法检测孕妇及胎儿脐血TORCH在产前诊断应用

目的 通过应用酶联免疫法对13300例孕8－34周的孕妇血清进行风疹、巨细胞病毒及弓形虫IgM检测。经两次确疹为阳性者于孕24周后抽胎儿脐血及出生后留新生儿脐血检查对应病原体IgM以及追踪婴儿生长发育情况至1^ 岁。从而分析妊娠感染致畸因子其预后情况，提示13300例受检孕妇风疹IgM( )191例占1.44%，其中175例接受产前诊断；胎血风疹IgM( )11例占6.28%；孕妇巨细胞IgM( )306例占2.3%，其中262例接受产前诊断查出胎血细胞IgM（＋）5例占1.9%；孕妇弓形虫IgM（＋）146例占1.1%，其中12 3 例产前诊断查出胎血弓形虫IgM（＋）6例占4.9%。     

胎儿血生理指标检测及在产前诊断的研究

目的了解胎儿血液常规指标参考范围及其在各孕周变化规律,为胎儿宫内疾病诊断提供线索.方法应用全自动血液分析仪对135例孕18～39w(并经随访正常)胎儿脐血进行白细胞总数(WBC)及中性粒细胞分类(NEU%)、淋巴细胞分类(LYM%)、单核细胞分类(MONO%)、嗜酸性白细胞分类(EOS%)、嗜硷性白细胞分类(BASO%)和红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、血球压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、血小板(PLT)等检测.结果胎儿血各生理指标多与出生后水平显著差异[1],其中WBC、NEU%、MONO%、HGB、HCT、数值在各孕周有显著差异,随孕周增加而升高;LYM%、MCV数值在各孕周显著差异为随孕周增加而下降;HGB、EOS%也随孕周增加上升,但幅度不显著;BASO%、PLT再各孕周变化不大.结论胎儿血常规指标随孕周变化,在诊断胎儿贫血、出血、炎症有重要参考价值.