血清IgE水平检测及变应原皮试诊断Ⅰ型变态反应病的意义

目的 检测变态反应病患者血清IgE的水平及变应原皮试并分析其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附分析法检测了150例正常人与223例变态反应病患者血清IgE水平。结果 结果表明：（1）正常人血清IgE水平随年龄增长而下降（P＜0．01）,（2）各年龄组（小于等于20岁,21－40岁和大于等于40岁）变态反应病患者血清IgE水平均高于对照组;（3）吸入性变态反应病患者血清IgE水平明显高于同年龄正常对照组（P＜0．01）,与皮试结果有高度一致性,结论 血清IgE水平测定对变态反应病的诊断具有重要意义,与皮试联合应用,结合临床综合分析更有价值。     

慢性肝炎并发肝性糖尿病25例临床分析

0　引言　肝脏对调节机体糖代谢起着重要的作用 ,肝脏功能异常可引起糖代谢的障碍 ,严重者可引起糖尿病 .现将我院近年来收治的 2 5例慢性肝病并糖尿病患者分析报告如下 .1　临床资料1.1　病例　 2 5例患者诊断为糖尿病前均有慢性病毒性肝炎病史 ,男 2 0例 ,女 5例 ;年龄 2 2～ 70岁 ,糖尿病按 WHO1985年诊断标准 ,既往无糖尿病史及糖尿病家族史 ,诊断糖尿病前有慢性病毒性肝炎病史 .病毒性肝炎按 1995年 (北京 )第 5次全国传染病学学术会议修订的病毒性肝炎的诊断标准 .收稿日期 :2 0 0 0 -0 3 -2 0 ;　修回日期 :2 0 0 0 -0 5 -10作者简…     

59例老年人肺结核临床特点分析

目的 探讨老年人肺结核病的临床特点,方法 回顾性分析了５９例６０岁以上老年肺结核的临床表现、肺Ｘ线特征、诊断及效果。结果 ①５９例患以肺结核诊断入院２１例（３５．６％）,其他疾病（非结核病）入院３８例（６４．４％）,其中１４例为复发性肺结核;②５４例（９１．５％）合并有不同脏器疾病;③４４例经抗结核治疗后治愈或好转,总有效率为７４．６％;④死亡７例（１３．４％）,其中因确诊晚未及治疗的３例,     

肺癌患者血清sIL－2R和TNF－α的检测及其临床意义

分析了７３例原发性肺癌患者治疗前后（手术切除１６例，放疗２８例，化疗２９例）血清ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α的变化。结果表明：（１）ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），肿瘤越晚期升高越明显（Ｐ＜０．００１）；（２）治疗后ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α都明显下降（Ｐ＜０．０１）．但各治疗组下降程度不同，放、化疗组比手术切除组下降更显著；（３）ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α在肺癌病人呈正相关（ｒ＝０．３４），机理不明。结果提示，血清ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α可作为肺癌患者免疫功能的监测指标之一，并可作为疗效判断的参考。     

双位点核酶对2.2.15细胞中HBV基因表达抑制作用

目的:观察针对HBVC区双位点核酶在细胞内阻断C区基因表达的作用。方法:采用亚克隆技术,从pGEM-Rz123(含针对HBVC区双位点核酶)上切下双位点核酶的片段,定向克隆于真核表达载体pBBS212中。利用lipofectamine介导,将重组质粒pBBS212-Rz及pBBS212转染2.2.15细胞中,采用打点杂交技术观察核酶的表达,采用ELISA、免疫荧光、免疫组化、图象分析法、Westernblot分析HBe/HBcAg及HBsAg的表达。结果:转染的2.2.15细胞经潮霉素B和G418筛选2周后,打点杂交证实可表达针对HBVC区双位点核酶。ELISA方法检测发现核酶抑制HBeAg表达48.6%,用免疫荧光、免疫组化、图象分析法、Westernblot分析证实核酶可抑制HBV细胞内表达。结论:该双位点核酶通过针对HBVC区基因的剪切作用,阻断C区基因表达,抑制了HBe/HBcAg的表达。     

慢性乙型肝炎患者T细胞亚群,mIL-2R,sIL-2R,IL-6,IL-8,TNF-α变化及意义

目的探讨病毒性肝炎(乙肝)患者T细胞亚群,mIL-2R,sIL-2R,IL-6,IL-8,TNF-α与乙肝发病机制的关系.方法采用APAAP技术和ELISA法检测92例慢性乙型肝炎患者T细胞亚群,mIL-2R和血清sIL-2R,IL-6,IL-8,TNF-α水平.结果慢性乙型肝炎患者CD4+细胞数较正常低(P＜0.05),对照组和实验组(慢性乙肝轻度、慢性乙肝中重度、肝炎后肝硬变、重症肝炎)的CD4+数值分别为:(45.6±3.6)%,(39.7±10.2)%,(40.6±11.0)%,(39.0±6.5)%,(31.2±8.9)%.CD9+细胞数显著上升(P＜0.05或P＜0.01),对照组和实验各组依次为:(28.7±3.2)%,(35.4±9.5)%,(38.7±7.6)%,(42.2±9.4)%,以致CD4+/CD8+比值下降;mIL-2R显著低于正常对照组(P＜0.05),在PHA激活后与正常接近,但均较PHA激活前显著增高(P＜0.01);PHA激活前的mIL-2R对照组与实验组分别为:(15.69±4.32)%,(3.98±5.36)%,(9.37±5.48)%,(9.77±5.76)%,(9.58±5.45)%.PHA激活后mIL-2R对照组与实验组分别为:(69.82±5.36)%,(67.98±3.69)%,(69.11±2.19)%,(63.93±1.32)%,(66.32±5.26)%.慢性乙肝患者血清中sIL-2R,IL-6,IL-8,TNF-α分别为:(798.9±69.0)ng/L,(2806.2±211.7)ng/L,(480.6±32.4)ng/L.正常对照组＜100ng/L,且在慢性肝炎、肝硬变活动期与稳定期之间、重型肝炎的肝坏死与恢复期之间,血清IL-6,IL-8,TNF-α三项指标的差异有显著性,均P＜0.001.结论乙肝患者存在免疫调节紊乱,而免疫异常至少有部分原因是细胞因子的作用.     

丙型肝炎各级肝硬化患者的抗病毒治疗策略

丙型肝炎病毒（HCV）感染是引起肝硬化、终末期肝病以及肝细胞癌的重要原因。慢性丙型肝炎的标准化治疗方案———聚乙二醇化干扰素α联合利巴韦林已取得了良好的效果,但进展至肝硬化尤其是失代偿期的患者多难以耐受干扰素的不良反应,给抗病毒治疗带来困难。面对我国丙型肝炎肝硬化比例较高、肝移植实施困难、对标准的抗病毒治疗方案应答率高的特点,参考国际指南,作者在国内率先探索和提出了丙型肝炎肝硬化分级标准及相应的抗病毒治疗策略,并进行了相关的临床研究和应用。依据作者提出的丙型肝炎肝硬化的分级方法,先采取不同的处置方法缓解脾亢或减少副作用后,再采用标准化抗病毒治疗方案,可以有效地延缓肝硬化的进展,减少HCV感染相关并发症,最终提高患者生活质量。     

抗丙型肝炎病毒锤头结构核酶的计算机设计和载体的构建

目的选择针对丙型肝炎病毒（HCV）5'非编码区（NCR）和核心区（C）的核酶（ribozyme,Rz）切割位点,构建带自剪切的Rz真核表达载体。方法应用计算机辅助设计,根据能量最低化原理,以HCV－H（1a）株SNCR和C靶序列,预测其二级结构,选择理想的Rz切割位点,设计锤头结构核酶;体外合成针对HCV5'NCR的Rz213和Rz260的cDNA,通过亚克隆技术连接于真核表达载体（pcDNA3）。结果在124个自然切割位点（CUX和GUX）中选出213（CUC）、260（GUA）、407（GUC）和498（CUU）4个切点;Rz213和Rz260的DNA序列分析,结果与合成序列完全一致,酶切鉴定两Rz连接正确。结论计算机可作为抗病毒Rz设计的重要辅助工具;通过亚克隆技术可使目的Rz两端带自剪切Rz,并成功地插入真核表达载体。     

核酶对人HCC细胞内HBeAg的抑制作用

目的观察针对ＨＢＶＣ区双位点核酶对ＨＢｅＡｇ在细胞内表达的抑制作用．方法利用亚克隆技术,从质粒ｐＧＥＭＲｚ１２３切下ＥｃｏＲⅠＢａｍＨⅠ片段,双粘端克隆于真核表达质粒ｐＢＢＳ２１２中,将该质粒与ｐ１．２Ⅱ（含ＨＢＶ全序列）,共转染人ＨＣＣ细胞（人肝癌细胞株）,观察该核酶在细胞内对ＨＢｅＡｇ合成的抑制作用．结果在人ＨＣＣ细胞中ｐ１．２Ⅱ可表达出ＨＢｅＡｇ;该核酶对ＨＢｅＡｇ的合成抑制率达６５％．结论该双位点核酶可能通过针对ＨＢＶＣ区基因的剪切作用,阻断Ｃ区基因的表达,抑制了ＨＢｅＡｇ的合成     

中国人丙型肝炎病毒CTL多表位肽诱发的细胞免疫应答

目的:观察丙型肝炎病毒(HCV)C区、E区、NS3,NS4,NS5区的CTL模拟表位所诱导的细胞免疫.方法:用计算机预测的12条多肤体外刺激外周血单个核细胞,观察其增值情况,ELLSA方法检测培养上清中IFN-γ,水平的变化.结果:(1)NS4B(1793-1801)SMMAFSAAL和NS5 A(1991-1999)VISDFKVWL刺激HCV患者外周血单核细胞后,患者PBMC出现了明显的增值;(2)培养上清中的实验组IFN-γ水平明显高于阴性对照组.结论:预测的HCV CTL表位NS4B(1793-1801)NS5A(1991-1999)能够引起一定水平的细胞免疫.