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1.
核酶对细胞内HBeAg表达抑制作用的定量分析 总被引:6,自引:0,他引:6
目的定量观察双位点核酶对细胞内HBV基因表达的抑制作用。方法构建针对HBVC区双位点核酶的真核表达载体(pBBS212-Rz),将该质粒与pl.2Ⅱ(含HBV全序列),共转染人肝细胞癌(HHCC)细胞株,对转染细胞所表达HBeAg进行间接免疫荧光染色,用共聚焦显微镜对其含量进行定量分析。结果共转染细胞可以表达HBeAg,同对照组相比,核酶组荧光量明显下降。结论在核酶与HBV共转染细胞中,核酶通过对HBVmRNA的剪切作用,使HBeAg的表达量明显受到抑制。 相似文献
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乙型肝炎病毒C基因逆转录病毒载体的构建及在永生化人外周血B细胞中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 体外研究乙型肝炎病毒C(HBV/C) 基因变异的生物学意义。方法 应用逆转录病毒载体pXT1 构建HBV/C 基因表达载体,并转染永生化人外周血B 细胞使之稳定表达HBcAg。结果 重组质粒pXT1HBV/C 经聚合酶链反应(PCR) 和BglⅡ及XhoⅠ双酶切鉴定均阳性,转染后的永生化人外周血B 细胞PCR 鉴定含目的DNA,流式细胞仪分析显示,约47 .4 % 的细胞膜上表达了HBcAg。结论 HBV/C基因逆转录病毒表达载体有较高的转染效率,目的基因能在宿主细胞中稳定表达,有利于系列研究HBV/C基因变异的生物学意义。 相似文献
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HBV基因疫苗联合抗原蛋白免疫小鼠的研究 总被引:19,自引:12,他引:7
目的构建乙肝病毒(HBV)基因疫苗,观察其与HBV表面抗原蛋白(HBsAg)联合免疫小鼠诱导的免疫应答.方法构建重组真核表达质粒pCR31S作为HBV基因疫苗,联合应用纯HBsAg蛋白免疫Balb/c小鼠,以单用基因疫苗pCR31S或纯蛋白HBsAg免疫小鼠作为对照组.采用ELISA法检测免疫小鼠血清抗HBs,另取免疫小鼠脾细胞,用3HTdR掺入法测定各组免疫小鼠的淋巴细胞增殖活性.结果2,4wk时联合免疫组抗HBs效价低于纯蛋白免疫组,高于基因疫苗免疫组;6wk后基因疫苗免疫组抗HBs效价升至最高,联合免疫组次之.3HTdR掺入法测定显示,各组免疫小鼠的淋巴细胞增殖反应差异不显著.结论乙肝病毒基因疫苗与表面抗原蛋白联合免疫无优势. 相似文献
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反义乙肝病毒S基因真核载体构建及体外抗乙肝病毒作用 总被引:1,自引:2,他引:1
目的:探讨反义RNA抗乙肝病毒(HBV)作用。方法:构建了正,反义HBVS基因重组EB病毒载体pMEP4s,pMEP4Sas,DNA-磷酸钙共沉淀法将重组载体DNA转染2.2.15细胞,潮霉素筛选1个月得到抗性细胞克隆,ELISA,斑点杂交法分别检测抗性细胞上清HBsAg,HBeAgHBVDNA水平,结果:转染后1,2月,反义载体HBsAg,HBeAg的抑制率分别达75%,51.6%,70%,46 相似文献
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目的探讨血清HBeAg阴性(双抗体夹心法)与HBeAg/IC形成及HBV变异株A1896的关系,评价HBeAg/IC检测的临床意义.方法单克隆抗HBe固相ELISA检测血清中HBeAg/IC;套式多聚酶链反应检测HBVDNA;3'碱基特异多聚酶链反应判断A1896变异;ELISA检测HBeAg、抗HBe,研究对象为117例慢性HBV感染者,20例健康对照统计处理采用卡方检验.结果HBeAg/IC阳性血清中HBVDNA检出率明显高于HBeAg/IC阴性血清,P<0001(913%vs362%);29份HBeAg阴性、HBVDNA阳性血清中仅5例(172%)检出A1896,而且其中2例与野毒株(G1896)混合感染并伴HBeAg/IC阳性.29份中17份(587%)为HBeAg/IC阳性的G1896感染;血清抗HBe阳性组A1896检出率高于抗HBe阴性组,P<005(25%vs32%).结论HBeAg/IC为HBV活跃复制指标;临床HBeAg阴性、HBVDNA阳性患者仍多数为G1896感染,HBeAg/IC形致双抗体夹心法不能检出HBeAg;抗HBe应答可能为促使前C变异的重要因素 相似文献
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特异性乙型肝炎病毒X基因反义核酸体外抗病毒作用 总被引:6,自引:0,他引:6
为了观察互补于乙型肝炎病毒(HBV)X基因的三段硫代反义核酸(ASON)体外抗病毒作用,采用ELISA和PAP-ELISA法检测ASON作用前后2,2,15细胞上清中乙型肝炎病毒表面抗原、e抗原及X抗原(HBsAg、HBeAg、HBxAg)含量变化及细胞原位杂交检测细胞内HBVDNA含量变化。结果表明,三段ASON均可抑制HBsAg、HBeAg和HBxAg的表达,其抑制率分别为80.65%、62.76%和78.07%;细胞内HBVDNA也明显减少。据此认为,HBxAg表达量下降可能系ASON序列特异性封闭作用所致,而HB-sAg和HBeAg表达量以及HBVDNA含量降低,可能是通过HBxAg对HBVDNA启动子的反式激活功能降低而实现的。 相似文献
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不同基因区反义寡核苷酸抑制乙型肝炎病毒基因表达的比较 总被引:11,自引:0,他引:11
目的探讨反义寡核苷酸(ASON)特异性抗病毒作用。方法在HepG22.2.15细胞中观察了4段16聚针对乙型肝炎病毒(HBV)基因不同功能区的ASON对病毒复制的抑制作用。结果ASON能显著抑制HBV基因的抗原表达(P<0.001),在S基因区设计的ASON对HBsAg的抑制作用明显优于C基因区的ASON(P<0.05)。反之,在C基因区设计的ASON对HBeAg的抑制作用又明显优于S和Pre-S2基因区的ASON(P<0.01)。4段ASON的联合用药并不能增强其对HBV的抑制作用。结论ASON可能成为一种有开发潜力的抗病毒药物。 相似文献
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海藻硫酸多糖抗乙型肝炎病毒的实验研究 总被引:11,自引:0,他引:11
1.材料与方法:海藻硫酸多糖(SPS)是自制的一种天然硫酸酯多糖。在HBV基因转染的人肝癌细胞系 2.2.15细胞中,观察SPS在对HBeAg和HBsAg的抑制作用,以齐多夫定和灵芝多糖作为对照药物。选用鸭肝炎动物模型,以阿昔洛韦为阳性对照,观察SPS对DHBV感染鸭血清DHBV DNA水平的抑制作用。 2.结果:SPS在 2.2.15细胞培养中对HBsAg和HBeAg的分泌有明显抑制作用,随着SPS浓度的增高,对HBeAg和HBsAg表达的抑制作用增强,最高抑制率分别为70.1%±4.2%(IC5… 相似文献
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目的 研究硫代磷酸反义寡核苷酸(S-ASON)的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。方法 作者以2.2.15细胞作为研究对象,在HBV基因S区和C区的翻译起始位点设计合成了2段16聚S-ASONs,采用酶联免疫吸附试验检测了培养细胞上清中表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的分泌情况。结果 当S-ASON浓度为每天2μmol/L时,对HBsAg和HBeAg的抑制率可分别达到88%和75%,而无关 相似文献
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目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)携带者肝组织病理与血清学指标的关系。方法对50例HBV携带者进行肝穿刺取肝组织送病理,研究病理结果与血清学指标的关系。结果 26例HBeAg阳性患者中,全部为HB-VDNA阳性,其中肝组织病理显示6例为G3S1,全为40岁以上的患者,12例G2S1,有1例40岁以上患者,8例为G2S0。18例抗HBe阳性患者中,有12例HBVDNA阳性患者,其中肝组织病理显示6例为G2S1,(有2例40岁以上),6例为G2S0,有6例HBVDNA阴性患者,其中5例为G2S0,1例为G1S0。6例HBeAg与抗HBe均阴性的患者中,有HBVDNA阳性4例,其中2例为G2S1,2例为G2S0。HBVDNA阴性2例,其中1例为G2S1,1例为G2S0。结论 40岁以下的HBV携带者肝穿均指示有程度不等的炎症和有或无肝纤维化,且炎症程度和肝纤维化程度与HB-VDNA高低不成正比,无明确关系,与HBeAg是否阳性也无正比关系。 相似文献
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替比夫定对HBV携带者病毒血清学和肝脏病理学的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的观察HBV携带者经替比夫定治疗后病毒血清学和肝脏病理学的改变情况。方法将42例HBV携带者分成两组,观察组单用替比夫定100 mg/d口服,疗程一年以上,对照组单用苦参素胶囊口服,疗程6个月。观察两组治疗前及治疗后6个月肝脏病理组织学及HBVM、HBVDNA、肝纤维化指标的改变情况。结果治疗6个月后,观察组肝组织改善程度明显优于对照组(P〈0.05),观察组肝组织炎症活动指数由治疗前的(7.8±3.8)分下降至治疗后的(4.5±4.2)分(t=7.358,P〈0.01),HBVM、HBVDNA、血清纤维化指标与对照组比较也显著改善(P〈0.01或〈0.05)。结论替比夫定对HBV携带者近期疗效显著,临床上肝功能正常的HBV携带者可进行规范的抗病毒治疗。 相似文献
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T. Aikawa K. Kanai M. Kako T. Kawasaki K. Hino S. Iwabuchi H. Tsubouchi Y. Takehira F. Tsuda H. Okamoto Y. Miyakawa M. Mayumi 《Journal of viral hepatitis》1995,2(5):243-250
Summary. Recombinant interferon-α2a (IFN-α2a) in a total dose of 702 MU was given to 31 patients: nine with wild-type hepatitis B virus (HBV) and hepatitis B e antigen (HBeAg) (A); four with HBeAg and a mixed infection with wild-type HBV and precore mutants (B); 11 with antibody to HBeAg (HBeAb) and a mixed infection (C); and seven with HBeAb and precore mutants alone (D). HBV DNA was not cleared in any patient in groups A and B. By contrast, in patients with HBeAb, HBV DNA was ultimately lost in four patients in group C, as well as in 10 patients in group D. Thus, patients with HBeAb and infected with precore mutants alone (D) lost serum HBV DNA more often than those with HBeAg and wild-type HBV (A). Patients with low pre-treatment levels of HBV DNA cleared virus more frequently, and the response of precore mutant to IFN was comparable with that of wild-type HBV in patients who had a mixed infection. Based on these results, precore mutants do respond to IFN, and therefore, IFN is indicated in patients with HBeAb, especially those with low serum HBV DNA levels. 相似文献
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目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA、HBeAg与肝组织HBcAg及炎症分级的关系.方法 回顾性分析250例CHB肝穿刺患者,按血清HBV DNA水平,分为A组(<3 log10 IU/ml)45例,B组(3~6 log10 IU/ml)138例,C组(>6 log10 IU/ml)67例.按HBeAg阴阳性不同分为阳性组142例,阴性组108例.分别与肝组织中HBcAg水平、肝组织炎症分级进行比较,分析彼此的相关性,率的比较用卡方检验及确切概率法,相关性分析采用直线相关分析.结果 血清HBV DNA不同水平与肝组织HBcAg免疫组化比较差异有统计学意义(χ2=11.1,P=0.05),两者之间呈正相关(r=0.75,P=0.001);与肝组织炎症分级(G)比较差异无统计学意义(χ2=13.3,P=0.075),两者之间也无相关性(r=0.04,P=0.325).HBeAg阳性和阴性分组与肝组织中HBcAg水平比较差异有统计学意义(χ2=6.64,P=0.01),两者之间呈正相关(r=0.56,P=0.001);与肝组织炎症分级(G)比较差异无统计学意义(χ2=8.43,P=0 065),两者之间也无相关性(r=0.06,P=0.415).结论 CHB患者肝组织HBcAg表达更能反映出肝内HBV复制状态,患者血清中测不出病毒标志物时,可以考虑肝穿刺以观察肝组织中HBcAg表达来判断HBV复制状态具有重要意义. 相似文献
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成人急性乙型肝炎大多呈自限性病程,但有5%-10%的慢性化几率,本文针对成人感染乙型肝炎病毒后是否需要抗病毒治疗、抗病毒治疗的时机、适应的患者群以及如何进行抗病毒治疗作一综述。 相似文献
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B.M. GANDHI M. IRSHAD S.K. ACHARYA Y.K. JOSHI B.N. TANDON 《Journal of gastroenterology and hepatology》1988,3(2):139-142
The presence of HBeAg- and HBV-specific DNA-polymerase (DNA-P) activity—regarded as markers of HBV multiplication—were studied in 40 patients with fulminant hepatitis B within 1-5 days of the onset of hepatic encephalopathy. HBeAg and DNA-P were detected in three (7 %) and 21 (51%) of the patients respectively. Only three (7%) were positive for anti-HBs. DNA-P activity was present in 38.1 % even 10 days after the appearance of icterus. Present findings confirm an ongoing HBV multiplication in about half of the patients of fulminant hepatitis B. 相似文献
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Detection of HBV core promoter and precore mutations helps distinguish flares of chronic hepatitis from acute hepatitis B 总被引:1,自引:0,他引:1
Kusumoto K Yatsuhashi H Nakao R Hamada R Fukuda M Tamada Y Taura N Komori A Daikoku M Hamasaki K Nakao K Ishibashi H Miyakawa Y Eguchi K 《Journal of gastroenterology and hepatology》2008,23(5):790-793
Background and Aim: Acute exacerbation of chronic hepatitis B has to be distinguished from acute hepatitis, because treatment strategies differ between them. Methods: Mutations in the core promoter and precore region of hepatitis B virus (HBV) were determined in 36 patients with acute exacerbation of chronic hepatitis B, in whom alanine aminotransferase (ALT) increased above 500 IU/L, as well as the 36 patients with acute hepatitis. Results: Mutations in the core promoter (A1762T/G1764A) and precore region (G1896A) were more frequent in patients with acute exacerbation of chronic hepatitis than acute hepatitis (81% vs 19%; P < 0.0001 and 58% vs 6%; P < 0.0001, respectively). Of the 19 patients with mutations in both the core promoter and precore region, 17 (89%) had acute exacerbation of chronic hepatitis. In contrast, among the 32 patients with the wild‐type for both the core promoter and precore region, 29 (89%) developed acute hepatitis. By multivariate analysis, the double mutation in the core promoter was predictive of acute exacerbation in chronic hepatitis with the highest odds ratio at 26.4. Conclusions: In patients with hepatitis B having ALT levels >500 IU/L, mutations in the core promoter and precore region are useful in distinguishing acute exacerbation of chronic from acute HBV infection. Detection of these mutations would be useful for commencing prompt antiviral treatments on patients with acute exacerbation of chronic hepatitis for a better prognosis. 相似文献