细菌脂多糖诱导小鼠DC2.4细胞TLR7蛋白的表达

目的:探讨细菌脂多糖(LPS)对小鼠树突状细胞(DC)系DC2.4 TLR7蛋白表达的诱导作用.方法:用RPMIl640完全培养液培养DC2.4细胞,光学显微镜观察LPS刺激前后的细胞形态特征,RT-PCR和Western blot分别测定TLR7 mRNA和蛋白表达.结果:LPS刺激前后,细胞中均有TLR7 mRNA转录.LPS刺激前,细胞较小而透亮,树突较少,无,TLR7蛋白表达;LPS刺激后,细胞体积增大,树突增粗增多,刺激后12 h、24 h、48 h,TLR7蛋白均有表达,且在3个时间点的表达量基本一致.结论:LPS可诱导DC2.4中TLR7蛋白的表达.     

体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒感染Huh7.5细胞的透射电镜观察

目的 通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒(HCV)感染Huh7.5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化.方法 将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6/JFH体外转录为HCV RNA,电穿孔转染至Huh7.5细胞,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定培养上清中病毒数量;间接免疫荧光检测病毒蛋白的表达;收取转染后细胞培养上清感染原始Huh7.5细胞,制作超薄细胞切片,透射电子显微镜技术观察被感染细胞中病毒颗粒的形态学特征及细胞超微结构的变化.结果 qRT-PCR显示不同时间点收取的转染后细胞培养上清中含有高水平的病毒量;间接免疫荧光显示病毒NSSA非结构蛋白高表达;透射电子显微镜观察到被感染的Huh7.5细胞内含有大量有包膜或无包膜的病毒样颗粒,细胞质内部分膜性细胞器增生,出现黄病毒科病毒感染后特征性结构及某种未知结构等.结论 体外培养的嵌合体HCV具有HCV颗粒的形态学特征,并能够有效感染人源性肝细胞Huh7.5.     

抗T细胞McAb延长皮肤移植存活的研究进展

皮肤移植是救治大面积深度烧伤的关键措施之一。但终因机体的排斥反应,移植皮片不能长期存活。主要组织相容性抗原(MHC)是诱导同种排斥反应的主要因素,T淋巴细胞是介导排斥反应的主要免疫活性细胞。目前,抑制皮肤移植排斥反应的方法根据机理可分为:(1)体外处理移植皮片,降低其免疫原性,如紫外线照射,FA或CSA预处理皮片,表皮细胞培养等;(2)抑制受体免疫功能,延迟排斥反应,如全身应用免疫抑制剂,淋巴结照射等;(3)联合应用。常用的全身免疫抑制剂,如糖皮质激素,抗胸腺细胞血清(ATS)或抗淋巴细胞血清(ALS)都因特异性差,副作用大,限制了在烧伤临床皮肤移植中的应用单克隆抗体(McAb)作为一种新型免疫抑制剂,引起了极大的关注。目前的研究发现具有抗移植排斥反应的McAb有以下     

丙型肝炎病毒E1E2蛋白原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

目的 :构建丙型肝炎病毒 (HCV)包膜糖蛋白 (E1E2 )基因的原核表达载体 ,为研究HCVE1E2蛋白属性及基因免疫奠定基础。方法 :设计HCVE1E2区基因上、下游引物 ,分别引入BglⅡ及EcoRI酶切位点 ,以含有HCVH株基因序列的质粒pBRTM/HCV1- 30 11为模板 ,通过PCR扩增获得HCVE1E2区基因片段 ,将其克隆入原核表达载体pRSETA ,然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定 ;将此表达载体转化入表达菌BL2 1(DE3)pLySs诱导表达 ,并采用SDS -PAGE对表达产物进行鉴定。结果 :经酶切及序列测定分析表明 ,成功地构建了重组原核表达载体pRSETA -HCVE1E2 ;SDS -PAGE显示目的蛋白大量表达 ,且呈非溶状态。结论 :HCVE1E2融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达 ,为HCVE1E2蛋白的制备及基因疫苗的研制奠定了基础。     

老年人流行性出血热的特点、并发症及预后分析

目的 :分析老年人流行性出血热 (EHF)的特点 ,总结诊断与治疗体会。方法 :对老年 (≥ 6 0岁 )EHF 131例的诊断、治疗及转归进行分析 ,并与同期收治的非老年组 (<6 0岁 )EHF 12 0例进行比较。结果 :老年EHF占同期EHF(973例 )的 13 6 % ,病死率 7 8%。老年EHF重型和危重型病例多 ,发病早期表现不典型 ,误诊率高 ,病程各期明显延长 ,肾功能损害严重且持续时间长 ,多器官功能障碍综合征 (MODS) 18 8% 8 3%、继发性肺部感染 39 6 8% 10 2 %、肺水肿 2 8 5 7% 7 3%、消化道出血 38 6 % 2 0 6 %、营养失衡12 7% 3 8%等 ,EHF的并发症老年组高于非老年组 (P <0 0 5 )。结论 :老年EHF病情重 ,早期表现常不典型 ,病程持续时间长 ,合并疾病和并发症多 ,病死率高     

抗Thy—1单克隆抗体的免疫抑制作用

从体内，体外研究了抗Ｔｈｙ－１单克隆抗体（Ｍｃ－Ａｂ）的免疫抑制作用，结果表明：（１）体外抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞，无补体时能抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；（２）在体内，可以抑制小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖，但不影响ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖反应。结果说明：抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ的免疫抑制使用可能包括补体依赖性细胞毒作用和通过Ｔｈｙ－１分子 地     

乙型肝炎病毒长期携带机理的研究进展

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染后，导致病毒长期携带的机理还不清楚。本文综述了近年来的研究进展，并结合作者的研究从ＨＢＶ的分子生物学特性，ＨＬＡ系统和免疫功能状态分析了ＨＢＶ长期携带的机理，着重从病毒突变体的产生逃避宿主免疫系统的作用，机体对ＨＢＶ病毒抗原形成完全或不完全免疫耐受，对ＨＢＶ特异性免疫功能低下和抗－ＨＢｓ产生不足，以及免疫调节功能紊乱等方面探讨了机体不能彻底清除ＨＢＶ，形成长期病毒携带的机     

类风湿性关节火患者血清白细胞介素的检测

为了解类风湿性关节炎患者的免疫损伤机理，应用酶联免疫吸附法检测３８例ＲＡ患者血清可溶性白细胞介素２－受体和白细胞介素８（ＩＬ－８）含量，并检验其相关性。     

丙型肝炎病毒C区的DNA改组

目的：利用DNA改组技术进行不同基因型别丙型肝炎病毒（HCV）基因组C区的人工进化。方法：首先利用PCR扩增了三段具有较高序列同源性的460bp基因片段，然后将其等量混合，在Mg^2＋存在的条件下，用脱氧核糖核酸酶（DNase Ⅰ）切割成50bp左右的小片段。这些小片段在不外加引物的条件下，利用PCR反应进行重聚，再将重聚物经过一轮正常的PCR扩增。结果：获得了与原片段大小相当的基因片段。结论：这一技术为进一步筛选高活性的HCVC区基因打下基础，有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因，并为改组其他基因家族提供了借鉴。     

TH1/TH2在慢性丙型肝炎发病机制中的作用

目的 研究Th1/Th2变化在慢性丙型肝炎发病机制中的作用。方法 采用双抗体酶联分析法检测了20例正常人,35例慢性丙型肝炎,30例慢性乙型肝炎患血清中的IFN－γ,IL-2,IL－4和IL－6的水平。结果 慢性丙型肝炎组Th2类细胞因子（IL－4,IL－6）水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,Th1类细胞因子水平IL－2也增高（P＜0．05）,然而,Th1类细胞因子IFN－γ水平有增加趋势,但无统计学差异（P＞0．05）。Th2类细胞因子水平比Th1类细胞因子水平高。结论 Th2类细胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降可能与慢性丙型肝炎的病程持续有关。