敲低MANF对利福平诱导HepG2细胞损伤的影响及机制

目的 探讨敲低中脑星型胶质细胞源性神经生长因子(MANF)对利福平(RFP)诱导HepG2细胞损伤的影响及机制.方法 慢病毒转染技术构建MANF敲低稳转细胞株(MANF Y25)及其对照细胞株(MANF Y07).实验分为4组:MANF Y07+ DMSO组、MANF Y07+ RFP组、MANF Y25+ DMSO组、MANF Y25+RFP组.给予HepG2细胞100μmol/L RFP 24 h后,Western blot和qRT-PCR检测各组细胞MANF及未折叠蛋白反应(UPR)相关基因葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、蛋白酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译启动因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)、Tribbles同源蛋白3(TRIB3)、肌醇需求激酶1(IRE1)、剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1-S)、非剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1-U)、活化转录因子6(ATF6)的蛋白及基因表达水平;Annexin V-PE/7-AAD双染法检测各组细胞凋亡率;CCK-8法检测各组细胞增殖变化;试剂盒检测各组细胞培养上清液中细胞损伤标志物谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)相对含量变化.结果 在蛋白水平,RFP激活MANF、GRP78、p-eIF2α、ATF4、ATF6的蛋白表达;在基因水平,RFP诱导HepG2细胞MANF、GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、TRIB3的基因表达,并且MANF敲低后GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、ATF6蛋白表达水平及上述UPR相关基因的基因表达水平进一步上调(P＜0.05),MANF敲低后细胞凋亡率升高(P＜0.01),细胞增殖能力降低(P＜0.01),细胞培养上清液中ALT、AST、AKP、TBIL、IBIL水平升高(P＜0.05),说明细胞损伤加重.结论 RFP可激活UPR,敲低MANF后这种效应进一步加强,同时细胞损伤加重,表明MANF可能通过调节URP而在RFP诱导HepG2细胞损伤中发挥保护作用.     

仙灵骨葆胶囊治疗股骨头坏死的Meta分析和GRADE评价

目的 系统评价仙灵骨葆胶囊（XLGB）治疗股骨头坏死（ONFH）的临床疗效与安全性。方法 检索建库至2022年6月1日PubMed、Cochrane Library、Embase、中国学术期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库（Wanfang Data）、中国生物医学文献数据库（SinoMed）、维普生物医学数据库（VIP）中有关XLGB治疗ONFH的随机对照试验（RCT）。两位研究者分别进行数据提取和偏倚风险评估。采用ReviewManager 5.4软件进行Meta分析,使用GRADE pro 3.6.1软件对汇总的证据进行分级。结果 共纳入13项RCTs,包括1126名患者。Meta分析显示,与常规西医治疗相比,联合XLGB治疗明显改善患者的Harris评分［MD=10.88,95%CI（6.66,15.10）］、髋关节功能优良率［RR=1.23,95%CI（1.15,1.30）］、视觉模拟评分［MD=-2.01,95%CI（-2.09,-1.93）］,提高患者Wards三角［MD=0.04,95%CI（0.03,0.04）］、股骨粗隆［MD=0.04,95%CI（0.03,0.04）］和股骨颈骨密度［MD=0.06,95%CI（0.05,0.08）］,改善部分凝血活酶时间［MD=8.47,95%CI（7.02,9.92）］和纤维蛋白原［MD=-0.42,95%CI（-0.50,-0.35）］,两组比较均有差异（P＜0.00001）。XLGB治疗不会提高不良反应的发生率;GRADE对现有证据质量评级为低或极低质量。结论 在临床中应用XLGB治疗ONFH患者疗效明确,安全可靠,但鉴于纳入文献研究质量不高,仍需更多高质量的临床试验验证本结论。     

MOOC与PBL-CBL联合应用在临床医学八年制中医学教学中的探索

<正> 随着时代发展,对医学高级人才的要求除了掌握扎实的专业技能之外,还要了解文、史、哲等方面的综合性知识。八年制医学教育是基于我国培养高层次医学人才的需要,其培养目标明确提出要求八年制医学生具有扎实的基础医学和临床医学理论知识,基本的中医学、预防医学和群体保健知识,以及较广泛的人文社会科学和自然科学知识,能够从生理、心理和社会等多角度分析和处理疾病,解决人民群众健康问题[1]。八年制高层次医学人才的培养需要加强中医学课程的学习,目前的中医学教学存在课时短、内容多、学生难以理解抽象的中医理论等问题。本教研室在临床医学八年制学生的中医学教学中,以问题为导向(problem-based learning,PBL)-以病例为基础(case-based learning,CBL)的教学模式与大型开放式网络课程(massive open online course,MOOC)进行联合应用,将课前在线学习、临床情境与基础知识有机结合,发挥学生在教学过程中的主体地位和教师的主导地位,帮助学生理解中医学的基本理论、掌握基本技能,培养其主动学习、沟通合作等综合素养,显著提升学习效果,同时还能提高教师的教学水平,以期为临床医学专业的中医学教学提供新的改革思路。     

乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌发生关系的研究现状

目的总结目前国内外对乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)、乙型肝炎病毒(HBV)基因亚型和肝细胞癌三者之间关系的研究现状,并对其在临床工作中的意义进行展望。方法查阅近年来国内外关于HBx、HBV基因亚型和肝细胞癌研究的相关文献并加以综述。结果 HBx和肝细胞癌的发生、发展、迁徙以及转移之间有着密切的关系,HBV基因亚型与肝细胞癌存在一定的关联,但具体机制尚未阐明。结论 HBx和HBV基因亚型在肝细胞癌的发生发展过程中扮演着重要的角色,随着分子机制的不断深入研究,必将推动乙型肝炎、肝硬化和肝细胞癌的诊治工作,为临床工作者提供更为个体化的干预手段。     

肝细胞肝癌免疫检查点阻断治疗疗效相关生物标志物的研究进展

目的总结与肝细胞肝癌(HCC)免疫检查点抑制剂治疗疗效相关的生物标志物。方法查阅并总结以靶向程序性死亡受体1及其配体1(PD-1/PD-L1)通路抑制剂为主的免疫检查点抑制剂单药治疗,以及其与靶向药物联合治疗的相关生物标志物的基础和临床应用研究文献,并加以综述。结果免疫治疗与靶向治疗的联合方案为晚期HCC患者的治疗带来了希望,但仍有一部分患者不能临床获益。目前研究表明,肿瘤组织中PD-L1表达、肿瘤突变负荷、肿瘤浸润淋巴细胞、外周免疫细胞、循环肿瘤DNA、肠道微生物菌群等均对HCC的免疫治疗或靶向联合免疫治疗疗效有一定的预测作用。结论目前尚无明确的生物标志物能预测HCC免疫治疗及其联合方案的疗效,仍需要更多的前瞻性研究来证实这些生物标志物的预测价值,并建立一个多因素预测模型或免疫评分来筛选可能获益的患者,这对HCC的精准免疫治疗具有重要意义。     

髂动脉分支支架拓展应用保留单侧髂内动脉的可行性与安全性

背景与目的 对于主-髂动脉瘤合并双侧髂内动脉瘤（IIAA）的患者,髂动脉分支支架（IBD）是目前保留单侧髂内动脉（IIA）首选治疗方式,但商业化的IBD因个体化解剖差异而应用受限,难以满足所有患者情况,因此,本研究探讨IBD拓展应用保留单侧IIA的可行性与安全性。方法 回顾性分析2021年4月—2021年6月复旦大学附属中山医院厦门医院行腹主动脉瘤腔内修复（EVAR）中采用不同方法拓展应用G-iliac^TM IBD保留单侧IIA的3例主-髂动脉瘤合并双侧IIAA患者临床资料。结果 3例患者均为男性,年龄66~70岁;腹主动脉瘤（AAA）最大直径29~56 mm,保留侧IIA主干有效腔管径及扩张处最大直径分别为10~11 mm和17~20 mm。保留侧髂总动脉（CIA）及髂外动脉（EIA）直径分别为15~28 mm和13~18 mm,栓塞侧IIA主干扩张处最大直径25~37 mm。3例患者均接受EVAR,采用G-iliac^TM IBD保留IIAA相对较小的一侧,弹簧圈栓塞IIAA较大一侧,技术成功率100%。保留单侧IIA拓展策略包括：将IIA桥接支架锚定于其主干相对健康管腔处,以及利用球扩式覆膜支架远端后扩放大特性,加强支架与扩张IIA远端密封性。围手术期无心梗、脑梗、出血及死亡等重大并发症发生。1例发生保留侧IIA来源Ib型内漏,球囊扩张后内漏消失;1例出现肠系膜下动脉来源II型内漏,出院前及术后3个月随访无明显改变;1例术后随访期间出现栓塞侧IIA分支来源II型内漏,术后3个月内漏消失。均未出现臀肌跛行症状,无支架断裂、移位、血栓等支架相关并发症。结论 对于合并双侧髂内动脉瘤样扩张的主-髂动脉瘤患者,采用不同策略,拓展IBD应用以保留单侧IIA短期内可行、安全,其中远期效果需进一步随访。     

个体化肺结节三维重建模拟手术在胸腔镜肺段切除中的应用

目的探讨个体化肺结节三维重建模拟手术在胸腔镜肺段切除中的应用价值。方法 2018年12月～2019年12月接受手术治疗的肺结节病人60例,随机分为三维重建模拟手术组和非三维重建模拟手术组,每组各30例。比较两组围手术期相关指标的差异。结果两组均顺利完成胸腔镜下肺段切除术;三维重建模拟手术组术前与术中吻合率分别为:结节部位100%,靶段血管96.67%,靶段支气管96.42%;三维重建模拟手术组的手术时间、术中出血量、引流管留置时间、术后总引流量以及术后住院时间均低于非三维重建模拟手术组,差异有统计学意义(P0.05),两组术中清扫淋巴结个数与术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论肺结节基于三维重建个体化胸腔镜解剖性肺段切除术安全有效,较常规手术更具临床应用价值。     

经腹小切口超声引导系膜穿刺逆向开通治疗肠系膜上动脉开口全堵病变

背景与目的：对于肠系膜上动脉（SMA）闭塞患者,尤其是存在开口处动脉粥样硬化性无残端病变,开腹逆行肠系膜动脉支架置入术（ROMS）是一种有效的治疗方法,但该手术创伤较大,一些身体条件差的患者并不适合。笔者通过报告1例SMA全堵病变病例的治疗过程介绍一种改良的微创ROMS技术,以期为临床治疗方法的选择提供参考。 方法：回顾复旦大学附属中山医院厦门医院血管外科2019年10月收治的1例SMA全堵病变患者的临床资料。患者为64岁女性,诊断为SMA闭塞引起的慢性肠系膜缺血,行杂交手术再通SMA。 结果：患者SMA开口处为无残端完全闭塞病变且无侧支血管与腹腔干动脉及脾动脉沟通,顺行或逆行血管腔内开通均无法进行。因患者全身条件较差,难以耐受开放血运重建手术和传统的ROMS。遂做腹部做小切口,超声引导下经系膜穿刺SMA远端建立通路,导丝顺利逆向通过SMA闭塞处进入降主动脉;右侧肱动脉入路导管和逆向导丝对接后顺利正向通过病变,完成球囊扩张和支架置入术。术后患者恢复良好,症状消失,3个月后随访CTA示,支架形态、位置良好,血流通畅。 结论：对于血管腔内治疗失败且全身条件较差的SMA闭塞患者,通过经腹小切口超声引导系膜穿刺逆向开通SMA是可行的。     

健康志愿者禁食禁饮后饮用不同液体胃排空的比较

正随着麻醉技术的不断发展与进步,目前多个国家麻醉医师学会建议麻醉诱导前2 h可选择性推荐患者进清质饮食~([1]),国内多个ERAS专家共识也建议术前2～3 h推荐无胃肠动力障碍患者可饮清流质不超过400 ml。但临床工作中由于医护人员对术前口服清流质饮料的定义缺乏统一标准,使用何种配方的溶液及饮用溶液的最大安全容量尚无定论,从而制约了该方案在临床上的广泛应用。本研究通过观察健康志愿者禁饮食后,饮用不同液体及不同容积的胃排空趋势,探索术前禁饮食     

阿魏酸钠对移植皮瓣缺血再灌注损伤保护的实验研究

目的：通过建立大鼠皮瓣移植损伤的动物模型,观察阿魏酸钠对皮瓣存活率的影响。方法：利用H＆E染色分析皮瓣的损伤程度,利用免疫组化检测皮瓣组织中COX-2及HO-1的表达水平,利用ELISA法检测皮瓣组织中MPO、MDA、NO的含量以及外周血中TNF-α的表达水平。结果：在移植皮瓣缺血再灌注损伤模型中,相比于生理盐水处理组,阿魏酸钠处理可显著提高皮瓣的存活率,同时上调皮瓣组织中HO-1的表达水平,抑制COX-2通路的活化。在阿魏酸钠的作用下,皮瓣组织的MPO、MDA的含量明显下降,同时NO的合成增加,阿魏酸钠可显著抑制外周血中TNF-α的表达水平。结论：阿魏酸钠对移植皮瓣缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其作用机制与减少炎症反应,抑制氧化应激损伤密切相关。